阿莫西林完全抗原及其制备方法和试剂条及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种阿莫西林完全抗原及其制备方法和试剂条及其制备方法。该阿莫西林完全抗原中，其阿莫西林分子的抗原决定簇能充分暴露，且具有较完整的空间构象，因此，本发明专利技术提供的阿莫西林完全抗原具有较好的免疫原性,可用于免疫分析。本发明专利技术的检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条及其制备方法，该试剂条具有较高的阿莫西林检测灵敏度，且检测所需时间短，该检测试剂条使用简单、经济、便捷。

【技术实现步骤摘要】
阿莫西林完全抗原及其制备方法和试剂条及其制备方法
本专利技术涉及生物医药材料领域，具体涉及一种阿莫西林完全抗原及其制备方法，以及检测阿莫西林的试剂条及其制备方法。
技术介绍
免疫分析是以抗原与抗体之间特异性识别和可逆性结合反应为基础的痕量分析方法，其不仅适用于大分子化合物(如蛋白质、核酸、细菌)的检测，也适用于小分子化合物(如激素、药物)的测定。建立小分子化合物的免疫分析方法的关键是能够制备出对小分子化合物具有高亲和力和高选择性的抗体。由于大多数小分子化合物的分子量小于1000，不具有免疫原性，即缺乏T细胞表位而无法直接诱导动物机体等产生特异性抗体。然而，小分子化合物可以通过适当的化学修饰方法，与大分子载体结合，生成小分子化合物-大分子载体的偶联物，此偶联物即为完全抗原，它可以借助T细胞表位来间接诱导B细胞的增殖及分化，产生特异性抗体。阿莫西林(Melatonin,MLT)是一种小分子物质，化学名为N-乙酰-5-甲氧基色胺，分子量仅为232.28D，不具有免疫原性，用于免疫，必须先与蛋白质大分子载体结合，形成阿莫西林-蛋白质载体偶联的完全抗原后才具免疫原性。然而，制备阿莫西林-蛋白质载体偶联的完全抗原不能影响阿莫西林的空间构象，而且需要保持阿莫西林抗原决定簇(如5-甲氧基、N-烷基侧链)的有效性，才能获得效价高、特异性强的阿莫西林抗体。因此，如何制备具有良好免疫原性的完全抗原是建立测定阿莫西林的免疫分析方法的难点。
技术实现思路
本专利技术提供了一种阿莫西林完全抗原及其制备方法和试剂条及其制备方法，旨在解决上述问题。根据本申请实施例的第一方面，提供了一种阿莫西林完全抗原，其结构式为：式中，R为载体蛋白，n为5～20的自然数。根据本申请实施例的第二方面，提供了一种阿莫西林完全抗原的制备方法，包括以下步骤：提供阿莫西林，其结构式为：将阿莫西林溶解在N,N-二甲基甲酰胺溶液中，然后加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺，得到第一反应液，放入磁力搅拌子，密封烧杯，外层采用锡箔纸包裹避光，在室温下搅拌反应10～16小时后，得到第二反应液，其中，在所述第一反应液中，所述阿莫西林半抗原的浓度为0.05mol/L，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的摩尔浓度分别为所述阿莫西林半抗原摩尔浓度的1～2倍；配置载体蛋白的磷酸盐缓冲液；将所述第二反应液逐滴加入到所述载体蛋白的磷酸盐缓冲液中，在0～4℃下避光搅拌反应10～16小时后，得到含阿莫西林完全抗原的混合溶液，将所述含阿莫西林完全抗原的混合溶液进行透析后离心，得到含阿莫西林完全抗原的上清溶液，所述阿莫西林完全抗原的结构式为式中，R为载体蛋白，n为5～20的自然数。根据本申请实施例的第三方面，提供了一种检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条，包括背板、样品垫、金标垫、反应垫和吸水垫，其中所述样品垫、金标垫、反应垫和吸水垫依次设置于所述背板上；所述反应垫上具有检测线和质控线，检测线包被有阿莫西林完全抗原，所述质控线包被有羊抗鼠IgG的抗体，所述金标垫上喷有阿莫西林抗体金标复合物。根据本申请实施例的第四方面，提供了一种检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条的制备方法，包括以下步骤：阿莫西林抗体的制备、胶体金的制备、金标垫的制备；检测线和质控线的设置；试剂条的组装。本申请实施例提供的技术方案可以包括以下有益效果：本专利技术提供的阿莫西林完全抗原包括阿莫西林分子和载体蛋白，阿莫西林分子和载体蛋白通过连接臂进行连接，在阿莫西林完全抗原中，其阿莫西林分子的抗原决定簇能充分暴露，且具有较完整的空间构象，因此，本专利技术提供的阿莫西林完全抗原具有较好的免疫原性。本专利技术提供的检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条能用于对阿莫西林进行的免疫检测，大大提高了其检测灵敏度，通过该胶体金试剂条可快速筛选出阿莫西林所有阳性样本，能检出大于2-4ug/kg的样本。本专利技术提供的检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条检测时间短；不需要任何特殊仪器；操作简便，操作人员无需培训，检测成本低；总之，该检测试剂条使用简单、经济、便捷。本专利技术提供的检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条的制备方法简单易行，采用的试纸为常规试纸，采用的抗体可以按照本专利技术提供的方法进行制备，可以进行大规模生产，且生产成本低。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1是本专利技术实施例制得检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条的结构示意图。标号说明:10、背板；20、样品垫；30、金标垫；40、反应垫；41、检测线；42、质控线；50、吸水垫。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。还应当理解，在此本专利技术说明书中所使用的术语仅仅是出于描述特定实施例的目的而并不意在限制本专利技术。如在本专利技术说明书和所附权利要求书中所使用的那样，除非上下文清楚地指明其它情况，否则单数形式的“一”、“一个”及“该”意在包括复数形式。还应当进一步理解，在本专利技术说明书和所附权利要求书中使用的术语“和/或”是指相关联列出的项中的一个或多个的任何组合以及所有可能组合，并且包括这些组合。下述实施例中试剂和生物材料如无特殊说明，均可从商业渠道获得。本专利技术公开了一种阿莫西林完全抗原的制备方法，包括步骤S101-103。S101、提供阿莫西林，其结构式为：S102、将阿莫西林溶解在N,N-二甲基甲酰胺溶液中，然后加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺，得到第一反应液，放入磁力搅拌子，密封烧杯，外层采用锡箔纸包裹避光，在室温下搅拌反应10～16小时后，得到第二反应液，其中，在所述第一反应液中，所述阿莫西林半抗原的浓度为0.05mol/L，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的摩尔浓度分别为所述阿莫西林半抗原摩尔浓度的1～2倍。S103、c、配置载体蛋白的磷酸盐缓冲液，其中，所述载体蛋白的摩尔浓度为1Ⅹ10-3mol/L，所述磷酸盐的摩尔浓度为0.01mol/L。S104、将步骤(b)所得的第二反应液逐滴加入到步骤(c)配置的所述载体蛋白的磷酸盐缓冲液中，在0～4℃下避光搅拌反应10～16小时后，得到含阿莫西林完全抗原的混合溶液，将所述含阿莫西林完全抗原的混合溶液进行透析后离心，得到本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种阿莫西林完全抗原，其特征在于，其结构式为：/n

【技术特征摘要】
1.一种阿莫西林完全抗原，其特征在于，其结构式为：



式中，R为载体蛋白，n为5～20的然数。


2.根据权利要求1所述的阿莫西林完全抗原，其特征在于，所述载体蛋白为球蛋白、牛血清白蛋白、鸡卵清蛋白、钥孔血蓝蛋白、兔血清白蛋白、人血清白蛋白、甲状腺球蛋白、纤维蛋白原、兔丙种球蛋白和鸡丙种球蛋白中的任一种。


3.一种阿莫西林完全抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
提供阿莫西林，其结构式为：



将阿莫西林溶解在N,N-二甲基甲酰胺溶液中，然后加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺，得到第一反应液，放入磁力搅拌子，密封烧杯，外层采用锡箔纸包裹避光，在室温下搅拌反应10～16小时后，得到第二反应液，其中，在所述第一反应液中，所述阿莫西林半抗原的浓度为0.05mol/L，所述1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的摩尔浓度分别为所述阿莫西林半抗原摩尔浓度的1～2倍；
配置载体蛋白的磷酸盐缓冲液；
将所述第二反应液逐滴加入到所述载体蛋白的磷酸盐缓冲液中，在0～4℃下避光搅拌反应10～16小时后，得到含阿莫西林完全抗原的混合溶液，将所述含阿莫西林完全抗原的混合溶液进行透析后离心，得到含阿莫西林完全抗原的上清溶液，所述阿莫西林完全抗原的结构式为



式中，R为载体蛋白，n为5～20的自然数。


4.一种检测阿莫西林的胶体金免疫层析试剂条，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟涛，蒋永青，黄斌，刘明如，
申请(专利权)人：深圳市金阅科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：广东;44