一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法技术

本发明专利技术公开了一种超高效液相色谱‑串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法，包括如下步骤：1、配制混合标准溶液；2、UPLC分析检测；3、HESI‑MS/MS分析检测；4、建立标准曲线；5、水产样品的前处理；6、待检测样品的检测。该方法简单，能快速准确检测水产品中三嗪类除草剂的残留量，基质干扰少，测定结果准确。

【技术实现步骤摘要】
一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法
本专利技术涉及水产品中农药残留的理化检验
，具体涉及一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法。
技术介绍
三嗪类除草剂(Triazineherbicides)是一类通过抑制植物光合作用而发挥作用的高效选择性除草剂，早在20世纪50年代就已开始使用。这类除草剂被广泛应用于各种草害的防治，用量大、性质稳定、持效期长，对人类健康和环境造成的危害越来越为人们关注。据报道，这类化合物可能引起人类癌症及先天性缺陷，同时能够干扰荷尔蒙的正常功能，世界多国已将其列入内分泌干扰剂化合物名单。目前，三嗪类除草剂残留的检测主要集中在谷物、蔬菜和环境样品中，而对于水产品中三嗪类除草剂残留的检测方法相对较少。现有技术中，水产品中三嗪类除草剂残留检测主要采用的技术方法分为两部分：样品前处理和仪器分析测定，其中样品前处理多采用固相萃取小柱净化，净化步骤繁琐，且耗时；仪器分析测定报道较多的是气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)，但是气相色谱串联质谱法的稳定性和准确度较差。
技术实现思路
为了解决上述现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法，该方法简单，能快速准确检测水产品中三嗪类除草剂的残留量，基质干扰少，测定结果准确。实现本专利技术上述目的所采用的技术方案为：一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法，包括如下步骤r>1、配制混合标准溶液：配制N份梯度浓度的混合标准溶液，每份混合标准溶液中含有的三嗪类除草剂的种类相同，且每份混合标准溶液中各三嗪类除草剂的浓度相同，各混合溶液中含内标物莠去津-D5，各混合标准溶液中内标物莠去津-D5的浓度相同，内标物莠去津-D5的浓度在各三嗪类除草剂的梯度浓度范围内；2、UPLC分析检测：将各混合标准溶液分别进行UPLC分析检测，UPLC条件如下：色谱柱采用C18色谱柱，流动相采用有机相和水相的混合液，有机相为乙腈，水相为0.1wt％甲酸溶液，流动相流速为0.3-0.4mL/min，流动相采用梯度洗脱的方式进行洗脱；3、HESI-MS/MS分析检测：HESI-MS/MS分析检测条件如下：离子源为加热大气压电喷雾源，正离子模式扫描，选择反应监测模式测定，喷雾电压3000-4000V，蒸发温度300-350℃，离子传输毛细管温度300-350℃，鞘气流速20-40L/min，辅助气为5-15L/min，碰撞气及压力：氩气纯度≥99.999，2.0mTorr，Q1的半峰宽为0.7，Q3的半峰宽为0.7；经HESI-MS/MS分析检测后，可以得到各浓度下各三嗪类除草剂的子离子峰面积与内标物莠去津-D5子离子峰面积的比值；4、建立标准曲线：以各三嗪类除草剂的浓度为横坐标，各浓度下各三嗪类除草剂的子离子峰面积与内标物莠去津-D5子离子峰面积的比值为纵坐标，根据各三嗪类除草剂检测的数据进行绘图，拟合后得到各三嗪类除草剂的标准曲线，从而得到各三嗪类除草剂的标准曲线的函数关系式；5、水产样品的前处理：取均质的水产动物的肌肉样品，加入内标物莠去津-D5，依次加入乙腈、氯化钠和无水硫酸镁，涡旋振荡，离心后取上清液，重复提取并合并上清液，将合并后所得的上清液蒸干，残渣用溶剂溶解，再加入净化剂，所述的净化剂为乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)、十八烷基硅烷键合硅胶(C18)和EMR-Lipid粉的混合物，涡旋振荡后离心，将所得的上清液用微孔滤膜过滤，得到待检测样品；6、待检测样品的检测：将待检测样品按照步骤2-3的方法进行分析检测，得到各三嗪类除草剂的子离子峰面积与内标物莠去津-D5子离子峰面积的比值，将各三嗪类除草剂的子离子峰面积与内标物莠去津-D5子离子峰面积的比值代入对应的三嗪类除草剂的标准曲线的函数关系中，得到对应的三嗪类除草剂的浓度。进一步，所述的色谱柱的柱长100mm，内径为2.1mm，填充粒径为1.7μm，柱温为30℃。进一步，所述梯度洗脱的条件为：第一阶段：洗脱时间为0-2min，其中有机相的体积百分含量为15-25％，水相的体积百分含量为75-85％；第二阶段：洗脱时间为3-5min，其中有机相的体积百分含量从15-25％逐渐增加至90-95％，水相的体积百分含量从75-85％逐渐减少至5-10％；第三阶段：洗脱时间为2-3min，其中有机相的体积百分含量为90-95％，水相的体积百分含量为5-10％；第四阶段：洗脱时间为0.1-0.5min，其中有机相的体积百分含量从90-95％逐渐减少至15-25％，水相的体积百分含量从5-10％逐渐增加至75-85％；第五阶段：洗脱时间为1.5-4min，其中有机相的体积百分含量为15-25％，水相的体积百分含量为75-85％。进一步，步骤5中，溶剂为甲醇或乙腈。进一步，所述的微孔滤膜为有机微孔滤膜，其孔径不大于0.22μm。与现有技术相比，本专利技术的优点与有益效果在于：1、本专利技术采用QuEChERS方法来净化样品，大大缩短了每个水产品样品净化的时间，同时摒弃了常规净化剂，采用了特殊的净化剂，明显减少了基质的干扰，提高了灵敏度和准确度，能够准确反应水产品中三嗪类除草剂残留情况。2、本专利技术采用内标法，采用特殊的内标物莠去津-D5，相比较普通的外标法，能够消除由于仪器、操作条件的波动而对分析结果产生的影响，从而提高测量的精密度，提高结果的准度度和可靠性。附图说明图1是采用实施例1和对比例1回收空白草鱼肌肉组织中添加浓度为20μg/kg的11种三嗪类除草剂的结果比较图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行详细说明。实施例11、配制混合标准溶液：用初始流动相(即洗脱第一阶段使用的流动相)配制6份梯度浓度的混合标准溶液，每份混合标准溶液均含有11种三嗪类除草剂，11种三嗪类除草剂分别为西玛津、敌草净、西草净、莠去津、莠灭净、环草津、特丁津、扑灭津、草净津、特丁净和扑草净，每份混合标准溶液中各三嗪类除草剂的浓度相同，6份混合标准溶液中各三嗪类除草剂的浓度分别为1.0μg/L、5.0μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L，向每份混合溶液中加入内标物莠去津-D5，各混合标准溶液中内标物莠去津-D5的浓度均为5μg/L；2、UPLC分析检测：将各混合标准溶液进行UPLC分析检测，UPLC条件如下：色谱柱采用WatersACQUITYBEHShieldRP18色谱柱(100mm×2.1mm，1.7μm)，柱温：30℃，进样量：10μL；流动相采用有机相和水相的混合液，有机相为乙腈，水相为0.1wt％甲酸溶液，流动相流速为0.4mL/min，流动相采用梯度洗脱的方式进行洗脱，具体如下本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法，其特征在于包括如下步骤/n1.1、配制混合标准溶液：/n配制N份梯度浓度的混合标准溶液，每份混合标准溶液中含有的三嗪类除草剂的种类相同，且每份混合标准溶液中各三嗪类除草剂的浓度相同，各混合溶液中含内标物莠去津-D

【技术特征摘要】
1.一种超高效液相色谱-串联质谱测定水产品中三嗪类除草剂残留的方法，其特征在于包括如下步骤
1.1、配制混合标准溶液：
配制N份梯度浓度的混合标准溶液，每份混合标准溶液中含有的三嗪类除草剂的种类相同，且每份混合标准溶液中各三嗪类除草剂的浓度相同，各混合溶液中含内标物莠去津-D5，各混合标准溶液中内标物莠去津-D5的浓度相同，内标物莠去津-D5的浓度在各三嗪类除草剂的梯度浓度范围内；
1.2、UPLC分析检测：
将各混合标准溶液分别进行UPLC分析检测，UPLC条件如下：
色谱柱采用C18色谱柱，流动相采用有机相和水相的混合液，有机相为乙腈，水相为0.1wt％甲酸溶液，流动相流速为0.3-0.4mL/min，流动相采用梯度洗脱的方式进行洗脱；
1.3、HESI-MS/MS分析检测：
HESI-MS/MS分析检测条件如下：
离子源为加热大气压电喷雾源，正离子模式扫描，选择反应监测模式测定，喷雾电压3000-4000V，蒸发温度300-350℃，离子传输毛细管温度300-350℃，鞘气流速20-40L/min，辅助气为5-15L/min，碰撞气及压力：氩气纯度≥99.999，2.0mTorr，Q1的半峰宽为0.7，Q3的半峰宽为0.7；
经HESI-MS/MS分析检测后，可以得到各浓度下各三嗪类除草剂的子离子峰面积与内标物莠去津-D5子离子峰面积的比值；
1.4、建立标准曲线：
以各三嗪类除草剂的浓度为横坐标，各浓度下各三嗪类除草剂的子离子峰面积与内标物莠去津-D5子离子峰面积的比值为纵坐标，根据各三嗪类除草剂检测的数据进行绘图，拟合后得到各三嗪类除草剂的标准曲线，从而得到各三嗪类除草剂的标准曲线的函数关系式；
1.5、水产样品的前处理：
取均质的水产动物的肌肉样品，加入内标物莠去津-D5，依次加入乙腈、氯化钠和无水硫酸镁，涡旋振荡，离心后取上清液，重复提取并合并上清液，将合并后所得的上清液蒸干，残渣用溶剂溶解，再加入净化剂，所述的净化剂为乙二胺-N-丙基硅烷、十八...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭婕，何力，居小倩，甘金华，陈建武，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院长江水产研究所，
类型：发明
国别省市：湖北;42