烟草中蛋白质氮含量的测定方法技术

本发明专利技术公开一种烟草中蛋白质氮含量的测定方法，包括如下步骤：ａ）称取烟草；ｂ）将称取的烟草放入足量的酸或者硫酸铜溶液中，加热至蛋白质固化完全；ｃ）过滤并用步骤ｂ中所述的酸或者硫酸铜溶液冲洗滤出物；ｄ）合并滤液并定容；ｅ）利用离子色谱法测定步骤ｄ定容后滤液中的ＮＨ↓［４］↑［＋］含量；ｆ）测定烟草中总氮含量；ｇ）结合步骤ｅ和步骤ｆ的测定结果计算出烟草中蛋白质氮含量；其中，步骤ｆ与步骤ａ～ｅ没有先后顺序。本发明专利技术提供的测定方法是一种简便高效的测定烟草中蛋白质氮含量的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及烟草中成分组成的测试方法，尤其涉及烟草中蛋白质氮含量 的测定方法。
技术介绍
烟草中的各成分的含量决定了烟草的质量，例如混合型香烟的焦油和尼古丁比是ll: 1,而烤烟型大多是13 14: 1,因此混合型香烟和烤烟型香烟 相比最大的优点就是香气量足而且焦油含量低。烟草中含有蛋白质，蛋白质 在燃烧后会使烟气苦味增加，产生辛辣味和刺激感，因此蛋白质对巻烟吸味 有不良影响，但是蛋白质含量如果过低，那么烟气就会显得平淡，吃味和香 气也会变差。另外，蛋白质在调制过程中可水解为氨基酸，而氨基酸含量与 烟气的香味和丰满度又有明显的正相关关系。虽然蛋白质的总量在烟草的醇化过程中变化较小，但是烟草中的其他成 分却会随着醇化过程而变化，从而也引起烟草中蛋白质含量的变化。相应地， 对于烟草工业的研究开发以及生产，都需要在各个阶段掌握烟草中蛋白质的 含量，测定烟草中蛋白质的含量，对了解烟叶品质十分重要。目前，烟草行业对蛋白质的检测方法可以参照中华人民共和国烟草行业 标准YC/T 166-2003进行，此方法的测试原理也是国内外通常采用的，其原 理是，用乙酸等酸沉淀烟草样品中的蛋白质氮，通过将非蛋白质氮含氮物与 蛋白质分离、洗脱，而后将蛋白质连同其他沉淀物一起消煮，将蛋白质氮在 浓硫酸及催化剂作用下转化为硫酸铵，强碱蒸馏释放出氨，用标准酸液接收， 反滴定，最后通过计算得出烟草中蛋白质的含量。这个方法本质上是测定烟 草中蛋白质氮的含量，从而通过计算得出蛋白质的含量。此方法测定过程中， 在对沉淀物进行消煮以后，还需要重新收集由强碱蒸馏释放出的氨，用标准 酸液接收和反滴定，需要多次将试样转移，试验过程中人为因素造成的误差 较大。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种烟草中蛋白质氮含量的测定方 法，测定结果准确、误差小。为了解决以上的技术问题，本专利技术提供以下的技术方案 一种，包括如下步骤a) 称取烟草；b) 将称取的烟草放入足量的酸或者硫酸铜溶液中，加热至蛋白质固化 完全；c) 过滤并用步骤b)中所述的酸或者硫酸铜溶液冲洗滤出物；d) 合并滤液并定容；e )利用离子色谱法测定步骤d )定容后滤液中的冊4+含量，f) 测定烟草中总氮含量；g) 结合步骤e)和步骤f )的测定结果计算出烟草中蛋白质氮含量； 其中，步骤f)与步骤a) e)没有先后顺序。对于这个，步骤a)和步骤b)完成的是 固氮过程；步骤c)和步骤d)为过滤分离剔除蛋白质固化形成的沉淀；步骤 e)为利用离子色谱法测定步骤d)定容后滤液中的丽/含量；步骤f )为测 定烟草中总氮含量的步骤；步骤g)是结合前面步骤所测得的总氮含量和非 蛋白质氮含量，做差值计算得出烟草中蛋白质氮含量。因为步骤a) e)与 步骤f)是相互独立的，因此可以没有先后顺序。步骤a) e)为测定烟草 中非蛋白质氮含量的步骤。对于整个测定方法而言，首先通过固氮处理将烟草中的蛋白质以沉淀的 形式剔除，然后利用测定总氮的方法(离子色谱法)测定滤液中的NIV含量 即可得到烟草中非蛋白质氮的含量，结合烟草中测定出的总氮的含量，通过 计算即可得出烟草中蛋白质氮的含量。通过蛋白质和氮元素的质量对应关系， 还可以计算出烟草中蛋白质的含量。通过测定烟草中非蛋白质氮对应的NH/含量，并且通过测定烟草中总氮 的含量，可以很容易计算出烟草中蛋白质的含量，测定方法步骤少，不用再 进行滤渣转移、收集气体和滴定等操作，而现有的直接测定蛋白质氮的方法中，需要进行抽滤处理并将滤渣转移到消化容器中，在将蛋白质氮转化为硫 酸铵以后，还需要进行强碱蒸馏释放出氨，用标准酸液接收，反滴定，这些 实验操作比较复杂而且因实验人员的不同而存在较大差异。可以看出，本发 明提供的测定方法减少了人为的操作误差，是一种筒便高效的测定烟草中蛋 白质氮含量的方法。下面对各个步骤进行详细的论述和介绍，并提供一些优选或者可以替代 的技术方案。步骤a )称取烟草前已述及，这个步骤是固氮过程的一个步骤。在本专利技术中，固氮过程指 的是烟草中的蛋白质与酸反应生成沉淀的过程。固氮过程也称为氮固化的过 程等。确切的说，本步骤是一个称量步骤，为了简单起见，所以把这个称量步骤定义成固氮过程的一个步骤。称量步骤在分析测试过程中是基本的操作之一。由于烟叶的比重比较小，所以称量使用的天平等称量设备选用精确度高的电子天平或者光电天平比较 好，精确度一般需用能够精确到0. OOlg (克)或者精确度更高的测试仪器。 在进行此操作步骤之前，通常还需要测定烟草中的水分含量， 一般采用 的是烘箱法。也可以将烟草样品烘干并置于干燥的环境中待用。步骤b)将称取的烟草放入足量的酸或者硫酸铜溶液中，加热至蛋白质 固化完全这个步骤是固氮反应发生的步骤，在此步骤中，烟草中的蛋白质与酸或 者硫酸铜反应，生成沉淀。所述酸需要有一定的浓度，其本质是有一定的氢 离子浓度。对于不同种类的酸，对酸的质量百分比浓度的要求也是不一样的， 可以根据实际测试中需要的酸来进行选定。参与反应的酸一般选用酸性较强 的有机酸，最常用的是乙酸。也可以是乙酸、丙酸、丙二酸、三氯乙酸等， 或者它们的组合。其中乙酸是最常用的，当选用乙酸时，乙酸的浓度优选使 用0.4%~0.6%;三氯乙酸也较为常用，当选用三氯乙酸时，三氯乙酸的浓度 优选使用0. 8%~2. 0%。本专利技术不限于只使用有机酸，也可以使用其它溶剂如 硫酸铜等，只要能够与烟草中的蛋白质发生变性，凝结沉聚，从而可以通过 过滤与非蛋白质氮分离即可。当釆用乙酸进行蛋白质的固氮反应时，乙酸的浓度可以选用0. 4°/o~0.6%,反应的温度选择为所选用乙酸溶液的沸腾温度，对于选用0. 4%~0. 6% 的乙酸，需要保持乙酸沸腾15分钟以上，以使得固氮反应的完全发生。步骤c)过滤并用步骤b)中所述的酸或者硫酸铜溶液沖洗滤出物步骤c)为过滤分离剔除蛋白质固化形成的沉淀的主要步骤。此步骤的 操作简单，采用常用的过滤操作即可，既可以选用普通过滤，也可以选用抽 滤的过滤形式。这也是本专利技术的优势之一，现有技术中在直接测定蛋白质氮 的过程中也有一个过滤过程，却最好采用抽滤的形式，本专利技术中则无此项要 求，因为本专利技术的测定的目标物是滤液，所以，采用抽滤或者普通过滤的形 式都可以，况且采用抽滤时存在滤液转移困难的问题，因此本步骤中的过滤 优选使用普通过滤形式，也就是常压过滤。过滤并用步骤b)中所述的酸或者硫酸铜溶液沖洗滤出物，可以使得滤 纸或者沉淀中的残留的非蛋白质氮进入滤液，有利于提高测试的准确度。需 要指出的是，此步骤中用到的酸或者硫酸铜溶液只是和步骤b)中所述的物 质一致，并不表示一定是与步骤b)中用到的酸或者硫酸铜溶液的浓度也一 样。例如，如果步骤b)中用到的是浓度为0. 5%的乙酸，那么步骤c)中可 以使用浓度为0. 7%的乙酸。然而优选的方式还是，步骤c)中使用的酸或者 硫酸铜溶液的浓度与步骤b )中使用的酸或者硫酸铜溶液的浓度相差不大， 更有选地，使用浓度一致的酸或者硫酸铜溶液。步骤d)合并滤液并定容如前所述,这个步骤为过滤分离剔除蛋白质固化形成的沉淀的步骤之一， 也可以认为是为下一步的操作做准备的一个步骤。从步骤c)来的滤液并没 有一个准确的容积数值，在后续的计算过程中也无法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种烟草中蛋白质氮含量的测定方法，包括如下步骤：　ａ）称取烟草；　ｂ）将称取的烟草放入足量的酸或者硫酸铜溶液中，加热至蛋白质固化完全；　ｃ）过滤并用步骤ｂ）中所述的酸或者硫酸铜溶液冲洗滤出物；　ｄ）合并滤液并定容；　ｅ）利用离子色谱法测定步骤ｄ）定容后滤液中的ＮＨ↓［４］↑［＋］含量，　ｆ）测定烟草中总氮含量；　ｇ）结合步骤ｅ）和步骤ｆ）的测定结果计算出烟草中蛋白质氮含量；　其中，步骤ｆ）与步骤ａ）～ｅ）没有先后顺序。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孔浩辉，
申请(专利权)人：广东中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]