一种老年便秘动物模型的构建及其用途制造技术

本发明专利技术属模型构建及验证技术领域，为解决现有的便秘模型不能较好模拟临床老年便秘的状态和便秘模型评价方法主观性强、片面性高、灵活性差的技术问题，提供一种老年便秘动物模型的构建及其用途。每日对模型组大鼠皮下注射D‑半乳糖，第7周开始，按首剂量5mL/只灌胃给予白醋，此后单双日交替灌喂白醋和活性炭冰水混合物；连续5周后得到老年便秘动物模型。皮下注射D‑半乳糖可诱导衰老，灌胃白醋和活性炭冰水混合物使胃肠动力发生变化，出现便秘症状，二者复合获得老年便秘动物模型。不仅体现了衰老和便秘两个特性，更能体现临床上老年便秘的特征，模拟临床老年人便秘症状，适应于治疗老年便秘的中药筛选，为发展相关的新药研发提供实验依据。

【技术实现步骤摘要】
一种老年便秘动物模型的构建及其用途
本专利技术属于模型的构建及验证
，具体涉及一种老年便秘动物模型的构建及其用途。
技术介绍
便秘（Constipation）是老年人常见的一种消化道疾病，既可单独出现，又是某些疾病的伴发症状，或成为其他疾病的诱因。随着年龄增长慢性便秘的患病率逐渐增高。据调查，60～64岁年龄段的老年人便秘发生率为8.7%，≥85岁的老年人便秘发生率高达19.5%。长期反复不愈的慢性便秘不仅使老年人精神压力过大，且与下消化道肿瘤、老年性精神障碍及结肠癌等疾病的发生密切相关。因此，老年便秘是一个具有巨大潜在危害性的疾病，值得临床及科研工作者的深入研究。构建与临床病证相符的病理模型是探讨疾病发病机制、揭示药物药效和研发新药的关键所在。现代研究多应用现代医学的理论方法复制便秘模型，模拟与人类近似的病因、发病机制等特征，用于临床和药物研究中。但是，应用现代医学的理论方法复制的便秘模型并不能较好的模拟老年便秘患者的临床特点。根据老年便秘的病因、病机理论，老年便秘通常可分为胃肠积热证、气机郁滞证、阴寒凝滞证、气血阴阳不足证。老年人便秘以虚性便秘为主，其中阳虚便秘是其他便秘的最终发展结果。因此，本专利技术在D-半乳糖诱导的衰老基础上，复合了阳虚便秘因素，构建了一种阳虚型老年便秘模型。除此之外，模型的评价也缺乏有效的方式，亟待改进与发展。目前便秘模型复制成功与否的判断主要根据行为学结果，如排便的时间长短，粪便形态的观察等，生化指标，如生长抑素、胃泌素、胃动素等以及病理组织学检查，如肠内粘膜、粘膜下层、肌层和外膜的损伤情况等进行评价。但是仍然存在一些不足：(1)主观性：粪便的形态直接观察指标有粪便的颜色，硬度，光泽等，这种评价方法存在很大的主观性和不确定性；(2)片面性：通过便秘相关调控因子评价模型存在一定的片面性，只能反映个别的生化功能，缺乏整体系统的评价标准；(3)灵活性差：多种评价指标，如小肠推进率、结肠组织病理等，需要处死实验动物获得实验样本，不利于动态观察疾病的发展变化。建立科学可靠的老年便秘动物模型是进行其机理研究的基础。为进一步深入探究老年便秘的本质、研发其有效治疗药物，很有必要进行老年便秘动物模型的研究。
技术实现思路
本专利技术为了解决现有的便秘模型不能较好模拟临床老年便秘的状态和便秘模型评价方法主观性强、片面性高、灵活性差的技术问题，本专利技术提供一种老年便秘动物模型的构建及其用途。所述老年便秘动物模型是在中医理论指导下的阳虚型老年便秘模型。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案为：一种老年便秘动物模型的构建，每日对模型组大鼠皮下注射300mg/kg的D-半乳糖，从第7周开始，按首剂量5mL/只灌胃给予大鼠白醋，此后单双日交替灌喂白醋和活性炭冰水混合物，白醋的剂量是3mL/200g，活性炭冰水混合物的剂量是5mL/200g；其中白醋的总酸度g/100g为6度，活性炭冰水混合物中含有16.67mmol/L活性炭，连续5周；造模周期共为11周；造模完成后，收集动物粪便进行核磁共振分析和多元统计分析，得到20生物标志物，具体为：Alanine、Asparagine、Aspartate、Betaine、Butyrate、Citrate、Creatinine、Glucose、Glutamate、Glutamine、Isobutyrate、Isoleucine、Lactate、Leucine、Methionine、Phenylalanine、Propionate、Pyruvate、Scyllo-Inositol、Threonine；结合20个生物标志物的含量统计学分析，若模型大鼠血清中：模型大鼠粪便中Betaine、Butyrate、Glucose、Scyllo-Inositol含量显著下调，具体含量变化如下：Betaine的积分面积均数从正常鼠的0.576916±0.138669317下降到0.364879±0.055045628，P<0.001；Butyrate的积分面积均数从正常鼠的2.054152125±1.132002605下降到0.845627875±0.406826504，P<0.05；Glucose的积分面积均数从正常鼠的0.163973388±0.055315766下降到0.050115913±0.033780499，P<0.001；Scyllo-Inositol的积分面积均数从正常鼠的0.237631667±0.087895853下降到0.129596283±0.025747797；P<0.05；模型大鼠粪便中Alanine、Asparagine、Aspartate、Citrate、Creatinine、Glutamate、Glutamine、Isobutyrate、Isoleucine、Lactate、Leucine、Methionine、Phenylalanine、Propionate、Pyruvate、Threonine含量显著上调，具体含量变化如下：Alanine的积分面积均数从正常鼠的0.6795905±0.115019777上升到1.2881475±0.177238037，P<0.001；Asparagine的积分面积均数从正常鼠的0.232976833±0.048197673上升到0.4311975±0.158855282，P<0.05；Aspartate的积分面积均数从正常鼠的0.035562423±0.020726677上升到0.07794175±0.029437469，P<0.001；Citrate的积分面积均数从正常鼠的0.038760118±0.021153991上升到0.075742038±0.02374747，P<0.001；Creatinine的积分面积均数从正常鼠的0.341087375±0.078463115上升到0.460051625±0.098886616，P<0.05；Glutamate的积分面积均数从正常鼠的0.36414925±0.079438783上升到0.566018875±0.091630705，P<0.001；Glutamine的积分面积均数从正常鼠的0.069941167±0.021113785上升到0.123925833±0.012650315，P<0.001；Isobutyrate的积分面积均数从正常鼠的0.075706625±0.032514476上升到0.115289063±0.035502651，P<0.05；Isoleucine的积分面积均数从正常鼠的0.27580575±0.099119943上升到0.431931125±0.077826814，P<0.01；Lactate的积分面积均数从正常鼠的0.8101775±0.338191577上升到1.20282325±0.2792873本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种老年便秘动物模型的构建，其特征在于：每日对模型组大鼠皮下注射300 mg/kg的D-半乳糖，从第7周开始，按首剂量5 mL/只灌胃给予大鼠白醋，此后单双日交替灌喂白醋和活性炭冰水混合物，白醋的剂量是3 mL/200g，活性炭冰水混合物的剂量是5 mL/200g；其中白醋的总酸度g/100g为6度，活性炭冰水混合物中含有16.67 mmol/L活性炭，连续5周；造模周期共为11周；/n造模完成后，收集动物粪便进行核磁共振分析和多元统计分析，得到20生物标志物，具体为：Alanine、Asparagine、Aspartate、Betaine、Butyrate、Citrate、Creatinine、Glucose、Glutamate、Glutamine、Isobutyrate、Isoleucine、Lactate、Leucine、Methionine、Phenylalanine、Propionate、Pyruvate、

【技术特征摘要】
1.一种老年便秘动物模型的构建，其特征在于：每日对模型组大鼠皮下注射300mg/kg的D-半乳糖，从第7周开始，按首剂量5mL/只灌胃给予大鼠白醋，此后单双日交替灌喂白醋和活性炭冰水混合物，白醋的剂量是3mL/200g，活性炭冰水混合物的剂量是5mL/200g；其中白醋的总酸度g/100g为6度，活性炭冰水混合物中含有16.67mmol/L活性炭，连续5周；造模周期共为11周；
造模完成后，收集动物粪便进行核磁共振分析和多元统计分析，得到20生物标志物，具体为：Alanine、Asparagine、Aspartate、Betaine、Butyrate、Citrate、Creatinine、Glucose、Glutamate、Glutamine、Isobutyrate、Isoleucine、Lactate、Leucine、Methionine、Phenylalanine、Propionate、Pyruvate、Scyllo-Inositol、Threonine；
结合20个生物标志物的含量统计学分析，若模型大鼠血清中：
模型大鼠粪便中Betaine、Butyrate、Glucose、Scyllo-Inositol含量显著下调，具体含量变化如下：
Betaine的积分面积均数从正常鼠的0.576916±0.138669317下降到0.364879±0.055045628，P<0.001；
Butyrate的积分面积均数从正常鼠的2.054152125±1.132002605下降到0.845627875±0.406826504，P<0.05；
Glucose的积分面积均数从正常鼠的0.163973388±0.055315766下降到0.050115913±0.033780499，P<0.001；

Scyllo-Inositol的积分面积均数从正常鼠的0.237631667±0.087895853下降到0.129596283±0.025747797；P<0.05；
模型大鼠粪便中Alanine、Asparagine、Aspartate、Citrate、Creatinine、Glutamate、Glutamine、Isobutyrate、Isoleucine、Lactate、Leucine、Methionine、Phenylalanine、Propionate、Pyruvate、Threonine含量显著上调，具体含量变化如下：
Alanine的积分面积均数从正常鼠的0.6795905±0.115019777上升到1.2881475±0.177238037，P<0.001；
Asparagine的积分面积均数从正常鼠的0.232976833±0.048197673上升到0.4311975±0.158855282，P<0.05；
Aspartate的积分面积均数从正常鼠的0.035562423±0.020726677上升到0.07794175±0.029437469，P<0.001；
Citrate的积分面积均数从正常鼠的0.038760118±0.021153991上升到0.075742038±0.02374747，P<0.001；
Creatinine的积分面积均数从正常鼠的0.341087375±0.078463115上升到0.460051625±0.098886616，P<0.05；
Glutamate的积分面积均数从正常鼠的0.36414925±0.079438783上升到0.566018875±0.091630705，P<0.001；
Glutamine的积分面积均数从正常鼠的0.069941167±0.021113785上升到0.123925833±0.012650315，P<0.001；
Isobutyrate的积分面积均数从正常...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓节，赵迪，赵思俊，李震宇，张丽增，秦雪梅，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：山西;14