【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于一种药物制备方法。目前对乙肝病人及带毒者检查血内是否有HBV的复制，对流行病学，临床诊断、治疗及机理研究上都有重要意义。敏感性及将异性较强的方法是利用HBV-DNA探针检查血清标本内是否有病毒基因的存在，用32P标记的DNA探针经分子杂交直接检测血液及其他标本中的乙型肝病毒(HBV)，据《中华传染病杂志》1983年第一期报导，用32P标记的DNA探针已用于临床及实验室研究，但由于32P的半衰期短以及辐射强度较大，杂交过程繁锁，在临床使用上受到一定影响。为了解决上述的标记问题，可以采用本专利技术35S代替P标记乙肝DNA探针。由于35S半衰期较长，而且无扩散，加上简化了杂交方法，故可以广泛应用于临床和试验。本专利技术35S标记乙肝DNA探针的制备方法是通过以下步骤实现的。1.取一定量的HBV，DNA质粒或片段;2.加入放射性底物35SαdATP;3.加入dCTP、dGTP、TTP;4.加入DNAase、I和DNA多聚酶及大片段酶;5.加入标记缓冲液Nick、BSA;6.在恒温约14℃的水浴中反应数小时;7.加入中止液;8.用饱合酚及氯仿提取DNA;9.经离心后过G50柱，收集穿流峰即制成35S标记的HBV-DNA探针;10.浓缩后冻存。本专利技术35S标记乙肝DNA探针，其35S半衰期为86天，(32P为14天)，使用时间已近于标准试剂合的使用时间，故可以广泛应用。又因35S无扩现象，斑点清晰，辐射强度亦较32P小，因此使用安全，本专利技术一个重要用途是利用它检测血清中HBV-DNA的存在，以35S标记的HBV探针检测血清中HBV病毒的方...
【技术保护点】
一种标记乙肝ＤＮＡ探针的方法，其特征在于它的基材为↑［３５］Ｓ。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孙勉，王申五，肖元朴，张启云，
申请(专利权)人：北京第一传染病医院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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