乙型肝炎免疫方案和组合物制造技术

本发明专利技术涉及可用于治疗慢性乙型肝炎的免疫方案中的免疫原性组合物及其组合产品。免疫原性组合物包含复制缺陷的黑猩猩腺病毒(ChAd)载体，所述复制缺陷的黑猩猩腺病毒(ChAd)载体包含编码HBs、HBc、与HBc融合的人恒定链(hIi)的多核苷酸。另一种免疫原性组合物包含修饰的牛痘病毒安卡拉(MVA)载体，所述修饰的牛痘病毒安卡拉(MVA)载体包含编码HBs和HBc的多核苷酸。另一种免疫原性组合物包含重组HBs、C‑末端截短的重组HBc和含有MPL和QS‑21的佐剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】乙型肝炎免疫方案和组合物专利
本专利技术涉及可用于治疗慢性乙型肝炎的免疫方案中的新型组合物。专利技术背景乙型肝炎病毒(HBV)感染是主要的公共卫生问题。全球近似2.57亿人被HBV感染[WHO,2017]。HBV感染的临床过程和结果在很大程度上取决于感染时的年龄以及病毒和宿主免疫应答之间复杂的相互作用[Ott,2012;Maini,2016]。因此，暴露于HBV可能导致急性肝炎，其自行解决或可能进展为各种形式的慢性感染，包括非活动性乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者状态、慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌(HCC)[Liaw,2009]。成年群体中HBsAg的流行率>2%，其中东南亚和中国的比率为5-8%，且非洲地区的比率为>8%。15-40%的具有慢性乙型肝炎感染的人(定义为检测到超过6个月的血清HBsAg)将发展肝脏后遗症，其中肝硬化(LC)、肝代偿不全和HCC是主要并发症。尽管在婴儿中实施普遍的预防性乙型肝炎免疫已经高度有效地降低许多流行国家中的乙型肝炎的发病率和流行率，但其尚未导致青少年和成人中的慢性乙型肝炎感染(CHB)的流行率的强烈降低，并且不预期其影响HBV相关的死亡，直到引入后数十年。在2015年，乙型肝炎导致887,000例死亡，主要死于肝硬化和肝癌[WHO,2017]。慢性乙型肝炎的临床管理旨在通过预防疾病进展并因此预防HCC发展来改善生存率和生活质量[Liaw,2013]。当前的治疗策略主要基于长期抑制HBVDNA复制，以实现HBV诱导的肝病的稳定并预防进展。血清HBVDNA水平是所有当前治疗方式的基石终点。实现(可检测的)乙型肝炎e-抗原(HBeAg)的丧失是另一种有价值的生物标志物，然而无论是否存在抗HBs血清转化，HBsAg丧失通常被认为是代表“功能性治愈”的最佳终点，因为它表明HBV复制和病毒蛋白表达的深刻抑制[Block,2017;Cornberg,2017]。目前，对于CHB患者存在两种主要的治疗选项：通过聚乙二醇化干扰素α(PegIFNα)或通过核苷(核苷酸)类似物(NA)[EASL,2017]。目的在于用有限持续时间治疗诱导长期免疫控制的PegIFNα可以实现持续的治疗外控制(off-treatmentcontrol)，但持久的病毒学应答和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)丢失限于小部分的患者。此外，由于其耐受性差和长期安全性担忧，显著量的患者不适合进行这种类型的治疗。NA通过经由抑制HBV聚合酶逆转录酶活性来抑制DNA复制而起作用。在欧洲获准用于HBV治疗的NAs包括恩替卡韦(ETV)、富马酸替诺福韦二吡呋酯(TDF)和替诺福韦艾拉酚胺(TAF)(其与针对HBV抗性的高屏障相关)，以及拉米夫定(LAM)、阿德福韦酯(adefovirdipivoxil)(ADV)和替比夫定(TBV)(其与针对HBV抗性的低屏障相关)。用具有对抗性的高屏障的有效NA进行治疗的主要优势是其可预测的长期高抗病毒效力(导致绝大多数顺应性患者中的HBVDNA抑制)以及其有利安全性概况。NA治疗的缺点是其长期治疗方案，因为NA通常没有实现HBV根除，并且NA停用可以导致HBV复发[Kranidioti,2015]。代表功能性治愈的HBsAg丢失现在是CHB中的金标准治疗终点[Block,2017;Cornberg,2017]，然而，其很少用NA治疗实现[Zoutendijk,2011]。由于HBsAg血清清除率低[Zoutendijk,2011]和NA外病毒复发的风险高[Kranidioti,2015]，大多数患者被维持在长期或甚至无限NA疗法下，这可能与患者对疗法的顺从性降低、财务成本的增加以及长期暴露后药物毒性和耐药性突变的风险增加相关[Terrault,2015]。因此，新的策略对于补充NA疗法以实现用有限方案的“功能性治愈”是必要的。目前正在探索的新的治疗策略包括新的抗病毒策略以及加强HBV-特异性适应性免疫应答或活化先天性肝内免疫力的新型免疫治疗策略[Durantel,2016]。迄今为止，这些实验治疗无一显示有效。在所评估的接种疫苗策略中，无一能够诱导对HBV核心抗原(HBcAg)的稳健的多功能CD8+T-细胞应答，这对于恢复对该病毒的免疫控制是至关重要的[Lau,2002;Li,2011;Liang,2011;Bertoletti,2012;Boni,2012]。关于基于HBV表面和/或PreS抗原的重组疫苗的早期努力初步诱导抗体应答，但没有HBV特异性CD8+T-细胞应答，其中没有临床或病毒学益处[Jung,2002;Vandepapelière,2007]。表达HBV包膜的DNA疫苗无法恢复对HBsAg和HBcAg特异性的T细胞应答，因此并不降低NA停用后患者中复发的风险[Fontaine,2015]。用新的递送系统，编码S、preS1/S2的DNA疫苗(引发疫苗)和MVA病毒载体疫苗(加强疫苗)没有显示T细胞诱导或病毒血症的降低，表明单独的HBVPreS和表面抗原不足以治愈患者[Cavenaugh,2011]。更近来，已经研究了靶向多种HBV抗原的疫苗策略和新的递送系统。重组HBsAg/HBcAg疫苗导致仅一半患者中的病毒载量降低到非常低的水平(即~50IU/ml)[Al-Mahtab,2013]。编码S、preS1/S2、核心、聚合酶和X蛋白的DNA疫苗与遗传佐剂化的IL-12连同拉米夫定一起在一半患者中诱导多特异性T细胞应答以及病毒载量的>2log10降低。然而，在任何患者中均未观察到HBsAg的定量检测的变化，HBsAg的丧失或HBsAg血清转化[Yang,2012]。GS-4774疫苗，一种基于酵母的表达HBV的大S、核心和X蛋白的T细胞疫苗，在病毒抑制的CHB患者中没有提供HBsAg的显著降低[Lok,2016]。仍然存在对可以清除HBsAg以允许患者安全地中止NA治疗而没有病毒学或临床复发的治疗的未满足需求。专利技术概述提供了免疫原性组合物，其包含复制缺陷的黑猩猩腺病毒(ChAd)载体，所述复制缺陷的黑猩猩腺病毒(ChAd)载体包含编码乙型肝炎表面抗原(HBs)的多核苷酸、编码乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的核酸和编码与所述HBc融合的人恒定链(hIi)的核酸。所述组合物可用于通过在引发-加强方案中施用所述组合物与至少一种其他免疫原性组合物来治疗慢性乙型肝炎的方法中。在一个进一步方面，提供了免疫原性组合物，其包含修饰的牛痘病毒安卡拉(MVA)载体，所述修饰的牛痘病毒安卡拉(MVA)载体包含编码乙型肝炎表面抗原(HBs)的多核苷酸和编码乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的核酸。所述组合物可用于通过在引发-加强方案中施用所述组合物与至少一种其他免疫原性组合物来治疗慢性乙型肝炎的方法中。在一个进一步方面，提供了免疫原性组合物，其包含重组乙型肝炎表面抗原(HBs)、C-末端截短的重组乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)和含有MPL(3D单磷酰脂质A)和QS-21(从皂树(Quillajasapnoaria)的树皮纯化的三萜糖苷)的佐剂。所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.免疫原性组合物，其包含复制缺陷的黑猩猩腺病毒(ChAd)载体，所述复制缺陷的黑猩猩腺病毒(ChAd)载体包含编码乙型肝炎表面抗原(HBs)的多核苷酸、编码乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的多核苷酸和编码与所述HBc融合的人恒定链(hIi)的多核苷酸。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171215 GB 1721069.11.免疫原性组合物，其包含复制缺陷的黑猩猩腺病毒(ChAd)载体，所述复制缺陷的黑猩猩腺病毒(ChAd)载体包含编码乙型肝炎表面抗原(HBs)的多核苷酸、编码乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的多核苷酸和编码与所述HBc融合的人恒定链(hIi)的多核苷酸。


2.根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其中所述ChAd载体选自ChAd3、ChAd63、ChAd83、ChAd155、ChAd157、Pan5、Pan6、Pan7和Pan9。


3.根据权利要求1或权利要求2所述的免疫原性组合物，其中所述ChAd载体是ChAd155，且包含编码hIi、HBc、2A和HBs的多核苷酸。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的免疫原性组合物，其中所述载体包含与编码hIi的多核苷酸融合的编码HBc的多核苷酸和编码HBs的多核苷酸，所述HBc包含SEQIDNO:11或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列，所述hIi包含SEQIDNO:7或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列或SEQIDNO:12或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列，所述HBs包含SEQIDNO:1或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列，其中编码hII-HBc和HBs的多核苷酸被编码包含SEQIDNO:3的氨基酸序列或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列的多核苷酸隔开，所述SEQIDNO:3的氨基酸序列或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列并入口蹄疫病毒的2A切割区域。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫原性组合物，其中所述载体包含编码SEQIDNO:9的氨基酸序列的多核苷酸或编码SEQIDNO.15的氨基酸序列的多核苷酸。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的免疫原性组合物，其中所述载体包含SEQIDNO:10中给出的多核苷酸序列或SEQIDNO:14中给出的多核苷酸序列。


7.免疫原性组合物，其包含修饰的牛痘病毒安卡拉(MVA)载体，所述修饰的牛痘病毒安卡拉(MVA)载体包含编码乙型肝炎表面抗原(HBs)的多核苷酸和编码乙型肝炎病毒核心抗原(HBc)的多核苷酸。


8.根据权利要求7所述的免疫原性组合物，其中编码HBs和HBc的多核苷酸被编码口蹄疫病毒(FMDV)的2A切割区域的多核苷酸隔开。


9.根据权利要求7或权利要求8所述的免疫原性组合物，其中所述载体包含编码HBc和HBs的多核苷酸，所述HBc包含SEQIDNO:11或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列，且所述HBs包含SEQIDNO:1或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列，其中编码HBc和HBs的多核苷酸被编码包含SEQIDNO:3的氨基酸序列或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列的多核苷酸隔开，所述SEQIDNO:3的氨基酸序列或与其具有至少98%同源性的氨基酸序列并入口蹄疫病毒的2A切割区域...

【专利技术属性】
技术研发人员：V阿门多拉，B巴亚特，C洛林，VB瓦西莱夫，A维特利，
申请(专利权)人：葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE