与体积无关的诊断试验载体和用它来测定被分析物的方法技术

本发明专利技术涉及诊断试验载体（１），该载体含有支承层（２）、检测层（３）（置于支承层上、含有测定液体样品中被分析物所需的试剂）和覆盖检测层的网状物（４）（比检测层（３）大，并且粘附于支承层（２）上），其特征在于，网状物（４）为亲水性的，但其本身没有毛细活性，而由不能渗透样品的材料制成的惰性覆盖物（５）置于延伸到检测层以外的网状物区域（６）上，使得覆盖检测层上的网状物（４）区域上的点样点（７）保持游离；本发明专利技术也涉及将这一试验载体用来测定液体中被分析物。此外，本发明专利技术涉及借助于本发明专利技术的诊断试验载体测定液体中被分析物的方法。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及诊断试验载体，该载体含有支承层、置于其上的一个或几个含有测定液体样品中的被分析物所需试剂的检测层以及比检测层大并且粘附于支承层、覆盖检测层的网状物。另外，本专利技术涉及将该诊断试验载体用于测定液体中被分析物的用途以及借助于本专利技术诊断试验载体测定液体样品中被分析物的方法。所谓的结合载体试验通常用于体液成分、特别是血液成分的定性或定量分析测定。在这些试验中，试剂存在于与样品接触的固体试验载体的适当层上或层中。液体样品与试剂的反应产生可检测的信号，特别是可以用肉眼或借助于仪器(通常用反射光度计)分析的颜色变化。试验载体通常为试验条的形式，它基本上由塑料材料制成的细长的支承层和置于其上、作为试验区的检测层组成。然而，也已知试验载体的形状为四边形或矩形的小板。由德国专利文件21 18 455已知涉及上述类型的试验载体。该文件描述了用于检测液体中被分析物的诊断载体，该载体由支承层和至少一个含有检测试剂的检测层组成，检测层未置于支承层的表面有一个覆盖层。覆盖层可以由织物、编织物或羊毛形式的细目网状物构成。塑料织物为推荐的网状物，以便用样品液体快速湿润检测层并且避免干扰层析效果。为了测定液体中的被分析物，将这样的诊断试验载体浸入相应的液体、最好是尿液中。因此检测层与试验载体不能吸收的大量过量的流体接触。然而，根据检测层与待测液体的接触时间，观察到不同的颜色强度。较长的接触时间通常导致较强的阳性结果。因此，不可能以该方式正确地定量测定被分析物。糖尿病的监测中(即定期控制糖尿病患者血液中葡萄糖含量)错误测量值的一个常见原因一方面是样品体积不合适。需要最小可能体积的试验载体是当前发展的其中一个目标。然而，这类试验载体必须不仅能用很小的样品体积(大约3μl)获得正确的测量值，而且用相对大的样品体积(大约15-20μl)也必须能可靠地进行测定，还必须能保留样品液体。如果液体从试验载体漏出，那么可能引起卫生问题，例如如果测定潜在传染性的外源血液，或如果要用仪器测定试验载体，那么就有污染仪器的危险。就本专利申请人所知，至今尚未以简单并且令人满意的方式达到该目标。因此，本专利技术的目的是提供用于液体中被分析物定量测定的诊断试验载体，在该载体上可以应用不定量的样品液体。大约3μl的样品体积应该是合适的。然而，过量的样品液体不导致依赖于时间的假阳性结果。此外，过量的样品液体不应引起卫生问题，试验载体也应该能尽可能简单地生产。本专利技术达到了该目的，本专利技术的特征在权利要求中进行了详细的描述。本专利技术的要点是具有支承层和检测层(置于支承层上、含有测定液体样品中被分析物所需的试剂)的诊断试验载体。检测层用网状物覆盖，网状物比检测层大，并且固定到检测层外的支承层上。本专利技术诊断试验载体的网状物是亲水的，但单独使用时没有毛细活性。由不能渗透样品液体的材料制成的惰性覆盖层置于网状物延伸到检测层以外的区域上，使得位于检测层上的网状物区域中用于加样区域保持游离。此外，本专利技术涉及使用这一诊断试验载体测定液体中的被分析物。因此，借助于这一诊断试验载体测定液体样品中被分析物的方法也是本专利技术的要点，在该方法中将样品液体加到点样点。网状物将过量的液体由检测层导入网状物延伸到检测层以外的区域，然后可以观察检测层信号的产生。该信号的产生是测定待测样品中被分析物的存在或被分析物的量。本专利技术诊断试验载体的网状物本身应该不具有毛细活性或吸收性，因此样品液体可以尽可能地完全被检测层利用。那些当垂直浸入水中时，水在网状物中上升不足2mm的网状物被证明是合适的。最好将亲水性粗目单丝织物用作网状物。为此，织物材料本身可以是亲水的，或用例如湿润剂处理制成亲水的。特别优选将聚酯用作网状材料，在这种情况下，然后在湿润剂处理后使用该材料制成的网状物。网状物的厚度必须使得置于其上的覆盖物与在网状物之下的薄层相互之间的距离能使得液体从浸透的检测层吸收保留液体，然后在覆盖物之下区域中通过毛细力进入填充网络的网状物中，将液体由点样点导出。为此，通常网状物的厚度最好为50-400μm。网的筛目必须具有足够大的宽度，使得液体可以通过网进入检测层上。网状物的性质可使得液体不在网表面上的网上水平展开，而通过网垂直流到检测层上。在本专利技术诊断试验载体中，特别要考虑的承托层材料是那些不吸收待测液体的材料。这些材料是所谓的非吸收性材料、由例如聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚酯、聚碳酸酯或特别优选聚酰胺制成的塑料薄片。然而，也可以将吸收性材料(诸如木材、纸或卡纸板等)浸渍防水剂或涂布防水膜，在这种情况下可以将硅或硬脂用作疏水剂，而例如硝酸纤维素或醋酸纤维素可以用作成膜剂。另外，金属箔和玻璃也适用作承载材料。相反，检测层需要使用能够与其中含有的组分一起吸收待测液体的材料。这些材料是所谓的吸收性材料(诸如羊毛、织物、编织物、膜或其它多孔塑料材料等)或溶胀材料(诸如明胶或可以用作膜材料的分散膜等)。当然，考虑用于检测层的材料必须也能够携带检测待测被分析物所需的试剂。在最简单的情况下，被分析物试验所需的所有试剂在一层上或一层中。然而，也可以想象最好在几个一个叠一个放置的收性材料层或溶胀材料层中分配试剂。下文使用的“检测层”包括那些试剂或者只位于一个层上或层中、或者位于两个或甚至多个如上述放置的薄层中的情况。此外，检测层也可以含有一个能够从全血分离血浆或血清的薄层，诸如由例如EP-B-0 045 476已知的玻璃纤维的羊毛状物等。一个或几个这样的分离层可以位于一个或几个携带检测试剂的薄层上。这一结构也包括在“检测层”中。优选用于检测层的材料是纸或诸如膜之类的多孔塑料材料。其中特别优选非对称多孔膜，最好安放多孔膜使得待测样品液体加到膜的大孔边，而从膜的细孔边检测被分析物。最优选聚酰胺、聚偏二氟乙烯、聚醚砜或聚砜膜作为多孔膜材料。聚酰胺66膜和亲水化非对称聚砜膜特别适合。用于检测待测被分析物的试剂通常通过浸入上述材料中或通过涂布用于膜的一面来导入。涂布非对称膜时，最好涂布细孔边。然而，检测层也可以考虑如例如EP-B-0 016 387中描述的所谓开孔膜(open film)。为此，可以加入不溶性有机或无机细颗粒的成膜有机塑性固体的含水分散体，另外加入检测反应所需的试剂。适宜的成膜剂优选有机塑料(诸如聚乙烯酯、聚醋酸乙烯酯、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸、聚丙烯酰胺、聚酰胺、聚苯乙烯等)、混合聚合物(诸如丁二烯和苯乙烯的混合聚合物或马来酸酯和乙酸乙烯酯的混合聚合物等)或其它天然或合成的成膜有机聚合物及其含水分散体形式的混合物。分散体可以涂到基板上，形成均一的薄层，该层干燥后生成防水膜。干膜厚度为10-500μm，最好为30-200μm。该薄膜可以与基板一起用作载体或可以置于另一检测反应载体上。尽管通常将检测反应所需的试剂加入用来产生开孔膜的分散体中，但形成的薄膜在生产后浸渍试剂也可能是有利的。也可以用试剂预浸渍填料。可以用来检测被分析物的试剂对本领域技术人员是已知。这一点在这里就不需要更详细地阐述了。另一推荐的本专利技术检测层的实例是WO-A-92 15 879中描述的薄膜层。该层是由在均匀分散体中还含有颜料、溶胀剂和检测试剂的聚合成膜剂的乳液或分散体生产的。聚乙烯酯、聚乙烯醋酸酯、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸、聚乙烯酰胺、聚酰胺和聚本文档来自技高网...

【技术保护点】
诊断试验载体（１），包括支承层（２）、位于支承层上的含有测定液体样品中被分析物所需的试剂的检测层（３）和覆盖检测层的网状物（４）（比检测层（３）大，并且粘附于支承层（２）上），其中网状物（４）为亲水性的，但本身没有毛细活性，而由不能渗透样品的材料制成的惰性覆盖物（５）置于延伸到检测层以外的网状物区域（６）上，使得覆盖检测层上的网状物（４）区域上的点样点（７）保持游离，网状物（４）在覆盖物（５）和检测层（３）之间以及覆盖物（５）和支承层（２）之间或覆盖物（５）和在支承层（２）上的垫片（１０）之间产生毛细活性空隙。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：D蒂姆，H莱宁格尔，
申请(专利权)人：曼海姆泊灵格股份公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]