一种ａＰＬ类似物，其特异性结合到Ｂ细胞上，ａＰＬ表位结合到所说的Ｂ细胞上。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫学领域，同时涉及用于治疗和诊断抗磷脂(aPL)抗体-介导的疾病的组合物与方法。具体地说，本专利技术涉及化学限定的非免疫原性平台分子和aPL结合表位的特异性免疫类似物的缀合物以及用以产生这些缀合物的方法和组合物。优化的类似物缺乏T细胞表位。此外，本专利技术涉及用于检测生物样品中抗磷脂抗体地存在和测定其总量的诊断测定方法。本专利技术也涉及用随机肽文库鉴别aPL结合表位的特异性免疫类似物表位的方法。
技术介绍
抗磷脂抗体发生在自身免疫疾病(如全身红斑狼疮症(SLE)和抗磷脂抗体综合症(APS)以及与感染和药物疗法联系的病症)中。APS的特性为具有一个或更多临床特征(如动脉或静脉血栓，血小板减少和胎丧失)。APS是基本的，或者它可能与其它病症相联系(主要是SLE)。(《磷脂结合抗体》(Harris等，eds.，CRC出版社，Boca Raton，FL，1991)；McNeil等，免疫学进展杂志，49卷，193-281页(Austen等，eds.，学院出版社，圣地亚哥，CA，1991))。近30-40％的SLE患者有aPL，而50％的带aPL抗体的病人却缺乏SLE。这50％的病人可能患有其它的自身免疫风湿疾病，或各种各样的病症，或者它们可能已经接受了药物(特别是氯丙嗪)治疗。在对70位(26位男性和44位女性)原发性APS(PAPS)(但无证据表明有SLE)的患者的一项研究中，观察到下列特征患深静脉血栓症(DVT)的有31位；得动脉闭塞(特别是中风或者是瞬时局部缺血)有31位；患心肌梗塞的15位；患习惯性流产(fetal loss)的24位；患血小板减少症(TCP)的32位；10位的Coomb氏测验呈阳性；患Evans氏综合症的有7位；32位有抗核抗体(ANA)，但其中29位不到1∶160；大约24位有抗线粒体抗体(AMA)(McNeil等，同上)。只是在所有中风患者大约5％中估测有变化，aPL抗体被认为是一个重要的起作用的因子。短暂存在的aPL抗体，如那些在VDRL试验中检测到的，发生在许多感染期间。大约30％的有永久aPL抗体的病人曾得过血栓病。aPL抗体的存在可在SLE患者群内定义一组病人，他们表现出包括一个或更多个血栓症、TCP和流产等临床特征的综合症。在SLE中得这种综合症的危险总体来说大约是25％；在aPL抗体存在时危险性增加到40％，而在它们不存在时危险性减少至15％。因为aPL抗体被认为是针对原生质膜中的磷脂的，人们假设它可能通过干扰在细胞(如血小板或者是内皮细胞)的磷脂膜上发生的止血过程在活体中产生直接致病效果。在PAPS患者中，aPL抗体看来是存在的唯一危险因子这一事实进一步证明了这些抗体有直接致病作用(Bakimer等，1992，J.Clin.Invest.891558-1563；Blank等，1991，美国科学院学报，883069-3073)。在临床环境中的aPL抗体测量仍然不完善。一套可供使用的商业标准抗血清(APL诊断公司，Louisville，KY)可产生标准曲线以用于比较在各种实验室进行测定。然而，关于确切的GPL和MPL，IgG和IgM抗磷脂抗体的测量单位，对所给血清的等级分类和分为高、中、低滴定率的GPL和MPL的级别，在这些实验室各自获得的结果间有很多的不一致性。可供使用的商业试剂盒在商业可供使用的标准分配的值上变化很大(Reber等(1995)，血栓形成和止血剂73444452)。尽管有这些局限性，一般认为，受在APS，PAPS和其它aPL抗体-介导的疾病(包括周期性中风和周期性流产)中抗体识别的表位位于β2-GPI的第5域中，并且在β2-GPI与心磷脂结合后暴露给抗体。现在人们一般地接受是aPL抗体识别由β2-糖蛋白(β2-GPI)和带负电磷脂(例如心磷脂)构成的抗抗原复合体(McNeil等(1990)美国科学院学报，874120-4124；Galli(1990)Lancet I1544-1547)(在下文为“aPL免疫原”)。β2-GPI是所发现的游离的较小血浆糖蛋白与脂蛋白脂类相联系，它也叫作载脂蛋白H(ape H)。它由被称作Sushi的5个独立折叠域或者是与其它蛋白质中类似域相似的短的共有重复域构成。已有报道β2-GPI在结合磷脂上经历了抗抗原的和构造上的变化(Wagenkneckt等(1993)血栓形成和止血剂69361-365；Jones等(1992)第5届抗磷脂抗体国际会议议程(摘要5))。第5个域包含脂类结合和aPL抗体结合的假定位点(Hunt J.和S.Krilis(1994)免疫学杂志152653-659；Lauer等(1993)免疫学8022-28)。关于aPL的病理机制是未知的(McNeil等，同上)。大多数解释援引内皮细胞功能或者是血小板介入(Haselaar等(1990)血栓形成和止血剂63169-173)。这些解释提出在血管内皮细胞伤害或者是血小板激活后，向原生质暴露表面的阴离子磷脂的暴露或转双面迁移可能会导致β2-GPI结合和引发aPL抗体形成。aPL抗体可能通过减少前列环素形成而直接起原血栓形成作用的(Vermylen，J.和J.Arnout(1992)临床实验室医学杂志12010-12)；通过直接干扰凝结蛋白质的作用；或者是通过封阻β2-GPI的能力来抑制内在的血液凝固途径，血小板凝血原酶活性，和腺苷二磷酸(ADP)调解的血小板聚合(Arvieux等(1993)血栓形成和止血剂60336-341)。提供巨大的分子多样性的组合文库已经是在搜索铅化合物的药物化学中的一种主要的新工具。分子多样性可以从化学合成或生物系统中产生(Scott.，J.K.(CRC出版社，Weiner，D.B.和W.V.Williams，eds.，Boca，Raton，FL.，1994)；Moos等(1993)药物化学年报28315-324)。通过在丝状噬菌体的表面显示随机肽，人们已经创造了包含用临床的显著抗体来进行检测的数以亿计的克隆的表位文库(Scott，J.K.和G.P.Smith(1990)科学249286-390；Cesareni，G.(1992)FEBS Lett.30766-70)。通过把随机化的寡核苷酸序列(通常是pIII基因，该基因编码每个噬菌体表面上的单一肽序列)结合到噬菌体基因组中来制备这样的噬菌体文库。在亲和纯化和扩增的顺序循环之后，结合抗体的那些噬菌体在大肠杆菌和通过测序病毒脱氧核糖核酸(DNA)的相应编码区鉴别的结合肽中得到增殖。在大多数情况下，随后的研究将涉及相应的合成肽(在建立它们结合抗体的能力之后)。基于噬菌体的文库已用来模仿不连续的表位(Luzzago等(1993)基因杂志12851-57；BaLass等(1993)美国科学院学报，9010638-10642)。基于肽-的药物的潜在的血浆不稳定性已经成功地通过N-末端封阻或者是正确的使用氨基酸类似物得到克服(Powell，M.F.(1993)药物化学年报28285-293)。现在缺乏对显示aPL抗体高效价的患者的特异性免疫疗法。已经证明在许多用药(如阿斯匹林，甾类化合物，和华法令)的情况很大程度上不充分((Harris等，eds.，CRC出版社，Boca本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：E·J·维克多利亚，D·M·玛奎司，D·S·琼斯，L·于，
申请(专利权)人：拉卓拉药物公司，
类型：发明
国别省市：
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