【技术实现步骤摘要】
一种单克隆抗体、其制备方法及用途
本专利技术属于免疫学、分子生物学领域,涉及一种抗猪瘟病毒E2的单克隆抗体、其制备方法及用途。
技术介绍
猪瘟(ClassicalSwinefever,CSF)是由猪瘟病毒(CSFvirus,CSFV)感染家猪和野猪引起的一种急性、热性和高度接触传染的病毒性传染病,其特征为发病急、高热稽留和细小血管变性,引发全身泛发型小点出血,脾梗死。不同品种、性别、年龄的猪均易感,猪瘟是严重危害养猪业的重大传染病。猪瘟的病原体猪瘟病毒属于黄病毒科、瘟病毒属,同属的成员还包括牛病毒性腹泻病毒、羊边界病病毒等。猪瘟病毒基因组是长度约12.3kb的单股正链RNA,包含两端的非编码区(untranslatedregion,UTR)和中间一个大的开放阅读框(openreadingframe,ORF),ORF编码一个大的多聚蛋白,该多聚蛋白经宿主细胞和病毒编码的蛋白酶水解加工产生具有功能的成熟蛋白,包括4种结构蛋白(Core、Erns、E1和E2)和8种非结构蛋白(Npro、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)。其中,结构蛋白E2是最主要的免疫原性蛋白,诱导机体产生中和抗体并且能够保护猪抵抗猪瘟病毒强毒株的攻击,也是猪瘟基因工程疫苗研发的重要靶蛋白。我国对猪瘟防控非常重视,2017年3月21日,农业农村部印发《国家猪瘟防治指导意见(2017-2020年)》,对猪场猪瘟的净化提出明确要求,截止2020年底,全国所有种猪场和部分区域达到猪瘟净化标准,并进一步扩大猪瘟净化区域范围。免 ...
【技术保护点】
1.一种抗猪瘟病毒E2单克隆抗体或其抗原结合片段,包括重链可变区和轻链可变区,重链可变区和轻链可变区均由决定簇互补区和框架区组成,重链可变区和轻链可变区的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成,其特征在于:重链可变区的CDR1的氨基酸序列如序列1所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;重链可变区的CDR2的氨基酸序列如序列2所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;重链可变区的CDR3的氨基酸序列如序列3所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如序列4所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如序列5所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如序列6所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;/n所述抗原结合片段选自Fab,Fab′,F(ab′)2,Fv,Fab/c,单链抗体或双价抗体。/n
【技术特征摘要】
1.一种抗猪瘟病毒E2单克隆抗体或其抗原结合片段,包括重链可变区和轻链可变区,重链可变区和轻链可变区均由决定簇互补区和框架区组成,重链可变区和轻链可变区的决定簇互补区均由CDR1、CDR2和CDR3组成,其特征在于:重链可变区的CDR1的氨基酸序列如序列1所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;重链可变区的CDR2的氨基酸序列如序列2所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;重链可变区的CDR3的氨基酸序列如序列3所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;轻链可变区的CDR1的氨基酸序列如序列4所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;轻链可变区的CDR2的氨基酸序列如序列5所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;轻链可变区的CDR3的氨基酸序列如序列6所示或与其具有至少80%同源性的氨基酸序列;
所述抗原结合片段选自Fab,Fab′,F(ab′)2,Fv,Fab/c,单链抗体或双价抗体。
2.根据权利要求1所述的抗猪瘟病毒E2单克隆抗体或其抗原结合片段,其中所述抗猪瘟病毒E2单克隆抗体包括:
1)重链可变区,其由下述序列组成:
序列7所示的氨基酸序列,或与序列7所示的序列具有大于等于93%-小于100%序列同一性的序列;
2)轻链可变区,其由下述序列组成:
序列8所示的氨基酸序列,或与序列8所示的序列具有大于等于93%-小于100%序列同一性的序列。
3.编码权利要求1或2所述的抗猪瘟病毒E2单克隆抗体或其抗原结合片段的核酸分子;
优选的,编码重链可变区的CDR1的核酸分子序列如序列11所示,编码重链可变区的CDR2的核酸分子序列如序列12所示,编码重链可变区的CDR3的核酸分子序列如序列13所示,编码轻链可变区的CDR1的核酸分子序列如序列14所示,编码轻链可变区的CDR2的核酸分子序列如序列15所示,编码轻链可变区的CDR3的核酸分子序列如序列16所示;
更优选的,所述抗猪瘟病毒E2单克隆抗体或其抗原结合片段的重链可变区编码的核酸分子如序列9所示,轻链可变区编码的核酸分子如序列10所示。
4.一种重组载体,其...
【专利技术属性】
技术研发人员:李玲,董春娜,吴冬荀,张艳宾,张蕾,张彤,李静,刘新月,肖进,齐鹏,
申请(专利权)人:中牧实业股份有限公司,
类型:发明
国别省市:北京;11
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