一种胚胎移植液制造技术

本发明专利技术属于辅助生殖技术领域，涉及一种胚胎移植液。所述胚胎移植液由以下成分及其含量组成：乙酰水杨酸10‑100mg/L、肝素5～15U/mL、聚乙烯吡咯烷酮0.2‑0.7mg/mL、芳香化酶抑制剂0.1～1.0mg/L、EGF 1.0‑10ng/mL、TNF‑α0.5～2.5ng/mL、IGF‑II 1.0～5.0ng/mL、IL‑1β100～500pg/mL、盐酸吡哆醛0.01～2.0mg/L、核黄素0.01～0.14mg/L、抗坏血酸0.01～50mg/L，基础培养液1L。本发明专利技术通过改善子宫内环境，可显著提高胚胎种植率、妊娠率和出生率。

【技术实现步骤摘要】
一种胚胎移植液
本专利技术属于辅助生殖
，涉及一种胚胎移植液。
技术介绍
人类辅助生殖技术(ART)是指运用医学技术和方法对配子、合子、胚胎进行人工操作,以达到受孕目的的技术。主要包括体外受精-胚胎移植技术(IVF-ET)及其各种衍生技术。体外受精-胚胎移植是指将精子和卵子在体外条件下受精形成胚胎，再挑选优质胚胎移植入子宫腔内着床发育成胎儿。胚胎的发育潜能和良好的子宫内膜环境是胚胎顺利着床的两个关键因素。在挑选优质胚胎进行移植时，子宫内膜环境就成了决定胚胎移植成功的最重要的因素。子宫内膜容受性是指子宫内膜处于一种允许胚胎黏附直至完成胚胎着床的状态。影响子宫内膜容受性的因素有很多，包括子宫内膜厚度，子宫内膜下血流，生长因子调控和激素水平等。胚胎移植液主要用于体外生殖技术中胚胎移植的培养。现有的培养移植液主要作用是胚胎移植进入子宫时，通过移植液的黏性增加胚胎在子宫中物理黏附作用，达到降低流产率的作用，但其并不能改善子宫内膜的环境。这也是目前体外受精-胚胎移植在临床妊娠率较低(30％-40％)的主要原因。目前，胚胎移植液并无国产，全部依靠昂贵的进口产品。进口的胚胎移植液需长途运输，而运输过程中的不确定因素(如：温度、光照、环境)也可能对产品质量造成严重影响，如果使用质量较差的胚胎移植液，将对实验和临床造成不可逆转的结果。因此，我们亟需一种能够改善子宫内膜环境，提高种植率、妊娠率和出生率的胚胎移植液。
技术实现思路
本专利技术主要目的是提供一种胚胎移植液。本专利技术胚胎移植液不仅能够模拟子宫内组织液环境(如：pH，渗透压)，使胚胎移植后更快适应子宫内环境；而且还可促进子宫内膜下血流增多，改善子宫内膜异位、增强子宫内膜容受性，增强胚胎在子宫表面的附着，从而达到提高种植率、妊娠率和出生率的效果。本专利技术采用以下技术方案：首先，本专利技术提供一种组合物，所述组合物包括以下成分及其含量：乙酰水杨酸1-200mg/L、肝素1～30U/mL、聚乙烯吡咯烷酮0.01-5mg/mL、芳香化酶抑制剂0.1～10mg/L、生长因子0.1-50ng/mL、辅因子0.01～10.0mg/L、核黄素0.01～5mg/L、抗坏血酸0.01～50mg/L。优选地，所述芳香化酶抑制剂为4,4'-(1H-1,2,4-三唑-1-基亚甲基)-双苯腈。优选地，所述生长因子包括TNF-α，EGF，IGF-II，IL-1β。优选地，所述辅因子为盐酸吡哆醛。优选地，所述组合物由以下成分及其含量组成：乙酰水杨酸10-100mg/L、肝素5～15U/mL、聚乙烯吡咯烷酮0.2-0.7mg/mL、4,4'-(1H-1,2,4-三唑-1-基亚甲基)-双苯腈0.1～1.0mg/L、EGF1.0-10ng/mL、TNF-α0.5～2.5ng/mL、IGF-II1.0～5.0ng/mL、IL-1β100～500pg/mL、盐酸吡哆醛0.01～2.0mg/L、核黄素0.01～0.14mg/L、抗坏血酸0.01～30mg/L。所述乙酰水杨酸和肝素，有血管舒张功能和抗凝剂的性质。其主要通过抑制环氧合酶而抑制血小板活性，预防微血栓形成。乙酰水杨酸与肝素共同作用可降低子宫动脉血流阻力，改善局部血循环和子宫内膜的血流灌注，内膜下血流增多有利于胚胎着床和妊娠。所述聚乙烯吡咯烷酮(PVP)一种水溶性非离子型高分子化合物，具有水溶性高分子化合物的一般性质，胶体保护作用、成膜性、粘结性、吸湿性、增溶或凝聚作用。PVP有优良的生理惰性，不参与人体新陈代谢，又具有优良的生物相容性。加入聚乙烯吡咯烷酮后，胚胎移植液具有较大的黏度，增强胚胎种植时对子宫内膜的黏附作用。所述4,4'-(1H-1,2,4-三唑-1-基亚甲基)-双苯腈作为一种芳香化酶抑制剂，可调节机体激素水平，改善子宫内膜异位，提高子宫内膜容受性，增加胚胎着床率。所述TNF-α，EGF，IGF-II，IL-1β作为多种生长因子，TNF-α是一种多功能细胞因子，可促进卵泡成熟发育，提高胚胎发育成熟度；IL-1β可由移植的胚胎分泌，是一种免疫应答因子，适量的IL-1β可降低子宫对移植的胚胎的排异反应，增加子宫对胚胎的容受作用；EGF(表皮生长因子)在子宫内膜、蜕膜、着床前胚胎、滋养层细胞等生殖组织中都有存在，胚胎移植液中添加适量的EGF，可刺激囊胚滋养层细胞的外延生长，增加与子宫内膜的粘附，对胚胎发育、植入过程、妊娠维持、胎盘激素合成分泌等生理过程都起到了很重要的调节作用；IGF-II对细胞的分化、增殖、个体的生长发育中具有重要的促进作用。所述盐酸吡哆醛是氨基酸代谢中的转氨酶及脱羧酶的辅酶，促进转氨酶进行转氨作用提高体内多巴胺的含量，调节受试者情绪，稳定机体生理激素水平。所述核黄素是一种水溶性维生素，机体无法自身合成，需外源供给，其主要作用是参与细胞生长，促进子宫内膜生长。所述抗坏血酸作为一种抗氧化剂，不仅能够还原胞内的活性氧(ROS)成分以降低其对细胞的伤害，还能够通过降低纺锤体的异常率以及DNA的损伤率以达到提高优质胚胎率的效果。本专利技术所述组合物中，乙酰水杨酸、肝素等成分可降低子宫动脉血流阻力，改善局部血循环和子宫内膜的血流灌注，内膜下血流增多有利于胚胎着床和妊娠；所述聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、EGF可通过物理和化学作用增强胚胎在子宫表面的附着；所述TNF-α、IGF-II、核黄素具有促进子宫内膜生长的作用；所述4,4'-(1H-1,2,4-三唑-1-基亚甲基)-双苯腈和IL-1β具有增强子宫容受作用。本专利技术所述组合物各成分相互作用改善子宫内环境显著，可将其用于制备胚胎移植液。本专利技术提供的胚胎移植液包含以上所述组合物的胚胎移植液。优选地，所述胚胎移植液由以下成分及其含量组成：乙酰水杨酸10-100mg/L、肝素5～15U/mL、聚乙烯吡咯烷酮0.2-0.7mg/mL、4,4'-(1H-1,2,4-三唑-1-基亚甲基)-双苯腈0.1～1.0mg/L、EGF1.0-10ng/mL、TNF-α0.5～2.5ng/mL、IGF-II1.0～5.0ng/mL、IL-1β100～500pg/mL、盐酸吡哆醛0.01～2.0mg/L、核黄素0.01～0.14mg/L、抗坏血酸0.01～30mg/L，基础培养液1L；所述基础培养液包括无机盐，氨基酸，HEPES，葡萄糖，丙酮酸钠，乳酸钠，人血白蛋白，抗生素。进一步优选地，所述基础培养液由以下成分及含量组成：氯化钠88.1～121.2mmol/L，氯化钾0.716～2.721mmol/L，磷酸二氢钾0.09～1.19mmol/L，碳酸氢钠1～4mmol/L，氯化钙0.115～0.171mmol/L，泛酸钙0.10～0.23mmol/L，氯化镁0.031～0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物，其特征在于，其包括以下成分及其含量：乙酰水杨酸1-200mg/L、肝素1～30U/mL、聚乙烯吡咯烷酮0.01-5mg/mL、芳香化酶抑制剂0.1～10mg/L、生长因子0.1-50ng/mL、辅因子0.01～10.0mg/L、核黄素0.01～5mg/L、抗坏血酸0.01～50mg/L。/n

【技术特征摘要】
1.一种组合物，其特征在于，其包括以下成分及其含量：乙酰水杨酸1-200mg/L、肝素1～30U/mL、聚乙烯吡咯烷酮0.01-5mg/mL、芳香化酶抑制剂0.1～10mg/L、生长因子0.1-50ng/mL、辅因子0.01～10.0mg/L、核黄素0.01～5mg/L、抗坏血酸0.01～50mg/L。


2.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，所述芳香化酶抑制剂为4,4'-(1H-1,2,4-三唑-1-基亚甲基)-双苯腈。


3.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，所述生长因子包括TNF-α，EGF，IGF-II，IL-1β。


4.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，所述辅因子为盐酸吡哆醛。


5.根据权利要求1所述组合物，其特征在于，其由以下成分及其含量组成：乙酰水杨酸10-100mg/L、肝素5～15U/mL、聚乙烯吡咯烷酮0.2-0.7mg/mL、4,4'-(1H-1,2,4-三唑-1-基亚甲基)-双苯腈0.1～1.0mg/L、EGF1.0-10ng/mL、TNF-α0.5～2.5ng/mL、IGF-II1.0～5.0ng/mL、IL-1β100～500pg/mL、盐酸吡哆醛0.01～2.0mg/L、核黄素0.01～0.14mg/L、抗坏血酸0.01～50mg/L。


6.一种包含权利要求1-5任一项所述组合物的胚胎移植液。


7.根据权利要求6所述胚胎移植液，其特征在于，所述胚胎移植液由以下成分及其含量组成：
乙酰水杨酸10-100mg/L、肝素5～15U/mL、聚乙烯吡咯烷酮0.2-0.7mg/mL、4,4'-(1H-1,2,4-三唑-1-基亚甲基)-双苯腈0.1～...

【专利技术属性】
技术研发人员：余裕炉，米乐，刘洪君，严飞，戴甄，
申请(专利权)人：成都艾伟孚生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51