【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】区分细菌感染和病毒感染的多重横向流测定物相关申请的交叉引用本申请要求2018年1月27日提交的美国临时申请62/622,878的权益，其通过引用以其全部并入。
本公开一般地涉及横向流测定装置、测试系统和方法。更具体地，本公开涉及确定样品中多种分析物的存在和浓度的横向流测定装置，包括当一种或多种目标分析物以高浓度存在和一种或多种目标分析物以低浓度存在时。当在单次施加中将单个样品施加于单个横向流测定物时，可以确定多种分析物中每种的精确浓度，包括当第一目标分析物在单个样品中以单个样品中第二目标分析物的浓度的百万分之一存在时。
技术介绍
包括本文描述的横向流测定物的免疫测定系统提供了可靠、廉价、便携、快速和简单的诊断测试。横向流测定物可以快速且准确地检测样品中目标分析物的存在与否，在某些情况下还可以定量样品中的目标分析物。有利地，横向流测定物可以是微创的，并且可以用作床旁测试系统(point-of-caretestingsystems)。已经开发了横向流测定物来检测多种医学或环境分析物。在夹心形式的横向流测定物中，针对目标分析物的标记的抗体被沉积在样品接收区中或附近的测试条上。标记的抗体可以包括例如与抗体结合的检测器分子或“标记”。当将样品施加到测试条上时，样品中存在的分析物被标记的抗体结合，该标记的抗体沿着测试条流到捕获区，在捕获区，针对分析物的固定抗体与标记的抗体-分析物复合物结合。固定在捕获线上的抗体可能与沉积在样品接收区中或附近的标记的抗体不同。检测捕获的复合物，并确定分析物的存在。在分析物不存在的情...
【技术保护点】
1.检测样品中以不同浓度存在的第一目标分析物和第二目标分析物的方法，所述方法包括：提供横向流测定物，其包括：/n第一复合物，其连接至所述横向流测定物的流动路径，所述第一复合物包括标记物、特异性结合所述第一分析物的抗体或其片段，和所述第一分析物，/n标记的第二抗体或其片段，其连接至所述流动路径并配置为特异性结合所述第二分析物，/n所述第一复合物下游的第一捕获区，所述第一捕获区包括对所述第一分析物具有特异性的第一固定化捕获剂，和/n位于所述标记的第二抗体或其片段下游并包括对所述第二分析物具有特异性的第二固定化捕获剂的第二捕获区；/n将所述样品施加至所述第一复合物和所述标记的第二抗体或其片段；/n使所述第二分析物与所述标记的第二抗体或其片段结合以形成第二复合物；/n使所述流体样品和所述第一复合物流动至所述第一捕获区，其中所述流体样品中的所述第一分析物和所述第一复合物竞争结合所述第一捕获区中的所述第一固定化捕获剂；/n使所述流动路径中的所述第二复合物流动至所述第二捕获区并将所述第二复合物与所述第二捕获区中的所述第二固定化捕获剂结合；和/n检测来自所述第一捕获区中结合至所述第一固定化捕获剂的所述...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180127 US 62/622,8781.检测样品中以不同浓度存在的第一目标分析物和第二目标分析物的方法，所述方法包括：提供横向流测定物，其包括：
第一复合物，其连接至所述横向流测定物的流动路径，所述第一复合物包括标记物、特异性结合所述第一分析物的抗体或其片段，和所述第一分析物，
标记的第二抗体或其片段，其连接至所述流动路径并配置为特异性结合所述第二分析物，
所述第一复合物下游的第一捕获区，所述第一捕获区包括对所述第一分析物具有特异性的第一固定化捕获剂，和
位于所述标记的第二抗体或其片段下游并包括对所述第二分析物具有特异性的第二固定化捕获剂的第二捕获区；
将所述样品施加至所述第一复合物和所述标记的第二抗体或其片段；
使所述第二分析物与所述标记的第二抗体或其片段结合以形成第二复合物；
使所述流体样品和所述第一复合物流动至所述第一捕获区，其中所述流体样品中的所述第一分析物和所述第一复合物竞争结合所述第一捕获区中的所述第一固定化捕获剂；
使所述流动路径中的所述第二复合物流动至所述第二捕获区并将所述第二复合物与所述第二捕获区中的所述第二固定化捕获剂结合；和
检测来自所述第一捕获区中结合至所述第一固定化捕获剂的所述第一复合物的第一信号和来自所述第二捕获区中结合至所述第二固定化捕获剂的所述第二复合物的第二信号。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一目标分析物在所述样品中以大于所述样品中存在的所述第二目标分析物的浓度约六个数量级的浓度存在。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一目标分析物在所述样品中以1和999μl/ml之间的浓度存在，和所述第二目标分析物在所述样品中以1和999pg/ml之间的浓度存在。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一目标分析物在所述样品中以大于所述样品中存在的所述第二目标分析物的浓度至少一个数量级的浓度存在，所述数量级包括一个数量级、两个数量级、三个数量级、四个数量级、五个数量级、六个数量级、七个数量级、八个数量级、九个数量级或十个数量级。
5.根据权利要求1所述的方法，进一步包括使所述第一信号与所述样品中存在的所述第一目标分析物的浓度相关联，和使所述第二信号与所述样品中存在的第二目标分析物的浓度相关联。
6.根据权利要求1所述的方法，其中由结合所述第一捕获区中的所述第一固定化捕获剂的所述第一复合物检测的所述第一信号随着所述样品中所述第一分析物的浓度降低而降低，和其中由结合所述第二捕获区中的所述第二固定化捕获剂的所述第二复合物检测的所述第二信号随着所述样品中所述第二目标分析物的浓度增加而增加。
7.根据权利要求1所述的方法，进一步包括检测所述样品中第三目标分析物，其中所述横向流测定物包括：
标记的第三抗体或其片段，其连接至所述流动路径并配置为特异性结合所述第三分析物；和
位于所述标记的第三抗体或其片段下游并包括对所述第三分析物具有特异性的第三固定化捕获剂的第三捕获区。
8.根据权利要求7所述的方法，进一步包括：
将所述样品施加至所述标记的第三抗体或其片段；
使所述第三分析物与所述标记的第三抗体或其片段结合以形成第三复合物；
使所述流动路径中的所述第三复合物流动至所述第三捕获区并将所述第三复合物与所述第三捕获区中的所述第三固定化捕获剂结合；和
检测来自所述第三捕获区中结合至所述第三固定化捕获剂的所述第三复合物的第三信号。
9.根据权利要求8所述的方法，进一步包括分别使所述第一信号、所述第二信号、和所述第三信号与所述样品中所述第一分析物的浓度、所述第二分析物的浓度、和所述第三分析物的浓度相关联。
10.根据权利要求9所述的方法，进一步包括基于所述第一分析物、所述第二分析物和所述第三分析物的各自浓度，指示疾病症状、非疾病症状、或无症状。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述疾病症状是病毒感染或细菌感染，和其中所述非疾病症状是发炎。
12.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一目标分析物包括C-反应性蛋白(CRP)和所述第二目标分析物包括干扰素-诱导的GTP-结合蛋白(Mx1)。
13.根据权利要求7所述的方法，其中所述第三目标分析物包括降钙素原(PCT)。
14.根据权利要求1所述的方法，其中所述样品是全血样品、静脉血样品、毛细管血样品、血清样品、或血浆样品。
15.根据权利要求1所述的方法，其中在将所述样品施加至所述横向流测定物之前不稀释所述样品。
16.配置为检测流体样品中以不同浓度存在的第一目标分析物和第二目标分析物的横向流测定物，所述横向流测定物包括：
第一复合物，其连接至所述横向流测定物的流动路径，所述第一复合物包括标记物、特异性结合所述第一分析物的抗体或其片段，和所述第一分析物；
标记的第二抗体或其片段，其连接至所述流动路径并配置为特异性结合所述第二分析物；
所述第一复合物下游的第一捕获区，所述第一捕获区包括对所述第一分析物具有特异性的第一固定化捕获剂；和
位于所述标记的第二抗体或其片段下游并包括对所述第二分析物具有特异性的第二固定化捕获剂的第二捕获区。
17.根据权利要求16所述的横向流测定物，其中当将所述流体样品施加至所述第一复合物和所述标记的第二抗体或其片段时，所述第一复合物和所述标记的第二抗体或其片段从所述横向流测定物的所述流动路径脱离。
18.根据权利要求17所述的横向流测定物，其中当将所述流体样品施加至所述第一复合物和所述标记的第二抗体或其片段时，所述标记的第二抗体或其片段结合所述第二分析物以形成第二复合物。
19.根据权利要求18所述的横向流测定物，其中，施加所述流体样品后，所述第一捕获区中的所述第一固定化捕获剂竞争性结合所述流体样品中已经流动至所述第一捕获区的所述第一复合物和所述第一分析物。
20.根据权利要求19所述的横向流测定物，其中，施加所述流体样品后，所述第二捕获区中的所述第二固定化捕获剂结合所述流体样品中已经流动至所述第二捕获区的所述第二复合物。
21.根据权利要求20所述的横向流测定物，其中第一信号发射自结合所述第一捕获区中的所述第一固定化捕获剂的所述第一复合物和第二信号发射自结合所述第二捕获区中的所述第二固定化捕获剂的所述第二复合物。
22.根据权利要求21所述的横向流测定物，其中由结合所述第一捕获区中的所述第一固定化捕获剂的所述第一复合物发射的所述第一信号随着所述流体样品中所述第一分析物的浓度降低而降低，和其中由结合所述第二捕获区中的所述第二固定化捕获剂的所述第二复合物发射的所述第二信号随着所述流体样品中所述第二目标分析物的浓度增加而增加。
23.根据权利要求16所述的横向流测定物，其中所述第一目标分析物在所述样品中以大于所述样品中存在的所述第二目标分析物的浓度约六个数量级的浓度存在。
24.根据权利要求16所述的横向流测定物，其中所述第一目标分析物在所述样品中以1和999μl/ml之间的浓度存在，和所述第二目标分析物在所述样品中以1和999pg/ml之间的浓度存在。
25.根据权利要求16所述的横向流测定物，其中所述第一目标分析物在所述样品中以大于所述样品中存在的所述第二目标分析物的浓度至少一个数量级的浓度存在，所述数量级包括一个数量级、两个数量级、三个数量级、四个数量级、五个数量级、六个数量级、七个数量级、八个数量级、九个数量级或十个数量级。
26.根据权利要求16所述的横向流测定物，其中所述第一目标分析物包括C-反应性蛋白(CRP)和所述第二目标分析物包括干扰素-诱导的GTP-结合蛋白(Mx1)。
27.根据权利要求16所述的横向流测定物，其中所述流体样品是全血样品、静脉血样品、毛细管血样品、血清样品、或血浆样品。
28.根据权利要求16所述的横向流测定物，其中在将所述样品施加至所述横向流测定物之前不稀释所述样品。
29.测定测试条，其包括：
流动路径，其配置为接收流体样品；
样品接收区，其连接至所述流动路径；
检测区，其在所述样品接收区的下游连接至所述流动路径，所述检测区包括第一捕获区、第二捕获区、和第三捕获区，所述第一捕获区包括对第一目标分析物具有特异性的第一固定化捕获剂、所述第二捕获区包括对第二目标分析物具有特异性的第二固定化捕获剂、和所述第三捕获区包括对第三目标分析物具有特异性的第三固定化捕获剂；
第一复合物，其在第一阶段中连接至所述流动路径并且配置为在第二阶段中在所述流体样品存在的情况下在流动路径中流动至所述检测区，所述第一复合物包括标记物、特异性结合所述第一目标分析物的第一抗体或其片段，以及所述第一目标分析物；
特异性结合所述第二目标分析物的标记的第二抗体或其片段，所述标记的第二抗体或其片段在所述第一阶段中连接至所述流动路径并配置为在所述第二阶段中在所述流体样品存在的情况下在所述流动路径中流动至所述检测区；和
特异性结合所述第三目标分析物的标记的第三抗体或其片段，所述标记的第三抗体或其片段在所述第一阶段中连接至所述流动路径并配置为在所述第二阶段中在所述流体样品存在的情况下在所述流动路径中流动至所述检测区。
30.根据权利要求29所述的测定测试条，其中所述流动路径配置为接收包括未标记的第一目标分析物的流体样品，和其中所述第一固定化捕获剂配置为竞争性结合所述流体样品中的所述第一复合物和所述未标记的第一目标分析物。
31.根据权利要求3...
【专利技术属性】
技术研发人员：任汇淼，杨健，G·刘，
申请(专利权)人：贝克顿·迪金森公司，
类型：发明
国别省市：美国;US
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