治疗肌萎缩和强直性肌营养不良的组合物和方法技术

本申请公开了一种多核酸分子缀合物，其包含与多核酸分子缀合的抗体或其结合片段，所述多核酸分子与atrogene的靶序列杂交；其中所述多核酸分子包含至少一个2’修饰的核苷酸、至少一个修饰的核苷酸间连接或至少一个反向脱碱基部分；并且其中所述多核酸分子缀合物介导针对所述atrogene的RNA干扰，从而治疗受试者的肌萎缩或强直性肌营养不良。在某些实施方案中，atrogene包括atrogin‑1基因(FBXO32)、MuRF1基因(TRIM63)、FOXO1、FOXO3或MSTN。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗肌萎缩和强直性肌营养不良的组合物和方法交叉引用本申请要求2017年12月6日提交的第62/595,545号美国临时申请和2018年8月31日提交的第62/725,883号美国临时申请的权益，所述临时申请中的每一个均通过引用整体并入本文。序列表本申请含有序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交，并且通过引用整体并入本文。创建于2018年12月6日的所述ASCII副本被命名为45532-722_601_SL.txt，大小为3,143,382个字节。
技术介绍
通过RNA诱导的基因沉默进行的基因抑制提供了几种控制水平：转录失活、小干扰RNA(siRNA)诱导的mRNA降解和siRNA诱导的转录弱化。在一些情况下，RNA干扰(RNAi)对多细胞分裂提供持久的影响。因此，RNAi代表了可用于药物靶标验证、基因功能分析、途径分析和疾病治疗的可行方法。
技术实现思路
在某些实施方案中，本文公开了用于调节与肌萎缩相关的基因(或atrogene)的多核酸分子和药物组合物。在一些实施方案中，本文还描述了用本文公开的多核酸分子或多核酸分子缀合物治疗肌萎缩的方法。在某些实施方案中，本文公开了式(I)的分子：A-X1-B-X2-C(式I)其中，A为结合部分；B为与atrogene的靶序列杂交的多核苷酸；C为聚合物；且X1和X2各自独立地选自键或非聚合连接体；其中所述多核苷酸包含至少一个2’修饰的核苷酸、至少一个修饰的核苷酸间连接或至少一个反向脱碱基部分；并且其中A和C不连接至B的同一末端。在一些实施方案中，所述atrogene包括IGF1-Akt-FoxO途径、糖皮质激素-GR途径、PGC1α-FoxO途径、途径或肌肉生长抑制素-ActRIIb-Smad2/3途径内差异调节的(例如，上调或下调的)基因。在一些实施方案中，所述atrogene编码E3连接酶。在一些实施方案中，所述atrogene编码叉头框转录因子。在一些实施方案中，所述atrogene包括atrogin-1基因(FBXO32)、MuRF1基因(TRIM63)、FOXO1、FOXO3或MSTN。在一些实施方案中，所述atrogen包括DMPK。在一些实施方案中，B由与atrogene的靶序列杂交的多核苷酸组成。在一些实施方案中，C由聚合物组成。在一些实施方案中，所述至少一个2’修饰的核苷酸包含2’-O-甲基、2’-O-甲氧基乙基(2’-O-MOE)、2’-O-氨基丙基、2’-脱氧、T-脱氧-2’-氟代、2’-O-氨基丙基(2’-O-AP)、2’-O-二甲基氨基乙基(2’-O-DMAOE)、2'-O-二甲基氨基丙基(2’-O-DMAP)、T-O-二甲基氨基乙氧基乙基(2’-O-DMAEOE)或2’-O-N-甲基乙酰胺基(2’-O-NMA)修饰的核苷酸。在一些实施方案中，所述至少一个2’修饰的核苷酸包括锁定核酸(LNA)或乙烯核酸(ENA)。在一些实施方案中，所述至少一个修饰的核苷酸间连接包括硫代磷酸酯连接或二硫代磷酸酯连接。在一些实施方案中，所述至少一个反向脱碱基部分在至少一个末端。在一些实施方案中，所述多核苷酸包含与atrogene的靶序列杂交的单链。在一些实施方案中，所述多核苷酸包含第一多核苷酸和与第一多核苷酸杂交的第二多核苷酸，以形成双链多核酸分子，其中第一多核苷酸或第二多核苷酸还与atrogene的靶序列杂交。在一些实施方案中，第二多核苷酸包含至少一个修饰。在一些实施方案中，第一多核苷酸和第二多核苷酸是RNA分子。在一些实施方案中，所述多核苷酸与atrogene的靶序列的至少8个连续碱基杂交。在一些实施方案中，所述多核苷酸包含与SEQIDNO:28-141、370-480和703-3406所示的序列至少60％、70％、80％、85％、90％、95％或99％互补的序列。在一些实施方案中，所述多核苷酸的长度为约8个至约50个核苷酸。在一些实施方案中，所述多核苷酸的长度为约10个至约30个核苷酸。在一些实施方案中，第一多核苷酸包含与SEQIDNO:142-255、256-369、481-591、592-702和3407-14222所示的序列具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的序列。在一些实施方案中，第二多核苷酸包含与SEQIDNO:142-255、256-369、481-591、592-702和3407-14222所示的序列具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的序列。在一些实施方案中，X1和X2独立地为C1-C6烷基。在一些实施方案中，X1和X2独立地为同双官能连接体或异双官能连接体，任选地缀合至C1-C6烷基。在一些实施方案中，A为抗体或其结合片段。在一些实施方案中，A包括人源化抗体或其结合片段、嵌合抗体或其结合片段、单克隆抗体或其结合片段、单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或者骆驼科抗体或其结合片段。在一些实施方案中，A为抗运铁蛋白受体抗体或其结合片段。在一些实施方案中，C为聚乙二醇。在一些实施方案中，A-X1缀合至B的5’端，且X2-C缀合至B的3’端。在一些实施方案中，X2-C缀合至B的5’端，且A-X1缀合至B的3’端。在一些实施方案中，A直接缀合至X1。在一些实施方案中，C直接缀合至X2。在一些实施方案中，B直接缀合至X1和X2。在一些实施方案中，该分子进一步包含D。在一些实施方案中，D缀合至C或缀合至A。在一些实施方案中，D为内体溶解聚合物。在某些实施方案中，本文公开了一种多核酸分子缀合物，其包含与多核苷酸缀合的结合部分，所述多核苷酸与atrogene的靶序列杂交；其中所述多核苷酸任选地包含至少一个2’修饰的核苷酸、至少一个修饰的核苷酸间连接或至少一个反向脱碱基部分；并且其中所述多核酸分子缀合物介导针对所述atrogene的RNA干扰，从而治疗受试者的肌萎缩。在一些实施方案中，所述atrogene包括IGF1-Akt-FoxO途径、糖皮质激素-GR途径、PGC1α-FoxO途径、途径或肌肉生长抑制素-ActRIIb-Smad2/3途径内差异调节的(例如，上调或下调的)基因。在一些实施方案中，所述atrogene编码E3连接酶。在一些实施方案中，所述atrogene编码叉头框转录因子。在一些实施方案中，所述atrogene包含TGF-beta(转化生长因子-beta)蛋白质超家族的配体。在一些实施方案中，所述atrogene包括DMPK。在一些实施方案中，所述结合部分是抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述结合部分包括人源化抗体或其结合片段、嵌合抗体或其结合片段、单克隆抗体或其结合片段、单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或者骆驼科抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述结合部分是抗运铁蛋白受体抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述结合部分是胆固醇。在一些实施方案中，所述多核苷酸包含与atrogene的靶序本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多核酸分子缀合物，其包含与多核酸分子缀合的抗体或其结合片段，所述多核酸分子与atrogene的靶序列杂交；其中所述多核酸分子包含至少一个2’修饰的核苷酸、至少一个修饰的核苷酸间连接或至少一个反向脱碱基部分；并且其中所述多核酸分子缀合物介导针对所述atrogene的RNA干扰，从而治疗受试者的肌萎缩或强直性肌营养不良。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171206 US 62/595,545;20180831 US 62/725,8831.一种多核酸分子缀合物，其包含与多核酸分子缀合的抗体或其结合片段，所述多核酸分子与atrogene的靶序列杂交；其中所述多核酸分子包含至少一个2’修饰的核苷酸、至少一个修饰的核苷酸间连接或至少一个反向脱碱基部分；并且其中所述多核酸分子缀合物介导针对所述atrogene的RNA干扰，从而治疗受试者的肌萎缩或强直性肌营养不良。


2.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述atrogene包括IGF1-Akt-FoxO途径、糖皮质激素-GR途径、PGC1α-FoxO途径、TNFα-NFкB途径或肌肉生长抑制素-ActRIIb-Smad2/3途径内差异调节的基因。


3.根据权利要求2所述的多核酸分子缀合物，其中所述atrogene是IGF1-Akt-FoxO途径、糖皮质激素-GR途径、PGC1α-FoxO途径、TNFα-NFкB途径或肌肉生长抑制素-ActRIIb-Smad2/3途径内下调的基因。


4.根据权利要求2所述的多核酸分子缀合物，其中所述atrogene是IGF1-Akt-FoxO途径、糖皮质激素-GR途径、PGC1α-FoxO途径、TNFα-NFкB途径或肌肉生长抑制素-ActRIIb-Smad2/3途径内上调的基因。


5.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述atrogene编码E3连接酶。


6.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述atrogene编码叉头框转录因子。


7.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述atrogene包括atrogin-1基因(FBXO32)、MuRF1基因(TRIM63)、FOXO1、FOXO3或MSTN。


8.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述atrogen包括DMPK。


9.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗体或其结合片段包括人源化抗体或其结合片段、嵌合抗体或其结合片段、单克隆抗体或其结合片段、单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或者骆驼科抗体或其结合片段。


10.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗体或其结合片段是抗运铁蛋白受体抗体或其结合片段。


11.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述多核酸分子包含有义链和反义链，并且其中所述有义链和反义链各自独立地包含至少一个2’修饰的核苷酸、至少一个修饰的核苷酸间连接或至少一个反向脱碱基部分。


12.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述多核苷酸与atrogene的靶序列的至少8个连续碱基杂交。


13.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述靶序列与SEQIDNO:28-141、370-480或703-3406所示的序列具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的序列同一性。


14.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述多核苷酸的长度为约8个至约50个核苷酸，或长度为约10个至约30个核苷酸。


15.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链包含与SEQIDNO:142-255、481-591、3407-6110或8815-11518所示的序列具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的序列。


16.根据权利要求1所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链包含与SEQIDNO:256-369、592-702、6111-8814或11519-14222所示的序列具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的序列。


17.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：安德鲁·约翰·吉尔，文卡塔·拉马纳·多帕拉普迪，大卫·世豪·朱，迈克尔·卡拉米安·科克伦，迈克尔·胡德，比亚特丽丝·戴安娜·达里蒙特，罗伯·伯克，石云雨，古林·埃尔多安·莫雷柳斯，巴尔博拉·马勒科娃，
申请(专利权)人：艾维迪提生物科学公司，
类型：发明
国别省市：美国;US