甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，尤其为甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法，包括以下步骤：A、选定实验材料；B、制定实验方法；C、观察实验结果；D、得出实验结论。本发明专利技术提供甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的新用途，尤其涉及甲磺酸萘莫司他制备治疗衣原体生殖道感染的药物方面的应用，以及甲磺酸萘莫司他在制备预防由衣原体生殖道感染引起的输卵管梗阻、输卵管积水、输卵管性不孕的药物方面的应用，而且通过体外细胞实验、动物实验等多个方面证明了甲磺酸萘莫司他可有效地治疗衣原体生殖道感染，进而可用于防治输卵管性不孕疾病。

【技术实现步骤摘要】
甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法
本专利技术涉及生物医药
，具体为甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法。
技术介绍
衣原体(Chlamydia)是一组极小的，非运动性的，专在细胞内生长的微生物，由其导致的泌尿生殖道感染是全球范围内最常见性传播疾病，根据WHO的统计，全球每年新增患者约1.272亿人[1]。由于衣原体感染的临床表现无特异性，特别是女性感染者中，无症状者约占总体的80％，因此在临床诊断中常易漏诊。患者如果未得到及时的诊断和治疗，则易发展为慢性、持续性感染，造成生殖道组织的损伤、粘连及瘢痕形成，继而引起如输卵管性不孕、盆腔炎、异位妊娠等诸多并发症[2-4]，严重影响女性生殖健康。除此之外，生殖道衣原体感染还增加了宫颈癌与艾滋病的患病风险[5,6]，给家庭和社会带来沉重负担。目前，根据WHO推荐的衣原体生殖道感染诊治共识，阿奇霉素和多西环素是作为治疗衣原体生殖道感染的一线用药，虽然大多数衣原体生殖道感染可被抗生素疗法治愈，但近年来由于多重耐药型衣原体的出现，抗生素治疗失败的报道逐渐增加[7,8]。由于广谱抗生素的广泛使用以及诊治过程中经验性治疗的普遍应用，未来可能出现更多的多重耐药型衣原体[9]。因此，在有效的衣原体疫苗出现之前，寻找其他能够治疗衣原体生殖道感染、预防输卵管病理损伤发生的有效药物是当务之急。甲磺酸萘莫司他(CAS：82956-11-4)是人工合成的丝氨酸蛋白酶抑制剂，已被FDA批准用于：胰腺炎急性症状的改善、弥散性血管内凝血(DIC)患者的治疗、出血性或有出血倾向的患者进行血液体外循环时的抗凝[10,11]。药理研究显示，甲磺酸萘莫司他对胰蛋白酶、凝血酶、血管舒缓素、血纤维蛋白酶、纤维蛋白酶、活性凝血因子(XIIa、Xa、VIIa)以及补体系统经典途径的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶具有很强的选择性抑制作用。近年研究表明，该化合物还可用于治疗其他领域的疾病：该化合物可通过其抗炎作用减轻炎症因子诱导的肺损伤[12]；可用于肾、脑等器官缺血再灌注损伤的治疗[13]；可通过下调NF-κB通路抑制胰腺癌[14]、结直肠癌[15]的生长；可通过下调Smad2-TGFβ通路抑制三阴性乳腺癌的生长[16]；可用于治疗由衣原体诱发的反应性关节炎[17]。目前关于甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染以及预防输卵管梗阻、输卵管积水、输卵管不孕等并发症的应用，尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法，具备提供甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的新用途的优点，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法，包括以下步骤：A、选定实验材料；B、制定实验方法；C、观察实验结果；D、得出实验结论。优选的，所述步骤A中实验材料包括菌株、动物、细胞、主要试剂中的任意若干种。优选的，所述步骤B中实验方法具体分为三种，①甲磺酸萘莫司他对衣原体感染生殖道上皮细胞的抑制作用；②甲磺酸萘莫司他对衣原体感染小鼠生殖道的影响；③阴道灌注甲磺酸萘莫司他对衣原体感染小鼠上、下生殖道细胞因子的影响。与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：1、首次将甲磺酸萘莫司他用于治疗衣原体生殖道感染；2、由于传统抗生素的广泛使用，部分种系的衣原体产生突变耐药性，传统抗生素疗法存在治疗失败的风险，而本技术方案尚未作为抗生素在临床上使用，耐药性低，可代替传统抗生素方案来治疗衣原体急性期感染；3、为治疗衣原体急性感染提供了一个新的用药途径，即阴道局部用药，该用药途径与传统的全身性抗生素治疗相比有以下几方面的优势：①阴道局部用药的方式提高了病灶局部的药物浓度，药物更加直接地作用于衣原体与被衣原体感染的靶细胞；②阴道局部用药的方式减少了药物对于其他器官的影响，减轻了肝、肾等器官的代谢负担；③阴道局部用药的方式还减少由于抗生素全身用药后菌群失调的发生。附图说明图1为本专利技术甲磺酸萘莫司他对衣原体包涵体生长情况的影响图；(注：上图为明场和红色荧光的融合图像，明场中为HeLa229细胞，红色荧光为衣原体包涵体)图2为本专利技术甲磺酸萘莫司他对衣原体包涵体数量的影响图；(注：**P<0.01***P<0.001，共计3次独立实验，每次实验中不同浓度均设置复孔)图3为本专利技术甲磺酸萘莫司他对衣原体包涵体直径的影响图；(注：***P<0.001，共计3次独立实验，每次实验中不同浓度均设置复孔)图4为本专利技术不同组小鼠感染衣原体后阴道载菌量随时间的变化图；(注：*P<0.05**P<0.01***P<0.001，n＝5-7)图5为本专利技术甲磺酸萘莫司他对感染后小鼠上、下生殖道细胞因子的影响图；(注：*P<0.05n＝5)图6为本专利技术甲磺酸萘莫司他的结构式；图7为本专利技术方法流程示意图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。请参阅图1-7，甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法，包括以下步骤：A、选定实验材料；B、制定实验方法；C、观察实验结果；D、得出实验结论。所述步骤A中实验材料包括菌株、动物、细胞、主要试剂中的任意若干种。所述步骤B中实验方法具体分为三种，①甲磺酸萘莫司他对衣原体感染生殖道上皮细胞的抑制作用；②甲磺酸萘莫司他对衣原体感染小鼠生殖道的影响；③阴道灌注甲磺酸萘莫司他对衣原体感染小鼠上、下生殖道细胞因子的影响。实施例一：甲磺酸萘莫司他对衣原体感染生殖道上皮细胞的抑制作用1.实验材料菌株与细胞：鼠衣原体(Chlamydiamuridarum，Cm)Cm-mCherry荧光株，由本实验室构建，常规传代、纯化、保存，该荧光株在野生型Cm的质粒中导入红色荧光蛋白mCherry基因，菌株自带荧光，无需固定和抗体孵育，感染细胞后可活体下进行荧光观察。HeLa229细胞购自美国菌种典藏中心(ATCC)，由本实验室常规传代、保存；主要试剂：甲磺酸萘莫司他购自美国Abcam公司，高糖DMEM培养基、胰酶购自美国Hyclone公司；胎牛血清购自美国Gibco公司；放线菌酮、庆大霉素、DEAE-葡聚糖购自美国Sigma-Aldrich公司；蔗糖、KH2PO4、K2HPO4、L-谷氨酸购自中国国药集团化学试剂有限公司。蔗糖-磷酸-谷氨酸缓冲液(SPG缓冲液)配置：将蔗糖37.31g，KH2PO40.2558本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法，其特征在于：包括以下步骤：/nA、选定实验材料；/nB、制定实验方法；/nC、观察实验结果；/nD、得出实验结论。/n

【技术特征摘要】
1.甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法，其特征在于：包括以下步骤：
A、选定实验材料；
B、制定实验方法；
C、观察实验结果；
D、得出实验结论。


2.根据权利要求1所述的甲磺酸萘莫司他在治疗衣原体生殖道感染的应用方法，其特征在于：所述步骤A中实验材料包括菌株、动物、细胞、主要试剂中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建林，彭亮，张宏波，沈宏伟，唐玲丽，胡紫昊，赵宇婕，刘珊珊，鲁琼，
申请(专利权)人：中南大学湘雅二医院，
类型：发明
国别省市：湖南;43