17q连锁的乳房癌和卵巢癌易患性基因的体内突变和多态性制造技术

本发明专利技术一般涉及人类遗传学领域。具体地，本发明专利技术涉及用于分离和检测人乳房癌和卵巢癌倾向性基因（ＢＲＣＡｌ）的方法和材料，该基团的某些突变型等位基因造成癌症尤其是乳房和卵巢癌的易患性。更具体地，本发明专利技术涉及ＢＲＣＡ１基因的种系突变及其在诊断乳房癌和卵巢癌倾向性方面的用途。本发明专利技术还涉及在人乳房癌和卵巢癌中ＢＲＣＡｌ基因的体细胸突变及其在诊断和预后乳房癌和卵巢癌方面的用途。此外，本发明专利技术还涉及在其他的人癌肿中的ＢＲＣＡ１基因体细胞突变及其在人癌肿的诊断和预后方面的用途。本发明专利技术还涉及ＢＲＣＡ１基因发生突变的人癌肿的治疗，它包括基因治疗、蛋白质置换治疗和蛋白质模拟物。本发明专利技术还涉及筛选用于癌肿治疗的药物，最后，本发明专利技术涉及筛选ＢＲＣＡ１基因的突变，而这些突变可用于诊断乳房癌和卵巢癌的倾向性。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术一般涉及人类遗传学领域。具体地，本专利技术涉及用于分离和检测人乳房癌和卵巢癌倾向性基因(BRCA1)的方法和材料，该基因的某些突变型等位基因造成癌症尤其是乳房和卵巢癌的易患性。更具体地，本专利技术涉及BRCA1基因的种系突变及其在诊断乳房癌和卵巢癌倾向性方面的用途。本专利技术还涉及在人乳房癌和卵巢癌中BRCA1基因的体细胞突变及其在诊断和预后乳房癌和卵巢癌倾向性方面的用途。此外，本专利技术还涉及在其他的人癌肿中的BRCA1基因体细胞突变及其在人癌肿的诊断和预后方面的用途。本专利技术还涉及BRCA1基因发生突变的人癌肿的治疗，它包括基因治疗、蛋白质置换治疗和蛋白质模拟物(mimetics)。本专利技术还涉及筛选用于癌肿治疗的药物。最后，本专利技术涉及筛选BRCA1基因的突变，而这些突变可用于诊断乳房癌和卵巢癌的倾向性。此处用来说明本专利技术的背景、尤其用来对实施提供额外细节的出版物和其他材料，在本申请中结合引用作为参考，并且为了方便起见，在下文中按作者和日期进行引用而且分别归类在所附的参考文献清单中。
技术介绍
癌肿遗传学非常复杂，涉及多个显性的、转化状态的正调节物(癌基因)以及多个隐性的、负调节物(肿瘤抑制基因)。已经确定了超过100种的癌基因。被鉴定的肿瘤抑制基因还不到12种，但是预计该数目会增加至超过50种(Knudson，1993)。牵涉这么多基因强调了为了维持正常组织的完整性而在细胞中发挥作用的生长调控机制的复杂性。这种复杂性还通过另一种方式体现。迄今为止，还没有单个基因参与所有的、或者绝大多数的人癌肿的进程。最常见的癌基因突变是在H-ras基因中，在所有实体瘤的10-15％中有此种突变发现(Anderson等人，1992)。突变频率最高的肿瘤抑制基因是TP53基因(在约50％所有肿瘤中纯合缺失)和CDKN2(在46％检查的肿瘤细胞系中纯合缺失)(Kamb等人，1994)。没有一个共同的针对所有转化细胞的靶目标，就不可能寻找到能够摧毁或逆转癌细胞而又不损害正常细胞的“魔弹”。新一代特异性导向式抗肿瘤药物的希望便寄托在能够鉴定出在细胞分裂调控中起普遍作用的肿瘤抑制基因或癌基因。已经克隆和确定的肿瘤抑制基因影响对下列癌肿的易患性1)成视网膜细胞瘤(RB1)；2)Wilms瘤(WT1)；3)Li-Fraumeni(TP53)；4)家族性多发性腺癌(APC)；5)I型神经纤维瘤病(NF1)；6)II型神经纤维瘤(NF2)；7)von Hippel-Lindau综合征(VHL)；8)2A型多发性内分泌腺瘤病(MEN2A)和黑素瘤(CDKN2)。已经确定遗传图谱但还没有被分离的肿瘤抑制基因的基因座包括下列基因I型多发性内分泌腺瘤病(MEN1)；II型Lynch癌家族性综合征(LCFS2)；神经母细胞瘤(NB)；基底细胞痣综合征(BCNS)；Beckwith-Wiedemann综合征(BWS)；肾细胞癌(RCC)；I型结节性硬化(TSC1)和II型结节性硬化(TSC2)。目前已经定性的肿瘤抑制基因，它们编码与多种蛋白质类型具有相似性的产物，其中包括DNA结合蛋白(WT1)、辅助性转录调节蛋白(RB1)、GTP酶活化蛋白(又称为GAP)(NF1)、细胞骨架组份(NF2)、膜结合受体激酶(MEN2A)、细胞周期调控蛋白(CDKN2)，还编码其他的与已知的蛋白质没有明显相似性的产物(APC和VHL)。在大多数情况下，最初通过遗传学研究而鉴别的肿瘤抑制基因已表明在某些偶发的肿瘤中是缺失的或突变的。该结果暗示，染色体异常的区域可用于表明在癌肿的遗传倾向和偶发癌肿中所涉及的重要的肿瘤抑制基因的位置。迄今为止确定的数种肿瘤抑制基因的特征之一是，它们在某些肿瘤类型中高频率地缺失。缺失常常涉及失去一个等位基因，即所谓的杂合性丢失(loss ofheterozygosity，简称LOH)，但是也涉及两个等位基因的纯合缺失(homozygousdeletion)。对于LOH，余下的等位基因被认为不起作用，其原因或者是因为已有的遗传突变，或者是因为第二次的偶发突变。乳房癌是影响妇女的最主要疾病中的一种。在目前水平，在95岁之前每8个美国妇女中有1个会得乳房癌(美国癌症协会，1992)。晚期乳房癌的治疗通常是徒劳的而且破坏形体，这使该病的早期检测在医疗中占优先地位。卵巢癌尽管比乳房癌的发病率低，但是通常快速致命而且是美国妇女中死亡率占第4位的肿瘤种类。由遗传因子造成的乳房癌发生比例还不清楚，估计为所有病例的约5％，但是占40岁前诊断病例的约25％(Claus等人，1991)。根据年龄特异性发病曲线在50岁左右的拐折，将乳房癌细分成两种类型早发型和晚发型。一个基因即BRCA1的突变被认为造成约45％的家族性乳房癌，但是造成至少80％同时有乳房癌和卵巢癌的家族(Easton等人，1993)。分离BRCA1基因的深入努力，从1990年其被首次定位后便已开始(Hall等人，1990；Narod等人，1991)。第2个基因座BRCA2已经被定位在染色体13q(Wooster等人，1994)，并且似乎造成比例与BRCA1大致相等的早发型乳房癌，但是造成的卵巢癌危险性较低。早发型乳房癌的其余易患性被分成两类还未定位的家族性癌肿和更罕见的种系基因突变如TP53的突变(Malkin等人，1990)。还提出，缺陷型Ataxia-Telangectasia基因的杂合子携带者是高危乳房癌患者(Swift等人，1976；Swift等人，1991)。晚发型乳房癌经常也是家族性的，尽管在亲属中发病的风险没有早发型乳房癌中那么高(Cannon-Albright等人，1994；Mettlin等人)。但是，还不清楚由遗传易患性造成的该病例的百分比。乳房癌长久以来被认为，部分是家族性疾病(Anderson，1972)。许多研究者已研究了基因遗传的证据并得出结论，数据与主易患性基因座的显性遗传完全一致(Bishop和Gardner，1980；Go等人，1983；Willams和Anderson，1984；Bishop等人，1988；Newman等人，1988；Claus等人，1991)。最近的结果显示，存在至少3个基因座携带乳房癌和其他癌肿的易患性。这些基因座是位于染色体17p上的TP53(Malkin等人，1990)、与17q连锁的易患性基因座BRCA1(Hall等人，1990)和一个或多个负责未定位地剩余部分的基因座。Hall等人(1990)指出，在亲缘族中早发型遗传性乳房癌的易患性与染色体17q21连锁；尽管该小组随后使用更合适的遗传模型进行的研究与局限于早发型乳房癌的结论有些出入(Margaritte等人，1992)。克隆与17q连锁的乳房癌倾向性基因(BRCA1)的许多方案需要精确的基因定位研究。对于BRCA1功能作用的最简单模型认为，使人倾向于患癌肿的BRCA1等位基因相对野生型等位基因是隐性的；即含有至少一个野生型BRCA1等位基因的细胞不是癌肿性的。但是含有一个野生型BRCA1等位基因和一个倾向性等位基因的细胞偶尔会因随机突变或细胞分裂过程中染色体丢失(未分离)而丢失野生型等位基因。该突变细胞的所有子代缺乏BRCA1的野生型功能，并可能发展成肿瘤。根据这一模型，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的、编码突变型或多态性ＢＲＣＡ１多肽的核酸，其特征在于，与ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１中所示的ＢＲＣＡ１多肽编码序列相比，该核酸含有一个或多个选自表１２、１２Ａ和１４所示突变和表１８和１９所示多态性的突变或多态性。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：DM沙特克艾登斯，J西马尔，江见充，中村辅，F迪罗切，
申请(专利权)人：亿万遗传股份有限公司，舒勒研究中心，肿瘤研究所，
类型：发明
国别省市：US[美国]