一种具有抗菌性能的互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种具有抗菌性能的互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法，属于精油应用技术领域，包括以下步骤：取一定比例的大豆卵磷脂和胆固醇于圆底烧瓶中，加入适量的有机溶剂超声溶解至澄清；将澄清溶液进行旋转蒸发至得到一层脂质薄膜，将上述脂质薄膜在真空干燥箱中烘干；取一定体积浓度的互叶白千层精油及表面活性剂溶于PBS溶液中，混匀后加入上述的圆底烧瓶中；将圆底烧瓶至于一定温度下预热一段时间，超声数分钟后，将得到的脂质体溶液用超声细胞破碎仪处理一段时间，随后离心；取离心后的脂质体溶液过微孔滤膜得到互叶白千层精油纳米脂质体溶液，所得的脂质体具有较好的稳定性及抗菌性能。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗菌性能的互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法
本专利技术属于精油应用研究领域，具体涉及一种具有抗菌性能的互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法。
技术介绍
互叶白千层，又称茶油树，是茶树精油的主要原料，从互叶白千层新鲜枝叶中提取的茶树精油，属于天然油脂，富含松油精、柠檬油精、桉油酚、茴香素等，具有杀菌消炎、收敛毛孔、治疗伤风感冒、咳嗽、鼻炎、哮喘、改善痛经及生殖器感染等功效。适用于油性及粉刺皮肤，能够治疗化脓伤口及灼伤、晒伤及头屑。广泛用于皮肤保健品、化妆品、药品、食品香料等诸多领域。目前，对茶树精油的研究大多停留在配方研究上，中国专利CN106726942A公布了一种含茶树精油的祛疤涂液，其所用原料按重量份计包括：茶树精油20-30份、胡萝卜籽油12-18份、麻油6-8份、桉树精油3-5份、狗蚁草提取物5-8份、蟹爪兰提取物3-5份。中国专利CN106236650A公布了一种祛痘控油乳膏剂及其制备方法，其所用原料按重量份计包括：金缕梅20～30份、洋甘菊40～50份、佛手柑精油0.4～0.8份、柠檬草精油0.4～0.8份、茶树精油0.3～0.5份、玫瑰精油0.2～0.3份、水杨酸0.1～0.3份、α-羟基酸0.05～0.08份、乳化剂12～15份、防腐剂0.05～0.1份、表面活性剂1～2份、稠度调节剂30～40份、去离子水50～55份。然而，茶树精油的易挥发、水溶性差等不足并没有解决，限制了其进一步的应用，因此，本专利技术通过脂质体对茶树精油进行包封可以很好的解决此类问题。本专利以互叶白千层精油为包封对象，提供一种互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法，通过马尔文纳米粒度仪、透射电子显微镜等仪器考察脂质体形貌和理化特性，并进一步通过紫外分光光度计测定互叶白千层精油的包封率。
技术实现思路
针对互叶白千层精油的易挥发性，本专利技术提供了一种互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法，提高了互叶白千层精油的缓释性能及药理活性，进一步增加了互叶白千层精油的利用价值。本专利技术的具体技术方案如下：一种互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）取一定比例的大豆卵磷脂和胆固醇加入50mL的圆底烧瓶中，添加适量的有机溶剂超声溶解至澄清；（2）取上述澄清溶液进行旋转蒸发至得到一层脂质薄膜，将脂质薄膜在真空干燥箱中烘干；（3）取一定体积浓度的互叶白千层精油及表面活性剂溶于磷酸盐缓冲溶液（PBS）中；混匀后加入上述的圆底烧瓶中；（4）将圆底烧瓶至于一定温度下预热一段时间，超声数分钟后，将得到的脂质体溶液用超声细胞破碎仪处理一段时间，随后离心；（5）取离心后的脂质体溶液过微孔滤膜得到互叶白千层精油纳米脂质体溶液。更进一步的，上述步骤（1）中大豆卵磷脂和胆固醇的比例约为5:1，有机溶剂选用三氯甲烷，超声时间为3-4h；上述步骤（2）中旋转蒸发条件为室温37℃、转速为15rpm，真空干燥箱中干燥12-24h；上述步骤（3）中互叶白千层精油的体积浓度为3%，表面活性剂为吐温-80，其体积浓度为1.2%，PBS体积为10mL；上述步骤（4）中预热温度为55-60℃，预热时间为10-15min，超声时间为2-5min，超声细胞破碎仪功率为360W，处理时间为30min，离心条件为8000rpm离心15min；上述步骤（5）中微孔滤膜为0.45μm。本专利技术提供了一种互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法，利用较为简单的方法及表征手段直观准确的反映互叶白千层精油纳米脂质体的形貌及理化特性，提高了互叶白千层精油的利用价值。附图说明：附图1为透射电子显微镜观察到的互叶白千层精油纳米脂质体形貌示意图。附图2为互叶白千层精油纳米脂质体粒径分布图。附图3为互叶白千层精油纳米脂质体紫外吸收谱图。附图4为互叶白千层精油纳米脂质体紫外标准曲线示意图。附图5为互叶白千层精油纳米脂质体稳定性示意图。附图6为互叶白千层精油纳米脂质体抗金黄色葡萄球菌示意图。其中，由附图1可以发现脂质体分散性较好，粒径约为70nm；由附图2可以看出脂质体粒径范围为30-200nm左右，平均粒径为70nm左右，这与透射电镜结果相符；由附图3可以看出互叶白千层精油在265nm处有吸收峰，进一步通过附图4得到标准曲线；由附图5可以看出互叶白千层精油包封率为65%左右，并且在30天内粒径和包封率基本不变，稳定性较好；由附图6可以看出互叶白千层精油纳米脂质体对金黄色葡萄球菌具有很好的抑制效果。具体实施方式：以下结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细说明，应理解下述具体实施方式仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。实施例1：（1）取90mg的大豆卵磷脂和18mg胆固醇加入50mL的圆底烧瓶中，添加15mL的三氯甲烷，超声溶解至澄清；（2）将上述澄清溶液在室温、转速为20rpm的条件下进行旋转蒸发至得到一层脂质薄膜，将脂质薄膜在真空干燥箱中干燥24h；（3）取体积浓度为3.6%的互叶白千层精油及体积浓度为1.5%的吐温-80溶于10mL的PBS溶液中，混匀后加入上述的圆底烧瓶中。（4）将圆底烧瓶在55℃下预热10min，超声2min后，将得到的脂质体溶液用360W超声细胞破碎仪处理30min，随后在8000rpm条件下离心15min；（5）取离心后的脂质体溶液过0.45μm微孔滤膜得到互叶白千层精油纳米脂质体溶液。实施例2：（1）取75mg的大豆卵磷脂和15mg胆固醇加入50mL的圆底烧瓶中，添加15mL的三氯甲烷超声溶解至澄清；（2）将上述澄清溶液在室温、转速为20rpm的条件下进行旋转蒸发至得到一层脂质薄膜，将脂质薄膜在真空干燥箱中干燥24h；（3）取体积浓度为2.5%的互叶白千层精油及体积浓度为1%的吐温-80溶于10mL的PBS溶液中，混匀后加入上述的圆底烧瓶中。（4）将圆底烧瓶在55℃下预热10min，超声2min后，将得到的脂质体溶液用360W超声细胞破碎仪处理30min，随后在8000rpm条件下离心15min；（5）取离心后的脂质体溶液过0.45μm微孔滤膜得到互叶白千层精油纳米脂质体溶液。综上所述，本专利技术以互叶白千层精油为包封对象，利用薄膜-超声分散法制备出互叶白千层精油纳米脂质体，利用粒径、分散性（PDI）、Zeta电势以及包封率等物理化学指标评价脂质体的性能，并通过TEM观察脂质体的形貌，通过测定储存至30天的脂质体的PDI、粒径、Zeta电势以及包封率评价脂质体的稳定性。脂质体具有安全、无毒副作用、有较好的生物相容性、无免疫抑制作用等优点，在食品工业、医药方面应用时，还能够保护被包埋的活性物质，提高它的稳定性，使它在转运过程中免受酶和免疫系统的破坏，并且超声粉碎能够降低脂质体的粒径，使脂质分散均匀，稳定性高。以上所述仅为本专利技术的实施例，并非因此限制本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有抗菌性能的互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法，具体的步骤为：/n（1）取质量比为5：1的大豆卵磷脂和胆固醇加入50 mL的圆底烧瓶中，添加适量的三氯甲烷超声溶解至澄清；/n（2）取上述澄清溶液在室温、转速为20 rpm的条件下进行旋转蒸发至得到一层脂质薄膜，将脂质薄膜在真空干燥箱中干燥24 h；/n（3）取体积浓度为2.5%-3.6%的互叶白千层精油及体积浓度为1%-1.5%的吐温-80溶于10 mL的磷酸盐缓冲溶液中，混匀后加入上述的圆底烧瓶中；/n（4）将圆底烧瓶在55℃温度下预热10 min，超声2 min后，将得到的脂质体溶液用360 W超声细胞破碎仪处理30 min，随后在8000 rpm条件下离心15 min；/n（5）取离心后的脂质体溶液过0.45 μm微孔滤膜得到互叶白千层精油纳米脂质体溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种具有抗菌性能的互叶白千层精油纳米脂质体的制备方法，具体的步骤为：
（1）取质量比为5：1的大豆卵磷脂和胆固醇加入50mL的圆底烧瓶中，添加适量的三氯甲烷超声溶解至澄清；
（2）取上述澄清溶液在室温、转速为20rpm的条件下进行旋转蒸发至得到一层脂质薄膜，将脂质薄膜在真空干燥箱中干燥24h；
（3）取体积浓度为2.5%-3.6%的互叶白千...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋吉明，陈继伟，吴江敏，许康斌，方晶，董庄庄，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34