透射电子显微镜生物样品超薄切片染色液制造技术

本发明专利技术公开了一种电镜超薄切片染色液及其包装工艺，该染色液由配方的组分枸橼酸铅、氢氧化钠、双蒸水按一定重量比组成；其制剂小包装工艺步骤为：药液配制、测ｐＨ值、过滤、药液灌装准备，药液注入小包装瓶及装入铝箔袋组成；本发明专利技术染色效果好，能缩短染色时间，小包装可避免大瓶药液反复启塞，浪费和污染环境，以及和空气接触机会多有可能造成整瓶药液废掉。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种电镜超薄切片染色液及其包装工艺，尤其涉及能增强反差，提高分辨率的电子染色染液及包装容量和切片染色的染液用量相匹配的包装工艺，属于A61B19/00类。目前电镜超薄切片染色液即通常称做电子染液的有铀染色液，而铀是电镜染色中最重要的金属，常用的铀染色剂为醋酸铀因属放射性物质，易污染环境，对人体有害。此外，还有一种铅染色液，具有很高的电子密度，其配方常用的是硝酸铅pb(NO3)21.33克柠檬酸钠Na2C6H5O7·2H2O 1.76克双蒸水30毫升或硝酸铅Pb(NO3)21克醋酸铅Pb(CH3COO)2·3H2O 1克柠檬酸铅Pb3(C6H5O7)·3H2O 1克柠檬酸钠Na3C6H5O7·2H2O 2克及双蒸水82毫升加热至40-45℃，将上列试剂依次加入。铅染色液的主要缺点是配方手续复杂，成本高，染色效果往往不佳，花费时间较长，染色过程中易与空气中CO2结合形成不溶性碳酸铅PbCO3沉淀，污染切片标本。染色时，染液用量不好掌握，易造成浪费和污染环境。本专利技术目的是针对上述缺点，提供一种染色效果好，能充分显示细微结构，又能缩短染色时间，配方过程手续简单，降低成本，染色液用量恰好与染色切片用量相匹配的染色液及其一次性小包装工艺。为了达到上述的目的，本专利技术采用一种新的染色液，配方及其组分的重量比是枸橼酸铅0.5-1.0%氢氧化钠0.4-0.5%双蒸水98-99%本染色液的制剂及其小包装工艺步骤如下(一)药液配制通过计量的办法取占总重量0.5-1.0%枸橼酸铅，置于容器中，加入一定量的双蒸水能使药液变得混浊，再置于搅拌器内搅拌约30分钟后，再加入0.4-0.5%氢氧化钠，使药液变得无色透明后，再加入占总重量98-99%的双蒸水达到需要配制的总量;(二)测PH值调节酸碱度(PH值)，将上步工序所配置的药液，用酸度计检测PH值，使其满足PH值＞11;(三)过滤将药液放置于无菌，无尘的操作箱中，用定性滤纸进行过滤;(四)药液灌装准备操作箱内放入少量氮气并抽真空;(五)药液注入小包装瓶将药液用一次性输液器灌装入专用一次性制剂小包装瓶内，封口和贴标签;(六)装入铝箔袋将药液制剂小包装在特制的铝箔袋内压封。本专利技术的优点是(1)染色效果好该配方经配制后多次试用，表明结合铅增加并和生物切片组织亲合能力增强，即增强反差提高分辨率，能充分显示细微结构、达到良好染色效果;(2)能缩短染色时间。经试验证明枸橼酸铅对生物切片组织的亲合力高于其他几种铅化合物，能在短时间内穿透超薄切片的全层，使染色由原来的约10分钟缩短到5分钟左右;(3)小包装与空气隔绝，药液不能与空气中二氧化碳接触，产生不溶性碳酸铅结晶，避免了切片污染;(4)小包装可避免染色液接触皮肤造成中毒，危害电镜使用和维护的技术人员人身安全;(5)一次性的小包装所容药液量，恰好与切片染色的用量相一致，避免了大瓶药液反复启塞倒出染液，会出现浪费药液和污染环境的现象，也避免了使用大瓶时增多与空气接触机会，使药液沉淀，造成整瓶药液废掉。下面结合附图对本专利技术的实施例进一步详细说明附图说明图1是本专利技术工艺流程2是小包装瓶立体示意图如图1所示本专利技术的药液配制，是采用一种新的染色液配方其组分重量比是枸橼酸铅0.5-1.0%氢氧化钠0.4-0.5%双蒸水98-99%本染液的制剂及其小包装工艺步骤如下(一)药液配制1通过计量的办法取占总重量0.5-1.0%枸橼酸铅，置于容器中，加入一定量的双蒸水能使药液变得混浊，再置于搅拌器内搅拌约30分钟后，再加入0.4-0.5%氢氧化钠，使药液变得无色透明后，再加入占总重量98-99%的双蒸水达到需要配制的总量;(二)测PH值2调节酸碱度(PH值)，将上步工序所配置的药液，用酸度计检测PH值，使其满足PH值＞11;(三)过滤3将药液放置于无菌，无尘的操作箱中，用定性滤纸进行过滤;(四)药液灌装准备4操作箱内放入少量氮气并抽真空;(五)药液注入小包装瓶5将药液用一次性输液器灌装入专用一次性制剂小包装瓶内，封口和贴标签;(六)装入铝箔袋6将药液制剂小包装装在特制的铝箔袋内压封。图2是本专利技术小包装瓶立体示意图，可采用专用模具并注塑成型。权利要求1.一种电镜超薄切片染色液，其特征是配方及其组分的重量比是枸橼酸铅 0.5-1.0%氢氧化钠 0.4-0.5%双蒸水98-99%2.一种电镜超薄切片染色液的小包装工艺，其特征是该工艺步骤如下(一)药液配制(1)通过计量的办法取占总重量0.5-1.0%枸橼酸铅，置于容器中，加入一定量的双蒸水能使药液变得混浊，再置于搅拌器内搅拌约30分钟后，再加入0.4-0.5%氢氧化钠，使药液变得无色透明后，再加入占总重量98-99%的双蒸水达到需要配制的总量;(二)测PH值(2)调节酸碱度(PH值)，将上步工序所配置的药液，用酸度计检测PH值，使其满足PH值＞11;(三)过滤(3)将药液放置于无菌，无尘的操作箱中，用定性滤纸进行过滤;(四)药液灌装准备(4)操作箱内放入少量氮气并抽真空;(五)药液注入小包装瓶(5)将药液用一次性输液器灌装入专用一次性制剂小包装瓶内，封口和贴标签;(六)装入铝箔袋(6)将药液制剂小包装在特制的铝箔袋内压封。全文摘要本专利技术公开了一种电镜超薄切片染色液及其包装工艺，该染色液由配方的组分枸橼酸铅、氢氧化钠、双蒸水按一定重量比组成；其制剂小包装工艺步骤为药液配制、测pH值、过滤、药液灌装准备，药液注入小包装瓶及装入铝箔袋组成；本专利技术染色效果好，能缩短染色时间，小包装可避免大瓶药液反复启塞，浪费和污染环境，以及和空气接触机会多有可能造成整瓶药液废掉。文档编号G01N1/30GK1095478SQ9410217公开日1994年11月23日 申请日期1994年3月8日 优先权日1994年3月8日专利技术者杨建法, 李玲, 张桂香 申请人:中国人民解放军第304医院本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种电镜超薄切片染色液，其特征是：配方及其组分的重量比是：枸橼酸铅 ０. ５－１. ０％氢氧化钠 ０. ４－０. ５％双蒸水 ９８－９９％。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨建法，李玲，张桂香，
申请(专利权)人：中国人民解放军第三零四医院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]