ICAM-4及其诊断用途制造技术

提供与各种神经退化性失调症相关的循环ＩＣＡＭ－４浓度的定量检测方法。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术一般涉及细胞粘附分子并具体涉及克隆和表达编码称为“ICAM-4”的迄今仍属未知多肽的DNA，该多肽具有与细胞间粘附分子ICAM-1，ICAM-2和ICAM-R的结构相关性。
技术介绍
最近十年中的研究已清楚阐明了参与体内细胞之间相互作用的分子反应，特别是那些与免疫系统中的细胞运动和激活有关的反应，并且最近，还阐明了与神经系统中细胞的发育和正常生理功能有关的反应。有关免疫系统的细胞，一般请参见Springer，Nature，346425-434(1990)，而有关神经系统的细胞请参见Yoshihara等Neurosci.Res.1083-105(1991)和Sondereger与Rathjen，J.Cell Biol.1191387-1397(1992)。细胞表面蛋白，特别是所谓细胞粘附蛋白分子(“CAMs”)已经相应成为药物研究与开发的课题，其目的在于干预白细胞向炎症部位外渗和白细胞向特定靶组织移动的过程以及干预神经分化和复杂的神经回路的形成。细胞粘附分子的分离和表征，编码此类分子的DNA序列的克隆与表达，以及与炎症过程和神经系统的发育及功能相关的治疗与诊断试剂的开发也已经成为许多美国和外国的Letters专利申请的课题。参见Edwards，Current Opinion In Therapeutic Patents，1(11)1617-1630(1991)和本文具体引用的出版物“专利文献参考资料”。本专利技术背景的基本兴趣在于事先鉴别和表征细胞粘附反应的某些中介因子“白细胞整联蛋白”，LFA-1，MAC-1和gp150.95(按照世界卫生组织命名法，分别为CD18/CD11a，CD18/CD11b，和CD18/CD11c)，它们形成在B淋巴细胞，T淋巴细胞，单核细胞以及粒细胞上出现的异二聚体“整联蛋白”细胞表面蛋白质的一个亚族。例如，参见Springer，出处同上429页的表1。所述兴趣还在于其他单链粘附分子(CAMs)，它们已被发现与白细胞激活，粘附，游动性等参与炎症过程的反应有关。例如，目前认为在以炎症过程为特征的白细胞外渗前，在白细胞表面发生整联蛋白组成型表达的激活反应并随后发生整联蛋白(例如，LFA-1)与两种独特的被称为ICAM-1和ICAM-2的细胞间粘附分子(ICAMs)之一或两者之间的紧密配体/受体相互作用，而所述粘附分子是在血管内皮细胞表面和其他白细胞上表达的。与至今已表征的其他CAMs相类似，ICAM-1和ICAM-2结构上与免疫球蛋白基因超家族的其他成员有结构同源性，因为其各自的细胞外部分包含了一系列结构域，这些结构域共有一个类似的羧基末段基元。一种“典型的”免疫球蛋白样结构域含一个环式结构，该环式结构通常通过每个环式结构肢端的两个半胱氨酸之间的二硫键锚着。ICAM-1包含五个免疫球蛋白样结构域；与ICAM-1有不同细胞分布的ICAM-2包含两个此类结构域；PECAM-1包含六个结构域；VCAM根据剪接的不同而包含六个或七个结构域等。而且，CAMs一般包含一个疏水“跨膜”区，该区域被认为参与位于细胞表面和羧基末段“细胞质”区域的分子的取向。CAMs的有效布局的图解模式一般表示为跨膜区处的细胞膜中锚着的分子，其细胞质的“尾”伸入到细胞质中，而一个或多个免疫球蛋白样环从细胞表面伸出。一些神经细胞表达具有细胞外Ig样结构域(结构上类似于ICAMs)的表面受体。例如参见Yoshihara等，出处同上。除了Ig样结构域外，许多神经系统的粘附分子在细胞外结构域中还包含串联重复的纤连蛋白样序列。已为细胞间粘附分子制定了各种治疗应用计划，包括设想在ICAM-1与人类鼻病毒的结合能力方面的应用。例如，1992年1月29日发表的欧洲专利申请号468 257 A，论述了推测具有增强的配体/受体结合活性，特别是与病毒，抗原相关性淋巴细胞以及如plasmodium falciparum的病原体的结合能力的ICAM-1多聚体构型与形式的开发(包括全长和截短的分子形式)。以同样的方式，已为免疫学上与细胞间粘附分子相关的蛋白质规划了各种应用。例如1991年11月14日公开的WO91-16928描述了人源化嵌合抗ICAM-1抗体以及它们在治疗特异性和非特异性炎症，病毒感染和哮喘中的应用。在1992年，3月19日公开的WO92/04034中描述了的抗ICAM-1抗体及其片段在治疗内毒素性休克是有用的。在1992年4月16日公开的WO92/06119中描述了用抗ICAM-1的抗独特型抗体及抗体片段抑制ICAM-1依赖型炎症反应。尽管通过鉴别和表征细胞间粘附蛋白质如ICAM-1和淋巴细胞活性整联蛋白如LFA-1获得了对细胞粘附现象的基本认识，对这种现象的描绘远没有完成。一般认为许多其他蛋白质与炎症过程及遍及全身的导向淋巴细胞移动有关。例如，美国专利申请序号07/827,689,07/889,724,07/894,061和08/009,266和相应发表的PCT申请WO 93/14776(1993年8月5日发表)公开了ICAM-相关性蛋白质(ICAM-R)的克隆与表达。这些申请的公开文献在本文引用为参考，而ICAM-R的DNA序列和氨基酸序列在本文的SEQ ID NO.4中给出。业已发现这种新型配体在人类淋巴细胞，单核细胞和粒细胞上表达。在本申请特别感兴趣的是，还鉴定了另一种ICAM样表面分子，与任何已知ICAM分子不同的是这种分子表现出组织特异性表达。Mori等报道了对兔脑中的端脑特异性抗原的鉴定，特别是与单克隆抗体271A6有免疫反应性。这种表面抗原被称为端脑素。Imamura等用单克隆抗体测定局部的表达，断定猫的视觉皮质中的端脑素的表达表现出在组织层中的差异，并且还报道了端脑素根据发育功能而有不同表达。Oka等随后报道用单克隆抗体271A6分离出端脑素。该出版物报道了一个约500kD的表面分子的分子量，并且所述分子包含四个亚单位，每个亚单位的天然分子量是130kD，而在经过N-聚糖酶处理后分子量约为100kD。Yoshihiro等在1993年12月7-9日在日本名古屋的日本神经科学学会第17届年会上并在1993年9月9日华盛顿举行的神经科学学会的第23届年会上报道了兔端脑素的cDNA和氨基酸序列。所报道的推导氨基酸序列提示130kD端脑素是一种膜内在蛋白，其具有九个细胞外免疫球蛋白(Ig)样结构域。这些结构域中远端的八个表现出与其他ICAM Ig-样结构域的同源性。与此相同的资料由Yoshihara等在Neuron12543-553(1994)中报道。因此，本领域仍需要发现参与人类细胞-细胞相互作用的其他蛋白质，特别是需要具体鉴别和表征此类蛋白质氨基酸序列方面的资料。而且，此类分子可能到了构成开发治疗和诊断试剂之基础的程度，因而有必要阐明编码此类分子的DNA。此类为大规模生产所述蛋白质做准备的创新性资料容许鉴别天然产生所述蛋白质的细胞并以此容许制备抗体物质或其他新的特异反应性结合蛋白质和(或)抑制所述蛋白质参与的配体/受体结合反应。专利技术简述作为本
技术实现思路
之一，本专利技术提供纯化的并分离的多核苷酸(例如，DNA序列，RNA转录物及其反义寡核苷酸)，所述多核苷酸编码新型多肽“ICAM-4”及其多肽变体本文档来自技高网...

【技术保护点】
在一个个体中进行神经病理学筛查的方法，包括步骤：ａ）从所述个体获得流体样品；ｂ）用对ＩＣＡＭ－４有特异性免疫活性的抗体接触所述样品；ｃ）定量检测所述样品中结合的ＩＣＡＭ－４／抗体水平；ｄ）将在所述样品中结合的ＩＣＡＭ－４／抗 体水平与已知无神经病理学的个体中结合的ＩＣＡＭ－４／抗体水平比较。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：PD基尔甘弄，WM加尔拉丁，
申请(专利权)人：艾科斯有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]