分离和纯化的编码Ｒｂ结合蛋白质的ＤＮＡ序列，所述的蛋白质在Ｃ－末端含有与９个３４个氨基酸的肽重复有至少６０％同源性的亚序列，条件是所述的ＤＮＡ序列既不编码Ｓ．ｐｏｍｂｅ酵母蛋白ｎｕｃ２、构巢曲霉ｂｉｍＡ蛋白质，也不编码啤酒酵母（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＣＤＣ２７蛋白质。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本申请是1993年12月20日递交的序号为U.S.08/170,586的申请的部分续申请，该申请的内容作为本专利技术的参考。
技术介绍
本专利技术属于肿瘤阻抑基因(抗—癌基因)领域，并且总的来说涉及实施针对各种人癌症的广谱肿瘤阻抑基因治疗法所用的产品和方法。特别是本专利技术涉及治疗肿瘤细胞的方法，该方法包括(1)以含有为本文中称作为H-NUC的新的蛋白质编码的核酸序列的载体给药或者(2)以有效量的由该核酸序列编码的蛋白质给药。在美国癌症和肿瘤是第二大最流行的死亡原因，每年导致450,000人死亡。在三个美国人中将有一人得癌症并且五个人中有一个将死于癌症(Scientific American Medicine，第12部分，I，1，章节，1987年)。在鉴别引发癌症的某些类似环境和遗传原因方面取得了实质性进步，而癌症死亡率统计学数字表明对癌症和其它相关疾病和紊乱的治疗有待实质性的改善。已有人识别出许多与癌症的遗传方式相关的所谓癌症基因，即癌症病因学中涉及的基因，并存在于许多的经过充分研究的肿瘤细胞中。对癌症基因进行研究可帮助我们弄懂肿瘤发生过程。而有关癌症基因仍遗留许多问题有待研究，目前已知的癌症基因可用作为理解肿瘤发生的有效的模型。从广义上说可将癌基因划分为“癌基因”，和“肿瘤阻抑基因”，当将“癌基因”活化时，可促进肿瘤发生，而将“肿瘤阻抑基因”破坏时，不能阻抑肿瘤发生。这些分类方式提供了用于将肿瘤发生概念化的有效方法，而依据某个基因的特定的等位基因形式，其调节元件，遗传背景以及其起作用的组织环境不同，一个特定的基因可以产生不同的作用。一种普遍认为的假设的癌症活动方式如下(1)大多数各种类型的人癌症是遗传疾病并且(2)癌症是由特定基因(即正常细胞生长调节基因的突变形式或病毒或其它外源基因)在哺乳动物细胞中进行不恰当，不定时的表达或表达失败或其它各类重要的生长调节基因的异位表达引起的。对瘤形成的生物基础的较简单看法是存在两个大类的癌基因。第一种类是由正常细胞基因的径突变的或另外的异常的等位基因组成的，它们参与对细胞生长或复制的控制。这些基因是细胞的原癌基因。被突变时，它们可以编码破坏正常细胞生长和复制的新的细胞功能。这些变化的结果是产生了显性表达的肿瘤表现型。在该显性表达癌基因的模型中，由于出现了瘤形成的遗传和突异基础的概念，形成了一种居支配地位的观点，假设在细胞的发育进程或生长特性中单个野生型某位基因的存在不足于阻止瘤形成的变化。因此对这些癌基因的活化起作用的遗传因素被想象的“单击”事件。在伯基特氏淋巴瘤中mye癌基因的肿瘤发生活动的活化，和在患有慢性骨髓性的白血病的患者中表达bcr-ab1嵌合基因产物，以及其它肿瘤中H-ras和K-ras癌基因的活化代表了在临床人癌症中有所述转化癌基因参与的某些证据。针对显性表达瘤形成疾病的基因治疗的方法可能要求负责基因的表达特定地关闭或失活。肿瘤阻抑基因最新发现的癌相关基因族是所谓的肿瘤阻抑基因，有时称作为抗癌基因，生长阻抑或癌阻抑基因。最近研究强烈地暗示在该类基因中丧失了功能突变，所述基因可能参与高百分数的人癌症的发生；在几种人癌症中已经鉴别出许多个人肿瘤阻抑基因的合适的候选物。已经鉴别并克隆了参与成视网膜细胞瘤(rb)，乳腺，结肠和其它癌(p53)，wilm肿瘤(wt)以及结肠癌(dcc)的发病机制的肿瘤阻抑基因。已经阐明了它们在人肿瘤形成的作用的某些方面。成视网膜细胞病(RB)是原养型肿瘤阻抑基因。在各种各样的人肿瘤中已经发现了该基因的突变(Bookstein andLee，Crit.Rev.Oncog.，2211-227(1991)；Goodrich andLee，Biochim.Biophys.Acta.，115543-61(1993)；Riley etal.，Annu.Rev.Cell Biol.，101-29(1994))。在裸鼠中将单拷贝的正常RB重导入到肿瘤细胞中抑制了其形成肿瘤的能力(Huang et al.，Science，2421563-1566(1988)；Sumegiet al.，Cell Growth Differ.，1247-250(1990)；Bookstein efal.，Science，247712-715(1990)Chen et al.，Cell GrowthDiffer.，3119-125(1992)；Goodrich et al.，Proc.Natl.A-cad.Sci.USA，885257-5261(1991)。另外，在细胞周期的G1期早期将未磷酸化的Rb蛋白质微注射到细胞中阻止其发育到S期，表明Rb蛋白根本上参与了细胞生长的调节过程(Goodrich et al.，Cell，67293-302(1991))。通过最近在基因工程鼠系中观察结果进一步证实了这些结果。从一个人Rb转基因过量表达的Rb蛋白结果导致生物体水平上的生长延滞(Bignon et al.，Genes Del.，71654-1662(1993))。此外，在由于RB基因的纯合失活而导致功能性Rb表达完全消除的鼠胚胎中，未成熟时停止发育并且胚胎死于子宫内(Lee et al.Nature，359288-294(1992)；Jacks等人，Nature，359295-300(1992)；Clarke et al.，Nature，359328-330(1992))。这些实验为确定Rb蛋白在细胞生长和体内分化中的重要性提供了基本资料。Rb基因编码一种核蛋白，该蛋白质的丝氨酸和苏氨酸残基以依赖细胞周期的方式被磷酸化(Lee et al.，Nature，329642-645(1987)；Buchkovich et al.，Cell，581097-105(1989)；Chen ef al.，Cell，581193-1198(1989)；De Caprioet al.，Cell，581085-1095(1989)。在细胞周期的G1阶段，按照微注射试验，蛋白质是活化时，Rb以低磷酸化状态存在(Goodrich et al.，Cell，67293-302(1991)；Goodrich andLee，Nature，360177-179(1992))，低磷酸化的Rb也存在于G0阶段。在该静止期，该Rb似乎是有维持细胞的关键作用，而在该阶段，Rb等待着对外部信号作出应答并作出进入细胞周期或者进行分化的决定(Goodrich and Lee，Biochim.Biophys.Acta.，115543-61(1993)；Pardee，A.B.，Science，246603-608(1989)。在晚G1，S，和M期，可能由CDK激酶族成员将Rb高磷酸化(Lees et al.，EMBO J.，104729-4290(1991)；Lin etal.，EMBO J.，10857-864(1991)；Hu et al.，Mol Cell.Bi-ol.，12971-980(1992))。Rb上某些残基发生磷酸化可能允许细胞进行增殖。Rb蛋白质的磷酸化方式与其生长抑制功能有关，因此目前可接受的假设是磷酸化作用对该蛋白质的生长阻抑功能具有负调节作用(Hollingsworth et al.，Cu-本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李文华，陈芳兰，
申请(专利权)人：德克萨斯系统大学董事会，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。