用于血红蛋白定量确定的方法和系统技术方案

一种用于定量确定未稀释、未溶血的全血中血红蛋白的方法，其包括：将未改变的全血的样品采集到毛细试管中；将所述试管引入用于吸收测量的装置；将吸收测量延迟确定的时间周期；在４９０至５２０ｎｍ范围内的第一波长上直接对试管中的样品执行第一吸收测量；进一步地在与第一波长不同的第二波长上进行第二吸收测量，在所述第二波长上的吸收显著小于在所述第一波长上的吸收；以及对第一和第二吸收测量的结果进行处理以确定样品中血红蛋白的浓度。还公开了一种用于实施该方法的系统。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种分析方法，以及用于执行这种分析的系统。具体地，统。
技术介绍
早在美国专利4， 088, 448中公开了一种用于液体采样、将样品与试剂 混合和直接对与试剂混合的样品进行光学分析的一次性试管。这种已知的 试管具有若干优点，如它尤其简化了取样过程，减少了器皿的数量，和 通过使分析过程不受进行分析的操作者的操作技术影响而显著提高分析的 准确性。在美国专利5, 674， 457中公开了基于相同原理且流动特性得到提 高的试管结构。根据这些专利开发的一次性试管目前广泛用于未稀释全血中血红蛋白 的测量(Hb确定)。为此，要用试剂对试管腔进行预处理，以便当将血液 样品引入试管时，红细胞(red blood cell)壁净皮分解并且引发化学反应。 反应的结果使得可直接经试管的透明壁进行吸收测量而进行Hb确定，所述试管在也^:称为光学窗的测量区域具有预定且精确定义的相对平面壁的内表面间3巨。测量方法^&于Vanzetti， G.的"An azide-methaemoglobin mehod for haemoglobin determination in blood" ， Am. J. Lab. & Clin. Med. 67, 116-126 ( 1996 )中的改进的叠氮高4失血红蛋白 (azidmethemoglobin )法。分光光度测量在570和880nm上进行。这种基于干式化学的定量测量 方法已取得巨大成功，这可以在例:i口von Schenck， H.、 Falkensson， M.和Lundberg, B.发表于Clinical Chemistry, 32巻,No3， pages 526-529,1986的 文章"Evaluation of 'HemoCue，, a new device for determining hemoglobin"中看出，因为与确定Hb的标准湿法得到的结果相比，该方法得到相同或 者甚至更好的结果。所使用的试剂包括溶血红细胞的脱氧胆酸钠、将血红 蛋白转换为叠氮高4失血红蛋白的叠氮化钠和硝酸钠。由于所^使用试剂的吸湿性，所以其贮藏期有限且要求将试管贮藏于含有干燥剂的密封包装内。甚至M烦的是这样的事实，即在高湿度气候中， 试管必须在去除包装后的几分钟内使用，否则试剂将被破坏并且测量将不 准确并因此无效。然而，由所用试剂的吸湿性引起的问题可以消除，因为已发现不一 定非要使用这些试剂，正如在美国专利6,638,769中公开的那样，根据该 专利，在490至520nm的波长范围内直接对微量试管中的样品进行首次吸 收测量。然而，根据该专利申请中所公开的专利技术，需要在进行测量之前对 血液溶血。因此，试腔必须包含用于分解红细胞并释放这些细胞中所包含 的血红蛋白的溶血剂。在对血液样品中的血红蛋白进行光度吸收测量时使 用溶血剂的必要性也公开于例如美国专利5， 064, 282 ( Artel)中。在不使用溶血剂的情况下定量光学确定全血中血红蛋白的方法是已知 的，但这些方法的共同之处在于它们都相当复杂。这首先取决于由于存在 高浓度的红细胞而引起的血液不均匀性，其结果是光因与这些不均匀的血 液样品微粒相互作用而被散射。因此，光不是直接穿过样品而是在一定散 射角范围内被偏转。引起问题的另一因素是血液可含有多达5种的不同种 类的血红蛋白的事实。解决这些问题的专利公开例如有美国专利6,262,798 (Shepherd )和WO 01/53806 (Radiometer )。根据美国专利6，262，798所公开的专利技术，为实现准确测量需要用到多 个波长。需要多个波长使得分光光度计相当复杂。波长的选择是根据它们 以最小散射和最大吸收区分血红蛋白种类的能力。该专利还^^开了可减少 检测区域外散射的问题的大型检测器的使用。WO 01/53806公开了 一种特别适于对全血进行光学测量的装置。该装置包括吸收滤光片或者干涉滤光片，其对检测器灵敏度和在不同嘲匸射水平 观察到的有效光程长度的变化提供校正。该装置使用用于检测传播通过吸 收滤光片或者干涉滤光片的散射光的大型检测器。在美国专利6，831,733中已经指出全血中血红蛋白总量的精确确定 不仅可以不使用溶血剂，而且还可以不使用如美国专利6,262，798所公开 的多个波长。根据美国专利6，831，733，全血中血红蛋白总量可以通过在第 一波长和第二波长上执行两次吸收测量来确定，其中第一波长在4卯-520nm的范围内，在第二波长上的吸收要比第一波长上的吸收小很多。然 后可通过处理第一和第二吸收测量的结果来确定样品中血红蛋白的浓度。 第一和第二吸收测量之间的吸收差异主要是由血红蛋白的吸收差异引起的。然而，还存在影响这种吸收差异的其他因素。在这些其他因素中，最 重要的是样品中的散射差异。根据美国专利6,831,733，散射的影响被认为 与在第二吸收测量中测得的吸收率有关。因此，已意外发现通过使用散 射补偿项，样品中血红蛋白的浓度可作为仅仅两次吸收测量之间的吸收差 异进行测量。该补偿项取决于第二吸收测量的结果。
技术实现思路
本专利技术的目标是提供一种快速的用于定量确定未改变全血中血红蛋白 的方法。第二目标是提供一种用于确定未改变全血中血红蛋白的方法，该方法 可在微量试管中执行，其中所述试管还可用来采集血液样品。第三目标是提供一种用于确定未改变全血中血红蛋白的吸收测量的结 果的简单处理方法。第四目标是提供一种用于实施未改变全血中血红蛋白的确定方法的系统。其它目标将从以下描述和附图中变得显而易见。 根据本专利技术的一个方面，用于提供这种血红蛋白确定的方法包括以下 步骤将未改变全血的样品釆集到毛细试管中；将所述试管引入用于吸收测量的装置中；将吸收测量延迟预定时间周期；在4卯至520nm范围内的 第一波长上直接对试管中的样品执行第一吸收测量；进一步地在与第一波 长不同的第二波长上进行第二吸收测量，其中在所述第二波长上的吸收显 著小于在所述第一波长上的吸收；以及对第一和第二吸收测量的结果进行 处理以确定样品中血红蛋白的浓度。根据本专利技术的另一方面，用于提供这种血红蛋白确定的系统包括用 于在490至520nm的第一范围内的第一波长上和在第二范围内的第二波长 上发光的装置，其中在所述第二波长上，血液中的光吸收显著小于在所述 第一波长上的光吸收；试管支架，其被设置成接纳毛细试管，所述毛细试 管容纳未改变全血的样品；用于检测传播通过样品的光的检测器，其在第 一吸收测量中检测所述第一范围内的光，在第二吸收测量中检测所述第二 范围内的光；控制器，其用于在将试管放入试管支架与执行吸收测量之间 形成预定时间周期的延迟；以及处理单元，其用于处理第一和第二吸收测 量的结果，以确定样品中血红蛋白的浓度。根据本专利技术，已意外发现不仅可容易地直接对未改变的、即未稀释 和未溶血的全血液样品进行血红蛋白的定量确定，而且可以通过简单地在 不同的波长上进行两次吸收测量并且处理这些结果来实现这种定量确定。这种确定可以在不使用吸湿性试剂(诸如叠氮化钠和硝酸钠)或者溶 血剂的情况下对血液样品进行。因此，这种血红蛋白确定基于吸收测量， 同时血红蛋白被束绰在红细胞内。因此可以在无需溶血红细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于定量确定未稀释、未溶血的全血中血红蛋白的方法，其包括：　将未改变全血的样品采集到毛细试管中；　将所述试管引入用于吸收测量的装置；　将吸收测量延迟确定的时间周期；　在４９０至５２０ｎｍ范围内的第一波长上直接对试管中的样品执行第一吸收测量；　进一步地在与第一波长不同的第二波长上进行第二吸收测量，在所述第二波长上的吸收显著小于在所述第一波长上的吸收；以及　对所述第一和第二吸收测量的结果进行处理以确定样品中血红蛋白的浓度。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J彼得松，
申请(专利权)人：海莫库公司，
类型：发明
国别省市：SE[瑞典]