含有补骨脂的制剂中补骨脂成分的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种含有补骨脂的制剂中补骨脂成分的检测方法，该方法包括：将供试品先经过中性氧化铝前处理再制备供试品溶液，以及制备对照品溶液，采用高效液相色谱法和紫外检测器进行检测，流动相为体积比４０∶４０－８０的甲醇－水，检测波长为２２５－２７５ｎｍ；本发明专利技术的检测方法成功地消除了液相图谱中的杂峰，使液相基线更平，结果更精确稳定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供了一种药物中有效成分的检测方法，其为一种中药有效成分的 检测方法，尤其是指中药制剂中补骨脂成分的检测方法。
技术介绍
目前国家法定常用的含有补骨脂作为主要成分的中成药制剂中，大多缺少 有效的有效成分或指标性成分的含量检测方法。这些中成药多为滋补强壮或扶 正祛邪的中成药，如复方杜仲强腰酒，国公酒，健步强身丸、偏瘫复原丸、人 参鹿茸丸、参茸三鞭丸、温肾全鹿丸、锁阳固精丸、茴香橘核丸、肉蔻四神丸、 强阳保肾丸、七宝美髯丸、安坤赞育丸、加味青娥丸、千金止带丸、全鹿丸、 益坤丸、安肾丸、黑锡丹等。但是至今没有更好的方法可以准确、有效、便捷地检测中成药中补骨脂有 效成分包括补骨脂素和异补骨脂素的含量。
技术实现思路
针对现有技术在中药成分检测方面存在的缺陷，为了更好地监控这些中成药 的质量，专利技术人经过大量的实验，研究了一种中药制剂中补骨脂素的检测方法， 结果证明，本专利技术的方法避免现有方法存在的千扰，测定结果也更准确。本专利技术的目的是提供一种，通 过该方法可以得到准确的结果，且无其他杂质干扰。本专利技术提供一种，该检测方法 实质上为制剂中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定方法，该方法包括(1) 制备供试品溶液，取含有补骨脂的液体制剂为样品，用3-8倍体积的 乙醚振摇，挥干乙醚，残渣加甲醇溶解，定量转移至量瓶中，加甲醇至与该样品等体积，置内装100-200目中性氧化铝的中性氧化铝柱上，收集过柱后流出的 洗脱液，用微孔滤膜滤过，取续滤液，得供试品溶液；(2) 制备对照品溶液，取补骨脂素对照品和异补骨脂素对照品，加甲醇制 成含补骨脂素20mg/ml的溶液和含异补骨脂素20mg/ml的溶液，得到补骨脂素 对照品溶液和异补骨脂素对照品溶液。(3) 采用高效液相色谱法和紫外检测器进行检测，色谱柱的填充剂为十八 烷基硅烷键合硅胶，流动相为体积比40: 40-80的甲醇-水，检测波长为 225-275nm;(4) 检测方法，吸取供拭品溶液、补骨脂素对照品溶液和异补骨脂素对照 品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本专利技术的检测方法釆用样品先经过前处理再用高效液相色谱的检测方法， 改变了通常对液相色谱中含有补骨脂药材成分的样品处理方法，采用样品提取 后的乙醚液过中性氧化铝柱再进入高效液相的方法，成功地消除了液相图谱中 的杂峰，使液相基线更平，结果更精确稳定。本专利技术主要采用样品的乙醚液过中性氧化铝柱再迸入高效液相的方法，这 里的中性氧化铝柱是己经过活化处理的中性氧化铝柱，其为市场销售公知的产 品，其为内装100-200目中性氧化铝的分离用层析柱，在本专利技术的优选实施例中， 对于所需要处理体积一般不超过50ml的样品而言，采用的中性氧化铝柱的柱内 径约为10mm ，内装4克100-200目中性氧化铝。在本专利技术提供的中，其为制剂 中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定方法，该方法优选包括1.供试品溶液的制备取样，样品用3-8倍量(体积)的乙醚振摇，乙醚液挥干乙醚，残渣加甲醇使溶解，定量转移至量瓶中，加甲醇至与取样的样品等体积，置中性氧化铝柱上，该中性氧化铝柱为内装100-200目中性氧化铝的柱，收集过柱后流出的洗脱液，用微孔滤膜滤过，取续滤液，得供试品溶液；该样品为含有补骨脂的液体制剂；2. 对照品溶液的制备取干燥恒重的补骨脂素、异补骨脂素对照品，加甲醇制成含补骨脂素、异补骨脂素20mg,/ml的溶液，得到补骨脂素对照品溶液和 异补骨脂素对照品溶液。3. 色谱条件与系统适应性试验采用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂，流 动相为体积比40: 40-80的甲醇-水，检测波长为225-275nm;理论塔板数按补 骨指素峰计算，不低于4000。4. 观淀分别精密吸取两种对照品溶液与供拭品溶液各10ul，注入液相色 谱仪，测定，即得。在本专利技术的优选实施例中，提供一种含有补骨脂的制剂中补骨脂成分的检 测方法，其为制剂中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定方法，该方法包括1. 供试品溶液的制备取样品10ml，置分液漏斗中，用40-60ml的乙醚振 摇提取，优选分次振摇提取，合并乙醚液，挥干乙醚，残渣加甲醇适量使溶解， 定量转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，置已处理好的中性氧化铝柱上， 该中性氧化铝柱为内装4克100-200目中性氧化铝的内径10mm的柱，收集过 柱后流出的洗脱液，用0.45pm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。2. 对照品溶液的制备精密称取减压干燥至恒重的补骨脂素、异补骨脂素 对照品，加甲醇分别制成含补骨脂素、异补骨脂素20mg/ml的溶液，即得。3. 色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水(体积比l: l-2)为流动相，检测波长为230-260nm;理论塔板数按补骨指素峰 计算，应不低于4000。4. 测定分别精密吸取两种对照品溶液与供拭品溶液各10ul，注入液相色 谱仪，测定，即得。本专利技术的方法采用的高效液相色谱条件是十八烷基硅烷键合硅胶为色谱 柱的填充剂，该色谱柱的柱温一般为20-50'C，优选大约4(TC。甲醇-水(体积比优选40: 50-70)为流动相，流动相的流速为0.5-2ml/min，优选大约lml/min;检 测波长优选为240-250nm，更优选为246nm。针对本专利技术采用的高效液相色谱系统而言，为了数据的准确，还应该进行 系统适应性试验S卩，理论塔板数按补骨指素峰计算，应不低于4000。本专利技术的上述检测方法是经过大量的实验方法和数据筛选才得到适合本发 明的方法，其为含有补骨脂的中药制剂尤其是中药液体制剂的补骨脂有效成分 的含量测定方法。本专利技术的检测对象——补骨脂的有效成分，指的是补骨脂素和异补骨脂素。 本专利技术的优选实施例中，以含有补骨脂的药酒复方杜仲强腰酒为例，检测制剂中含有补骨脂的方法所采用的高效液相色谱条件1. 仪器与试剂仪器SHIMADZU LC-10AD液相色谱仪；SPD-M10A检测器； 色谱柱DIAMOSILTMC18(250mmX4.6mm， 5m);试剂甲醇一色谱纯(天津四友生物医学技术开发公司)；水一高纯水(国家标 准物质中心提供)，其余试剂均为分析纯；对照品补骨脂素对照品(中国生物制品检定所提供，批号0739—200108); 异补骨脂素对照品(中国生物制品检定所提供，批号0738—9907);均为含量测定 用，纯度为100%。2. 方法与结果 色谱分析条件流动相甲醇-水(40: 60); 检测波长246nm; 柱温40'C; 流速lml/min; 补骨脂素理论板数为4300。3. 线性关系考察精密吸取补骨脂素(0.0392mg/m1)2、 4、 6、 8、 10ml移入10ml量瓶中，用 甲醇稀释至刻度，摇匀。精密吸取上述对照品溶液各10pl注入液相色谱仪，按 上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，补骨脂素进样量为横坐 标，绘制标准曲线，得回归方程y=8083206.6X—29933， r=0.9999。结果表明，补骨脂素在0.0784 0.392^范围内具良好的线性关系。表线性关系考察补骨脂素进样量(y g)峰面积0.07846163010.156812576410.235218757550. 313625422990.39203181789精密吸本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有补骨脂的制剂中补骨脂成分的检测方法，该方法包括：　（１）制备供试品溶液，取含有补骨脂的液体制剂为样品，用３－８倍体积的乙醚振摇，挥干乙醚，残渣加甲醇溶解，加甲醇至与该样品等体积，置内装１００－２００目中性氧化铝的中性氧化铝柱上 ，收集过柱后流出的洗脱液，用微孔滤膜滤过，取续滤液，得供试品溶液；　（２）制备对照品溶液，取补骨脂素对照品和异补骨脂素对照品，加甲醇制成含补骨脂素２０ｍｇ／ｍｌ的溶液和含异补骨脂素２０ｍｇ／ｍｌ的溶液，得到补骨脂素对照品溶液和异补骨脂 素对照品溶液；　（３）采用高效液相色谱法和紫外检测器进行检测，色谱柱的填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为体积比４０∶４０－８０的甲醇－水，检测波长为２２５－２７５ｎｍ；　（４）吸取供拭品溶液、补骨脂素对照品溶液和异补骨脂素对 照品溶液各１０ｕｌ，注入液相色谱仪，测定，即得。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李银，刘柏刚，王铭文，张爽，吴炜，夏蓉，彭鹏，张薇，
申请(专利权)人：北京同仁堂股份有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]