糖类的分析法及其装置制造方法及图纸

本发明专利技术糖类分析法是把含糖类试样装在用含反应试剂氨基酸与硼酸之流动相的液相色谱仪装置中进行洗提，为热所得洗提液，使反应试剂与糖类反应后再冷却，通过对生成的反应液照射激发光测荧光谱或照射紫外线测吸光度来分析糖类；所用装置按顺序连结流动相容器，流动相输液泵，试样注入部与分离柱组成之液相色谱仪，反应部，冷却部，荧光光谱测定部和（或）紫外线吸光度测定部；这样的分析简便．成本低，精度高，再现性好．（*该技术在2005年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是关于糖类的分析法及其装置。本专利技术的专利技术人已经在特开昭58-216953号公报上公开发表过糖类的分析法及其装置。即将含有糖类的试样装入液体色谱仪中，对所得到的洗提液，添加由含碱性氨基酸的硼酸水溶液组成的反应试剂，进行加热反应后冷却，通过照射激发光测定荧光光谱或照射紫外线测定吸光光谱分析糖类的方法，以及对液体色谱仪装置本体，从其柱洗提液流路开始安装反应液流路，并将添加碱性氨基酸的硼酸水溶液的供给流路与此流路连结，接着按顺序附设加热部与冷却部以及荧光光谱测定部与(或)紫外线吸光光谱测定部，在上述的分析技术中，是由含有碱性氨基酸的硼酸水溶液组成的反应试剂加入洗提液进行反应，而洗提液是把含有糖类的试样装在液体色谱装置中洗提得到的，因此必须安装一条供给流路，以便将上述反应试剂添加到洗提液中，而且反应试剂与洗提液的混合不充分，于是所得到的色谱图有时会产生杂音或漂移。本专利技术的目的，就是为了改良原来的分析法及其装置，并简化原来的分析法及其装置，提供能进行精度高、再现性好的分析糖类的分析法及其装置。本专利技术是将含有糖类的试样，装在使用含反应试剂氨基酸与硼酸的流动相的液体色谱仪装置中进行洗提，加热所得到的洗提液，使反应试剂与糖类进行反应后冷却，通过对生成的反应液照射激发光测定荧光光谱或照射紫外线测定吸光光谱，分析糖类的糖类分析法，以及实施这种分析法直接使用的分析装置。提供按顺序连结装有反应试剂氨基酸与硼酸的流动相容器、流动相输液泵、由试样注入部与分离柱组成的液体色谱仪装置、装有加热槽的反应部、冷却部与荧光光谱测定部以及(或)紫外线吸收光谱测定部的糖类分析装置。本专利技术的专利技术人，发现即使在流动相中混合反应试剂，对分离柱中糖类的分离也没有什么坏影响，从而完成了本专利技术的分析法。其优点是由于反应试剂混合到流动相中，因此不会象先有技术那样，因洗提液与反应试剂混合而引起色谱仪的杂音与漂移，而且还可不安装供给反应试剂的流路。本专利技术所用的氨基酸有精氨酸、赖氨酸、组氨酸等。流动相是含0.01～5%浓度的氨基酸与0.05～0.5M硼酸的水溶液，用氢氧化钾把PH调整到7～10。含有糖类的试料使用上述流动相，利用通常使用的Shim-pack ISA-07/s2504(岛津制作所制)的分离柱进行洗提。洗提是在室温～70℃下进行的。接着，将所得的洗提液加热，让糖类与上述的反应试剂进行反应。这一反应最好在140～180℃温度下在3～5分钟内进行，生成的反应液冷却至室温并把它导入荧光光度计与(或)紫外线吸光光度计，通过测定荧光光谱与(或)吸光光谱，定性与(或)定量地分析糖类。另一方面，本专利技术的分析装置主要构成的特点是因如前所述反应试剂含在流动相中，若与先有技术的装置相比，特别简化的是不必装设反应试剂的供给流路。而且本专利技术是连续式和单程式的，能够进行快速分析，并可完全自动化。利用本专利技术的分析法及其装置分析的糖类有葡萄糖、甘露糖、半乳糖、果糖、鼠李糖等单糖;麦芽糖、乳糖、麦芽三糖等低聚多糖;葡糖胺、半乳糖胺等氨基酸糖;葡糖醛酸、半乳糖醛酸等糖醛酸。这些糖类都能使用。特别象生物试样，利用这些糖类，最适于分析含微量或多成分的试样。实施例根据下图所示的实施例来说明本专利技术，但并不限制本专利技术。第1图所示系本专利技术的分析装置实施例之一的构成说明图。这种分析装置，按顺序通过流路连结液体色谱仪(1)、反应部(2)、装有冷却管(2C)的冷却部(3)以及荧光光谱测定部与(或)紫外线吸光光谱测定部(4)。液体色谱仪(1)由以下几种部件构成含反应试剂氨基酸与硼酸的流动相(5)进入的流动相容器(6)、流动相输液泵(7)、试样注入部(8)与装有恒温槽的分离柱(9)。反应部(2)的构成是将反应管(10)、热源电加热器(11)与温度控制用感热体(12)以及热介质(13)一起装在里面的内槽(14)，以及通过绝热材料(15)封装内槽的外槽(16)。测定部(4)的构成是荧光光度计与(或)紫外线吸光光度计(17)以及装在其中的记录计(18)与反应液排出管路(19)。其次，说明使用上述装置的糖类分析法。首先，将分离柱(9)、反应管(10)与冷却管(20)的温度保持为既定的温度，利用泵(7)输送流动相(5)，经过分离柱(9)、反应管(10)、冷却管(20)与光度计(17)，从反应液排出管(19)排出，使之处于稳定状态。接着从试料注入部(8)注入含糖类试样，在试样中的糖类通过分离柱(9)的期间进行分离，然后让反应管(10)中分离的糖类与反应试剂，在150℃，5分钟内进行反应，糖类具有紫外线吸收性能，并且被转換为荧光性的物质，利用荧光光度计与(或)紫外线吸光光度计(17)测出浓度。以下说明利用上述装置分析糖类的分析例分析条件液体色谱仪装置岛津快速液体色谱仪LC-3A分离柱Shim-pack ISA-07/S2504流动相含有0.35M硼酸与0.1%L精氨酸的水溶液(用氢氧化钾调整到PH＝8.5)流动相流量1.0ml/分分离柱温度65℃反应管温度150℃检测器荧光光度计(岛津RF-530，激发波长320nm，荧光波长430nm)试样麦芽糖、甘露糖、半乳糖、木糖以及葡萄糖混合的水溶液(各种糖类的量分别为1n摩尔)根据上述分析结果得到的色谱图如第2图所示。正如第2图所表明的那样，既没有杂音，也没有漂移，而且能高精度地分析。此外，反复进行分析，其再现性也很好。根据本专利技术对糖类进行分析的结果，与先有的分析技术相比，其优点是简便，成本低，精度高，再现性高。第1图是本专利技术的分析装置实施例之一的构成说明图。第2图是利用本专利技术的一分析例所得的色谱图。(1)液体色谱仪，(2)反应部，(3)冷却部，(4)荧光光谱测定部与(或)紫外线吸收光谱测定部，(5)含反应试剂的流动相，(6)流动相容器，(7)流动相输液泵，(8)试样注入部，(9)装有恒温槽的分离柱，(10)反应管，(11)电加热器，(14)内槽，(16)外槽，(17)荧光光度计与(或)紫外线吸光光度计，(18)记录计，(19)反应液排出管路，(20)冷却管。本文档来自技高网...

【技术保护点】
糖类分析法，这种糖类分析法是把含有糖类的试样，装在使用含反应试剂氨基酸与硼酸的流动相的液体色谱仪装置中进行洗提，然后加热所得到的洗提液，使反应试剂与糖类进行反应后再冷却，通过对生成的反应液照射激发光测定荧光光谱或者照射紫外线测定吸光度来分析糖类。

【技术特征摘要】
1.糖类分析法，这种糖类分析法是把含有糖类的试样，装在使用含反应试剂氨基酸与硼酸的流动相的液体色谱仪装置中进行洗提，然后加热所得到的洗提液，使反应试剂与糖类进行反应后再冷却，通过对生成的反应液照射激发光测定荧光光谱或者照射紫外线测...

【专利技术属性】
技术研发人员：三上博文，
申请(专利权)人：株式会社岛津制作所，
类型：发明
国别省市：JP[日本]