一种成年小动物心肌细胞高效分离系统技术方案

本发明专利技术涉及一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，包括支撑架，以及设于支撑架上的灌流液支路、消化酶液支路、三通阀、灌注主路、排气机构、恒温机构；其中灌流液支路、消化酶液支路通过三通阀与灌注主路相连通，恒温机构设于灌流液支路、消化酶液支路上，用于控制灌流液与消化酶液温度，排气机构分别与灌流液支路、消化酶液支路相连通，用于排出灌流液支路与消化酶液支路内的气泡。与现有技术相比，本发明专利技术通过转动接近实验用心脏处的双斜孔活塞，精准控制灌流液与消化酶液之间的切换时间，并通过调整灌流液储罐与消化酶液储罐的高度或双斜孔活塞转动角度控制灌流速度，具有装置结构简单、控制方法简便、易于操作等优点。

An efficient isolation system for adult small animal cardiomyocytes

【技术实现步骤摘要】
一种成年小动物心肌细胞高效分离系统
本专利技术属于活细胞分离系统
，涉及一种成年小动物心肌细胞高效分离系统。
技术介绍
原代培养的成年心肌细胞广泛用于心血管疾病机理，心血管药物开发及心肌毒理筛选的研究过程。现有的小动物成年心肌细胞分离系统的灌流分离系统主要(DLNatureLifesciences,TYPE803；Radnoti,120107EZ；上海奥尔科特,ALC-M)由两个及以上的玻璃水浴恒温器，蠕动泵和循环水浴锅组成。由于现有的成年心肌细胞分离系统包含两个及以上串联的玻璃水浴恒温器，初始灌流液和消化酶液先后通过同一管道进入心脏，不同液体间交叉的时间精准控制非常困难，同时不能独立于蠕动泵使用，增加了投入成本。
技术实现思路
本专利技术的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，用于解决心肌细胞分离实验过程中，初始灌流液与消化酶液之间交叉时间难以精准控制从而影响最后分离效果的问题。本专利技术的目的可以通过以下技术方案来实现：一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，包括支撑架，以及设于支撑架上的灌流液支路、消化酶液支路、三通阀、灌注主路、排气机构、恒温机构；所述的灌流液支路、消化酶液支路通过三通阀与灌注主路相连通；所述的恒温机构设于灌流液支路、消化酶液支路上，用于控制灌流液与消化酶液温度；所述的排气机构分别与灌流液支路、消化酶液支路相连通，用于排出灌流液支路与消化酶液支路内的气泡。通过三通阀控制灌流液支路或消化酶液支路与灌注主路相连通，从而实现灌流液与消化酶液之间切换时间的精准控制，避免消化酶液供应时间过长或过短对心肌细胞产生影响导致最后分离效果较差的问题。进一步地，所述的三通阀为双斜孔活塞。通过转动双斜孔活塞以便于切换流入灌注主路内的液体。进一步地，所述的灌流液支路包括依次连通的灌流液储罐、灌流液进液管、灌流液出液管；所述的灌流液出液管与三通阀相连通；所述的灌流液进液管、灌流液出液管均设于恒温机构内。进一步地，所述的消化酶液支路包括依次连通的消化酶液储罐、消化酶液进液管、消化酶液出液管；所述的消化酶液出液管与三通阀相连通；所述的消化酶液进液管、消化酶液出液管均设于恒温机构内。所述的灌流液储罐的底部出口与灌流液进液管的下端进口之间、消化酶液储罐的底部出口与消化酶液进液管的下端进口之间，分别设有连接软管，以便于灌流液储罐及消化酶液储罐的高度调节。进一步地，所述的灌流液进液管呈螺旋状绕设于灌流液出液管外；所述的消化酶液进液管呈螺旋状绕设于消化酶液出液管外。通过螺旋状设置的灌流液进液管及消化酶液进液管，以增加灌流液及消化酶液与恒温机构的接触面积，从而达到有效控温的效果。进一步地，所述的排气机构包括设于灌流液进液管与灌流液出液管之间的灌流液排气管、与灌流液排气管相连通的灌流液排空管、设于消化酶液进液管与消化酶液出液管之间的消化酶液排气管，以及与消化酶液排气管相连通的消化酶液排空管。作为优选的技术方案，所述的灌流液排空管与灌流液排气管的顶部相连通，所述的消化酶液排空管与消化酶液排气管的顶部相连通。作为优选的技术方案，所述的灌流液排空管的出口高度不低于灌流液储罐内的液面高度，所述的消化酶液排空管的出口高度不低于消化酶液储罐内的液面高度。进一步地，所述的灌流液排气管分别与灌流液进液管的上端及灌流液出液管的上端相连通；所述的消化酶液排气管分别与消化酶液进液管的上端及消化酶液出液管的上端相连通。流出进液管的灌流液或消化酶液经过排气管进入相应的出液管，并在排气管内保持一定的液面高度，灌流液或消化酶内裹挟的气泡自液面处破碎，并与管路内残留的空气一同从排空管中排出，从而避免气泡进入灌注主路影响实验。进一步地，所述的恒温机构包括恒温管，以及与恒温管循环连通的恒温水浴锅；所述的灌流液进液管、灌流液出液管、灌流液排气管、消化酶液进液管、消化酶液出液管、消化酶液排气管均设于恒温管内。所述的恒温管与恒温水浴锅之间设有循环换热管路，并通过循环换热管路使恒温管与恒温水浴锅内的换热介质循环流通，恒温管内的换热介质包裹于灌流液进液管、灌流液出液管、灌流液排气管、消化酶液进液管、消化酶液出液管、消化酶液排气管外，从而达到控制灌流液及消化酶液温度的效果。进一步地，所述的灌注主路包括依次连通的连接管、出液阀以及注射针头；所述的连接管与三通阀相连通；所述的注射针头下方设有实验瓶。进一步地，所述的实验瓶与消化酶液储罐之间设有循环蠕动泵；所述的循环蠕动泵与实验瓶及消化酶液储罐之间均设有循环软管，并分别通过循环软管相连通。工作原理：灌流液储罐或消化酶液储罐内的灌流液或消化酶液分别经过相应的连接软管进入螺旋状的灌流液进液管或消化酶液进液管内，并自下而上流动进入相应的排气管内，灌流液或消化酶液内裹挟的气泡将从该处逸出，并从排空管中排出，之后灌流液或消化酶经过相应的出液管后流动至三通阀处，并通过转动三通阀控制切换进入灌注主路的介质，进入灌注主路的介质经注射针头注入实验用心脏内，以进行后续的成年小动物心肌细胞分离实验。与现有技术相比，本专利技术具有以下特点：1)本专利技术整合两个螺旋进液管的水浴恒温器，使初始灌流液和消化酶液通过不同的螺旋管进入系统，最后通过转动接近实验用心脏处的双斜孔活塞，精准控制灌流液与消化酶液之间的切换时间；2)本专利技术可通过调整灌流液储罐与消化酶液储罐的高度或双斜孔活塞转动角度控制灌流速度，控制方法简便易于操作；3)本专利技术的循环蠕动泵可独立使用，有利于降低成本；4)本专利技术将用于加热灌流液支路、消化酶液支路等管路的加热装置集成于一个含有双螺旋管的恒温管中，不仅解决了溶液控温一致性的问题，而且避免了每个容器或管路都需要配制加热装置的麻烦，有利于降低装置成本、提高搭建装置的便捷性；5)本专利技术中的灌注主路结构简单，一方面使得加热用的恒温管距离实验用心脏较近，避免常规灌流装置中为保证控温问题而额外使用的灌流主路加热装置，另一方面有利于使灌注主路中的流程缩短，使得经过三通阀后的灌注液体可以直接快速地到达实验用心脏，避免管路中残留液体过多使溶液切换时间滞后影响实验准确性的问题，从而有利于实现精准快速的溶液切换效果；5)本专利技术中，流出进液管的灌流液或消化酶液经过排气管进入相应的出液管，排气管的直径大于进液管及出液管直径，使灌流液或消化酶液在排气管内保持一定的液面高度，并有助于灌流液或消化酶内裹挟的气泡自液面处破碎逸散，使其与管路内残留的空气一同从排空管中排出，从而避免因气泡进入灌注主路影响心肌细胞分离实验的问题。附图说明图1为本专利技术中一种成年小动物心肌细胞高效分离系统的结构示意图；图中标记说明：1-灌流液支路、101-灌流液储罐、102-灌流液进液管、103-灌流液出液管、2-消化酶液支路、201-消化酶液储罐、202-消化酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，其特征在于，该系统包括支撑架(9)，以及设于支撑架(9)上的灌流液支路(1)、消化酶液支路(2)、三通阀(10)、灌注主路(3)、排气机构(4)、恒温机构(5)；/n所述的灌流液支路(1)、消化酶液支路(2)通过三通阀(10)与灌注主路(3)相连通；/n所述的恒温机构(5)设于灌流液支路(1)、消化酶液支路(2)上，用于控制灌流液与消化酶液温度；/n所述的排气机构分别与灌流液支路(1)、消化酶液支路(2)相连通，用于排出灌流液支路(1)与消化酶液支路(2)内的气泡。/n

【技术特征摘要】
20200331 CN 20201024742961.一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，其特征在于，该系统包括支撑架(9)，以及设于支撑架(9)上的灌流液支路(1)、消化酶液支路(2)、三通阀(10)、灌注主路(3)、排气机构(4)、恒温机构(5)；
所述的灌流液支路(1)、消化酶液支路(2)通过三通阀(10)与灌注主路(3)相连通；
所述的恒温机构(5)设于灌流液支路(1)、消化酶液支路(2)上，用于控制灌流液与消化酶液温度；
所述的排气机构分别与灌流液支路(1)、消化酶液支路(2)相连通，用于排出灌流液支路(1)与消化酶液支路(2)内的气泡。


2.根据权利要求1所述的一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，其特征在于，所述的三通阀(10)为双斜孔活塞。


3.根据权利要求1所述的一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，其特征在于，所述的灌流液支路(1)包括依次连通的灌流液储罐(101)、灌流液进液管(102)、灌流液出液管(103)；
所述的灌流液出液管(103)与三通阀(10)相连通；
所述的灌流液进液管(102)、灌流液出液管(103)均设于恒温机构(5)内。


4.根据权利要求3所述的一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，其特征在于，所述的消化酶液支路(2)包括依次连通的消化酶液储罐(201)、消化酶液进液管(202)、消化酶液出液管(203)；
所述的消化酶液出液管(203)与三通阀(10)相连通；
所述的消化酶液进液管(202)、消化酶液出液管(203)均设于恒温机构(5)内。


5.根据权利要求4所述的一种成年小动物心肌细胞高效分离系统，其特征在于，
所述的灌流液进液管(102)呈螺旋状绕设于灌流液出液管(103)外，
所述的消化酶液进液管(202)呈螺旋状绕设于消化酶液出液管(203)外...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚国华，秦媛，高萌，李安琪，
申请(专利权)人：同济大学，
类型：发明
国别省市：上海;31