用于检测自体血液回输的方法技术

本发明专利技术涉及鉴定可用于检测自体血液回输的方法中的肽和相对应的蛋白质。更具体地说，本发明专利技术涉及包含以下的方法：对分离的红细胞(RBC)样本、尤其是分离的RBC胞质溶胶进行胰蛋白酶消化，随后使用液相色谱‑串联质谱法(LC‑MS/MS)进行肽图分析。与来自未经回输的对照受试者的样本相比，根据本发明专利技术的方法能够检测来自已经进行自体血液回输的受试者的样本中某些肽水平的升高。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测自体血液回输的方法
本专利技术涉及鉴定可用于检测自体血液回输的方法中的肽和相对应的蛋白质。更具体地说，本专利技术涉及包含以下的方法：对分离的红细胞(RBC)样本、尤其是分离的RBC胞质溶胶样本进行胰蛋白酶消化，随后使用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行肽图分析。与来自未经回输的对照受试者的样本相比，这些方法能够检测来自已经进行自体血液回输的受试者的样本中某些肽水平的升高。
技术介绍
在耐力体育运动中，最大摄氧量(VO2max)是影响运动能力的重要因素[Ekblom等人，“动脉氧含量的变化对循环和身体运动能力的作用(Effectofchangesinarterialoxygencontentoncirculationandphysicalperformance)”，《应用生理学杂志(JApplPhysiol)》，1975；39(1)：71-5；Carlsson等人，“在不同强度和子技术下的摄氧量预测优秀男子越野滑雪运动员的短跑运动表现(Oxygenuptakeatdifferentintensitiesandsub-techniquespredictssprintperformanceinelitemalecross-countryskiers)”，《欧洲应用生理学杂志(EurJApplPhysiol)》，2014；114(12)：2587-95]。假设肺功能和海平面氧张力正常，VO2max的限制因素是最大心输出量(Qmax)[Grimby等人，“现役中龄运动员在进行亚极量运动和极量运动期间的心输出量(Cardiacoutputduringsubmaximalandmaximalexerciseinactivemiddle-agedathletes)”，《应用生理学杂志》，1966；21(4)：1150-6。]、血液中的携氧能力[Ekblom等人，“静脉切开放血且红细胞再输注后运动期间的中枢循环(Centralcirculationduringexerciseaftervenesectionandreinfusionofredbloodcells)”，《应用生理学杂志》，1976；40(3)：379-83；Buick等人，“促红细胞增多症对有氧工作能力的作用(Effectofinducederythrocythemiaonaerobicworkcapacity)”，《应用生理学杂志：呼吸，环境和运动生理学(JApplPhysiolRespEnvironExercPhysiol)》，1980；48(4)：636-42]和总血红蛋白量[Schmidt和Pommer，“总血红蛋白量的改变对VO2max的影响(ImpactofalterationsintotalhemoglobinmassonVO2max)”，《锻炼与运动医学评论(ExercSportSciRev)》，2010；38(2)：68-75。]。向工作肌肉提取有效氧也是一个影响因素，至少在优秀运动员中是如此[Bangsbo等人，“人体剧烈动态运动开始时的肌肉氧动力学(Muscleoxygenkineticsatonsetofintensedynamicexerciseinhumans)”，《美国生理学杂志：调节、整合与比较生理学(AmJPhysiolRegulIntegrCompPhysiol)》，2000；279(3)：R899-906]。取决于所进行的工作的方式和持续时间以及测试的方式，据发现VO2max对身体运动能力的影响范围为62％至88％(在越野滑雪中)[Carlsson等人，同上]和42％至79％(在消防中)[Lindberg等人，“评估消防员有氧工作能力的现场试验(Fieldtestsforevaluatingtheaerobicworkcapacityoffirefighters.)”，《公共科学图书馆：综合(PloSOne)》，2013；8(7)：e68047]。类似的模式以前就已在跑步[Tanaka和Matsuura，“某些人体测量学和生理学属性在远距离跑步中的作用的多元分析(Amultivariateanalysisoftheroleofcertainanthropometricandphysiologicalattributesindistancerunning)”，《人类生物学年鉴(AnnHumBiol)》，1982；9(5)：473-82；Farrell等人，“血浆乳酸积累和远距离跑步运动表现(Plasmalactateaccumulationanddistancerunningperformance)”，《运动医学和科学(MedSciSports)》，1979；11(4)：338-44.]、定向越野[Knowlton等人，“美国锦标赛级定向越野运动员的生理和运动表现特征(PhysiologicalandperformancecharacteristicsofUnitedStateschampionshipclassorienteers)”，《运动训练医学和科学(MedSciSportsExerc)》，1980；12(3)：164-9]、骑自行车[Lamberts和Davidowitz，“类比法以及预测经训练(有素)的女性骑自行车者的骑自行车的运动表现(Allometricscalingandpredictingcyclingperformancein(well-)trainedfemalecyclists)”，《国际运动医学杂志(IntJSportsMed)》，2014；35(3)：217-22；Coyle等人，“与具有优秀耐力的骑自行车运动表现有关的生理学和生物力学因素(Physiologicalandbiomechanicalfactorsassociatedwitheliteendurancecyclingperformance)”，《运动训练医学和科学》，1991；23(1)：93-107]、游泳[Chatard等人，“自由泳运动员的游泳技术和划水特征(Swimmingskillandstrokingcharacteristicsoffrontcrawlswimmers.)”，《国际运动医学杂志》，1990；11(2)：156-61；Duche等人，“从人体测量和生物能特征所评估的青春期前游泳者的运动表现的分析(Analysisofperformanceofprepubertalswimmersassessedfromanthropometricandbio-energeticcharacteristics)”，《欧洲应用生理学与职业生理学杂志(EurJApplPhysiolOccupPhysiol)》，1993；66(5)：467-71]和三项全能运动[Barrero等人，“超耐力三项全能运动期间与测试和运动表现有关的强度分布(Intensityprofileduringanultra-endurancetriathloninrelationtotestingandperformance)”，《国际运动医学杂志》，2014；35(14)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测受试者的自体血液回输的方法，所述方法包含以下步骤：/ni)基于来自所述受试者的血液样本中的一种或多种特异性肽的水平与来自参考血液样本的相同特异性肽的水平相比之间的差异，鉴定所述受试者是否已进行或尚未进行自体血液回输，此类水平已通过生成所述血液样本和所述参考血液样本中的每个的蛋白水解肽图来确定。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180301 SE 1830069-91.一种用于检测受试者的自体血液回输的方法，所述方法包含以下步骤：
i)基于来自所述受试者的血液样本中的一种或多种特异性肽的水平与来自参考血液样本的相同特异性肽的水平相比之间的差异，鉴定所述受试者是否已进行或尚未进行自体血液回输，此类水平已通过生成所述血液样本和所述参考血液样本中的每个的蛋白水解肽图来确定。


2.根据权利要求1所述的方法，其还包含在步骤(i)之前执行以下步骤中的一个或多个：
x)确定从所述受试者获得的血液样本中的一种或多种特异性肽的水平；
y)确定参考血液样本中的一种或多种特异性肽的水平；
z)确定所述一种或多种特异性肽的水平与参考血液样本中相同特异性肽的水平相比的任何差异。


3.根据权利要求1或2中任一项所述的方法，所述方法包含以下步骤：
a)生成从所述受试者获得的血液样本的蛋白水解肽图；
b)确定在步骤a)中获得的所述肽图中所鉴定的一种或多种特异性肽的水平；
c)确定所述一种或多种特异性肽的水平与从参考血液样本所获得的参考肽图中的相同特异性肽的水平相比的差异；以及
d)基于所述特异性肽的水平与所述参考肽图中的相同特异性肽的水平相比的差异，鉴定所述受试者是否已经或尚未进行自体血液回输。


4.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述参考血液样本来自未经回输的受试者。


5.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述一种或多种特异性肽是衍生自表3中列出的一种或多种蛋白质的一种或多种肽。


6.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述一种或多种特异性肽是选自包含SEQIDNo:1-78的肽的清单中的一种或多种肽。


7.根据任一前述权利要求所述的方法，其中所述一种或多种特异性肽是选自包含SEQIDNo:1-78的肽的所述清单中的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77或78种肽。


8.根据任一前述权利要求所述的方法，其中待分析的所述血液样本是由从待测试的所述受试者获得的血液样本所制备的分离的红细胞样本。


9.根据任一前述权利要求所述的方法，其中待分析的所述血液样本是由从待测试的所...

【专利技术属性】
技术研发人员：C·马尔姆，N·邱，I·格兰隆德，P·林登，M·哈尔，R·瓦格纳，
申请(专利权)人：专业测试诊断公司，
类型：发明
国别省市：瑞典;SE