包含LRIT2抑制剂作为活性成分用于预防或治疗癌症的药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含LRIT2抑制剂作为活性成分。根据本发明专利技术的LRIT2抑制剂可提高免疫细胞的活性，并因此可用作免疫增强剂。另外，根据本发明专利技术的LRIT2抑制剂可通过增强个体的免疫力来有效地预防或治疗癌症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含LRIT2抑制剂作为活性成分用于预防或治疗癌症的药物组合物
本专利技术涉及用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含LRIT2抑制剂作为活性成分。
技术介绍
T细胞是在人体免疫中发挥重要作用的细胞。T细胞分为杀伤T细胞、辅助性T细胞、调节性T细胞和记忆T细胞。特别地，杀伤T细胞在细胞表面上表达CD8；辅助性T细胞在细胞表面上表达CD4；并且调节性T细胞在细胞表面上表达CD4和CD25。当抗原(例如细菌)从外部进入时，辅助性T细胞分泌物质(例如细胞因子)以使杀伤T细胞和B细胞活化。活化的杀伤T细胞杀伤病原体感染的细胞，并且活化的B细胞分泌抗体以抑制抗原的活性。近来，已尝试通过激活T细胞的这样的免疫调节能力来治疗疾病例如癌症。另外，T细胞介导的疾病被认为是代表多种免疫系统疾病的疾病。特别地，T细胞被认为引起自身免疫病并使其持续。针对自身抗原的免疫应答是由自身反应性T细胞的连续性或周期性活化引起的。另外，作为在自身免疫病中被直接或间接地鉴定的特征性组织损伤和组织破坏的原因，自身反应性T细胞引起了人们的注意。同时，程序性细胞死亡配体1(programmedcelldeathligand1，PD-L1)是1型跨膜蛋白，其是程序性细胞死亡1(programmedcelldeath-1，PD-1)的配体。PD-L1在造血细胞例如T淋巴细胞、B淋巴细胞、树突细胞或巨噬细胞中表达。PD-1被称为免疫检查点(immunecheckpoint)因子或免疫调节剂，其调节T细胞的次级信号传导活性。另外，已报道PD-1能够通过与在细胞(例如活化的T细胞或树突细胞)的表面上表达的PD-L1等结合来发挥作用，以抑制T细胞的功能，例如抑制T细胞的增殖和降低细胞因子的表达(KrzysztofM.Zak，etal.，2015)。近来，已尝试使用调节T细胞免疫功能的物质(例如PD-1和PD-L1)来开发抗癌剂和免疫调节剂。
技术实现思路
技术问题因此，在研究能够抑制或提高免疫细胞活性的物质的过程中，本专利技术人已确定LRIT2细胞信号传导系统可调节T细胞的活性，并由此完成了本专利技术。问题的解决方案在一个实施方案中，提供了免疫增强剂，其包含与LRIT2蛋白结合的物质或抑制LRIT2基因表达的物质作为活性成分。另外，在一个实施方案中，提供了用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含与LRIT2蛋白结合的物质或抑制LRIT2基因表达的物质作为活性成分。另外，在一个实施方案中，提供了用于治疗癌症的方法，其包括向个体施用药物组合物的步骤。本专利技术的有益效果根据本专利技术的LRIT2抑制剂可提高免疫细胞的活性，并因此可用作免疫增强剂。另外，根据本专利技术的LRIT2抑制剂可增强个体的免疫力，并因此可用于有效地预防或治疗癌症。附图说明图1示出了LRIT2抑制T细胞成熟为CD4+T细胞。图2示出了LRIT2抑制T细胞成熟为CD8+T细胞。图3a至3d示出了在其中用LRIT2抑制剂(抗体或siRNA)处理肺癌细胞系A549和外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)的情况下获得的每组PBMC的细胞毒性(％)。图4a至4d示出了在其中用LRIT2抑制剂(抗体或siRNA)处理结肠癌细胞系HCT-116和PBMC的情况下获得的每组PBMC的细胞毒性(％)。图5a至5d示出了在其中用LRIT2抑制剂(抗体或siRNA)处理乳腺癌细胞系MDA-MB-231和PBMC的情况下获得的每组PBMC的细胞毒性(％)。图6a至6d示出了在其中用LRIT2抑制剂(抗体或siRNA)处理胃癌细胞系MKN-74和PBMC的情况下获得的每组PBMC的细胞毒性(％)。图7a至7d示出了在其中用LRIT2抑制剂(抗体或siRNA)处理血癌细胞系U937和PBMC的情况下获得的每组PBMC的细胞毒性(％)。图8a至8d示出了每组用LRIT2抑制剂(3种类型的siRNA中的每一种)处理的小鼠中肿瘤尺寸的变化。本专利技术的最佳实施方式在一个实施方案中，提供了免疫增强剂，其包含与含富含亮氨酸重复序列、免疫球蛋白样结构域和跨膜结构域的蛋白2(leucine-richrepeat，immunoglobulin-likedomainandtransmembranedomain-containingprotein2，LRIT2)蛋白结合的物质或抑制LRIT2基因表达的物质作为活性成分。本文中使用的术语“LRIT2”是“含富含亮氨酸重复序列、免疫球蛋白样结构域和跨膜结构域的蛋白2”的缩写，并且可以是具有SEQIDNO：1的氨基酸序列的蛋白质。具有SEQIDNO：1的氨基酸序列的蛋白质可由具有SEQIDNO：2的核苷酸序列的多核苷酸编码。在本专利技术中，与LRIT2蛋白结合的物质可以是与LRIT2蛋白特异性结合的化合物、适配体(aptamer)、肽，或者抗体或其片段。抗体或其片段可以是选自单克隆抗体、scFv、Fab、Fab’和F(ab)’中的任一种。在本专利技术中，抑制LRIT2基因表达的物质可以是与LRIT2基因的DNA或mRNA互补结合的反义核酸、siRNA、shRNA、miRNA或核酶。LRIT2siRNA可以是SEQIDNO：3至14的核苷酸序列中的任一个。在本专利技术的一个实施方案中，旨在确定靶向LRIT2并抑制其活性的抗LRIT2抗体或LRIT2siRNA是否可提高外周血单个核细胞(PBMC)针对癌细胞的细胞毒性。作为结果，在用LRIT2抑制剂进行处理的PBMC与癌细胞系的混合物中，与对照组相比，PBMC针对癌细胞系的细胞毒性表现出更高的水平。另外，在本专利技术的另一个实施方案中，旨在确定抑制LRIT2活性的LRIT2siRNA是否在小鼠中抑制肿瘤的生长。作为结果，在其中通过用LRIT2siRNA进行处理将LRIT2敲低的小鼠中，与对照组相比，表现出显著抑制的肿瘤生长速率。从以上结果可以看出，靶向LRIT2并抑制其活性的抗LRIT2抗体或LRIT2siRNA阻断或敲低LRIT2并抑制其活性或表达，以使得延迟癌症的进展或使其停止。另外，在一个实施方案中，提供了用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含与LRIT2蛋白结合的物质或抑制LRIT2基因表达的物质作为活性成分。与LRIT2蛋白结合的物质或抑制LRIT2基因表达的物质如上所述。药物组合物可还包含可药用添加剂。在本专利技术中，癌症可以是但不限于选自以下的任一种：膀胱癌、骨癌、血癌、乳腺癌、黑素瘤、甲状腺癌、甲状旁腺癌、骨髓癌、直肠癌、咽喉癌、喉癌、肺癌、食管癌、胰腺癌、结直肠癌、胃癌、舌癌、皮肤癌、脑肿瘤、子宫癌、头颈癌、胆囊癌、口腔癌、结肠癌、肛周癌、中枢神经系统肿瘤和肝癌。根据本专利技术的包含与LRIT2蛋白结合的物质或抑制LRIT2基因表达的物质作为活性成分用于预防或治疗癌症的药物组合物的优选的日剂量可以为0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.免疫增强剂，其包含以下作为活性成分：/n与含富含亮氨酸重复序列、免疫球蛋白样结构域和跨膜结构域的蛋白2(LRIT2)蛋白结合的物质；或/n抑制LRIT2基因表达的物质。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180516 KR 10-2018-00559091.免疫增强剂，其包含以下作为活性成分：
与含富含亮氨酸重复序列、免疫球蛋白样结构域和跨膜结构域的蛋白2(LRIT2)蛋白结合的物质；或
抑制LRIT2基因表达的物质。


2.权利要求1所述的免疫增强剂，其中所述与LRIT2蛋白结合的物质是与所述LRIT2蛋白特异性结合的化合物、适配体、肽，或者抗体或其片段。


3.权利要求2所述的免疫增强剂，其中所述LRIT2蛋白具有SEQIDNO：1的氨基酸序列。


4.权利要求2所述的免疫增强剂，其中所述抗体或其片段是选自单克隆抗体、scFv、Fab、Fab’和F(ab)’中的任一种。


5.权利要求1所述的免疫增强剂，其中所述抑制LRIT2基因表达的物质是与所述LRIT2基因的DNA或mRNA互补结合的反义核酸、siRNA、shRNA、miRNA或核酶。


6.权利要求5所述的免疫增强剂，其中所述LRIT2基因的DNA具有SEQIDNO：2的核苷酸序列。


7.权利要求5所述的免疫增强剂，其中所述siRNA是SEQIDNO：3至14的核苷酸序列中的任一个。


8.用于预防或治疗癌症的药物组合物，其包含以下作为活性成分：
与LRIT2蛋白结合的物质；或
抑制LRIT2基因表达的物质。...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹京婉，许允景，全富男，孙珍英，金允渊，李洙鲁，郑朱然，郑阿姆，
申请(专利权)人：韩国亿诺生物有限公司，
类型：发明
国别省市：韩国;KR