检测分析物的装置和方法制造方法及图纸

本发明专利技术涉及一种使用固定在固相支持物上的最佳浓度的Ｆｃ受体－抗体络合物，检测样品中分析物的装置和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种对样品中的分析物进行检测的检测装置，其依赖于分 析物传感器受体分子与附着于支持物上的分析物传感器分子的络合物。本专利技术还涉及一种使用所述检测装置对样品中的分析物进行检测的方法。此外，本专利技术涉及一种包括根据本专利技术所述的检测装置的设备。 微型检测装置已经用于各种的化学和生化诊断应用以及人工合成应用中。这类检测装置用于(例如)特别针对即时诊断的横向流动测试(lateral flow test)和药物滥用测试。美国专利申请2003/0198967 Al描述了基于阵列的检测装置，其中A 蛋白通过酰氟官能性偶合到固体基质上。在第二步中，抗体与加载A蛋白 的支持物结合。然后使用这一安排对样品中与结合A蛋白的抗体特异性结 合的分析物进行检测。在这一装置设置中，A蛋白用作分析物传感器受体 分子，而抗体组成分析物传感器分子。然而，将分析物传感器分子以功能性构型固定在支持物上、提高分析 物检测期间的信噪比以及降低通常昂贵的分析传感器受体分子和分析物传 感器分子的用量仍是使检测装置进一步微型化高效发展的关键因素。本专利技术的一个目的是提供一种确定待测试样品中存在分析物的检测装 置和方法。本专利技术的另一目的是提供一种能够高效检测样品中的分析物同时改进 待使用分析物传感器受体分子和/或分析物传感器分子的用量的检测装置。为了实现上述目的，提供了如独立权利要求1所定义的检测装置，以 及如独立权利要求14所定义的检测方法。根据本专利技术的示例性实施例，提供了一种检测装置，包括至少一个支 持物；至少一个分析物传感器受体分子，其位于所述至少一个支持物的至6少一部分之上和/或之内；以及至少一个分析物传感器分子，其与所述至少 一个分析物传感器受体分子相关联，并且所述至少一个分析物传感器分子 和所述至少一个分析物传感器受体分子的摩尔比介于近似2:1和近似 I:IO，OOO之间。在本专利技术的另一示例性实施例中，所述至少一个分析物传感器分子和 所述至少一个分析物传感器受体分子的摩尔比介于近似1.9:1和近似 1:1000之间、介于近似1.8:1和近似1:750之间、介于近似1.7:1和近4以 1:500之间、介于近似1.6:1和近似1:250之间、介于近似1.5:1和近似1:150 之间、介于近似1.4:1和近似1:125之间、介于近似1.3:1和近似1:100之 间、介于近似1.3:1和近似1:90之间、介于近似1.2:1和近似1:80之间、 介于近似1.1:1和近似1:70之间、介于近似1:1和近似1:60之间、介于近 似1:1.1和近似1:50之间、介于近似1:1.2和近似1:40之间、介于近似1:1.3 和近似1:30之间、介于近似1.4:1和近似1:20之间、介于近似1:1.5和近 似1:15之间或者介于近似1:1.5和近似1:10之间。本专利技术又一示例性实施例涉及一种具有上述特征的检测装置，其中， 所述至少一个支持物表面积每一Hm2上的分析物传感器分子的数目介于近 似50和250,000之间、介于近似100和近似100,000之间、介于近似150 和近似75,000之间、介于近似200和近似50,000之间、介于近似250和近 似25,000之间、介于近似300和近似21,000之间、介于近似350和近似 18,000之间、介于近似400和近似15,000之间、介于近似450和近似12,000 之间、介于近似500和近似11,000之间、介于近似550和近似9000之间或 者介于近似600和近似8000之间。在本专利技术的又一实施例中，所述检测装置包括至少一个支持物表面积 每一^11112上的分析物传感器受体分子的数目介于近似500和250,000之间、 介于近似1000和近似100,000之间、介于近似1500和近似50,000之间、 介于近似5000和近似25,000之间、介于近似6000和近似20,000之间、介 于近似6500和近似16,000之间、介于近似7000和近似15,000之间、介于 近似7500和近似13,000之间或者介于近似8000和近似12,000之间。在另一实施例中，选择支持物表面积每一pm2上的分析物传感器受体 分子和分析物传感器分子的数目以符合上述指定的摩尔比。在本专利技术的一个实施例中，所述检测装置的支持物可以是从包括含有 聚合物材料、玻璃、陶瓷、凝胶、离子材料、非织造物、金属、滤纸、膜 及其复合材料的多孔或非多孔材料的组中选择的固体基质。在特别优选的实施例中，使用优选主要由尼龙、硝酸纤维素、PVDF、 聚醚砜等制成的膜。在一个实施例中，本专利技术涉及一种检测装置，其中分析物传感器受体 分子能够以功能性构象的排列结合分析物传感器分子。根据本专利技术，这种 检测装置包括至少一个分析物传感器分子，其能够借助于一个结合位点与 分析物传感器受体分子特异性相互作用而借助于第二结合位点与感兴趣的 分析物特异性相互作用，并且通过第二结合位点与分析物的结合基本上不 受伴随而来通过第一结合位点与分析物传感器受体分子的结合的影响。在本专利技术的一个方面，分析物传感器受体分子能够结合到抗体的Fc部 分上。这样，在一个实施例中，分析物传感器受体分子可以从特异性识别另 一抗体Fc部分的抗体中选择，或者优选从金黄色葡萄球菌(6top /o""w 的A蛋白、C株或G株链球菌的G蛋白、或者重组A/G蛋白中进 行选择。特别优选的实施例使用重组A/G蛋白作为分析物传感器受体分子。在一个实施例中，检测装置使用选自适体、蛋白质受体、酶、抗原、 配体和半抗原以及特别优选是抗体的分析物传感器分子。本专利技术的一个实施例涉及一种检测装置，其中借助于共价或非共价相 互作用，将分析物传感器受体分子置于支持物上，该支持物可以是诸如硝 酸纤维素膜的膜。在共价相互作用的情形中，通过至少一个化学键合，将 分析物传感器受体分子键合到支持物(其可以是膜)上。为此目的，支持 物可以提供至少一个能够在支持物和分析物传感器受体分子之间建立化学 键的化学官能团。在优选实施例中，该官能团包括COOH基团。本专利技术的又一实施例涉及一种检测装置，其中分析物传感器分子通过 共价或非共价相互作用结合到分析物传感器受体分子上。在非共价相互作 用的情形中，通过分析物传感器受体分子与分析物传感器分子之间由于两 种分子三维结构的互补而产生的亲和力，来介导分析物传感器分子与分析 物传感器受体分子的结合。在又一实施例中，用能够降低、防止和/或去除待测试样品各成分与支 持物、分析物传感器受体分子和/或分析物传感器分子的非特异性结合的溶 液处理检测装置。在本专利技术的一个实施例中，在与待测试样品接触之前，检测装置已经用包括从BSA、 HAS、 FSA、酪蛋白、Fc尾和/或洗涤剂组成 的组中所选的化合物的封闭溶液进行处理。本专利技术还针对一种对至少一个样品中的至少一个分析物进行检测的方 法，其包括如下步骤--提供至少一个如上所述的检测装置，-用包括至少一个分析物的至少一个样品接触所述至少一个检测装置，-任选地用能够去除未结合或非特异性结合的样品成分的溶液洗涤所 述至少一个检测装置。-检测所述至少一个分析物传感器分子和所述至少一个样品的至少一 个分析物之间的特异性相互作用。为了检测样品分析物和分析物传感器分子之间本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测装置，包括：　－至少一个支持物，　－至少一个分析物传感器受体分子，其位于所述至少一个支持物的至少一部分之上和／或之内，以及　－至少一个分析物传感器分子，其与所述至少一个分析物传感器受体分子相关联，　－其中，所 述至少一个分析物传感器和所述至少一个分析物传感器受体分子的摩尔比介于近似２∶１和近似１∶１０，０００之间。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：C普涅德拉，RML范利斯豪特，
申请(专利权)人：皇家飞利浦电子股份有限公司，
类型：发明
国别省市：NL[荷兰]