血液、血浆或滑液制品的抗凝处理制造技术

本发明专利技术披露了一种在血液、血浆或滑液制品中添加异柠檬酸盐以对其进行抗凝处理的方法。本发明专利技术的方法还可进而包括用一种可溶性钙盐把经过抗凝处理的制品中的钙离子活性调节到生理水平的步骤。本发明专利技术公开了含有抗凝剂量的由异柠檬酸盐，以及柠檬酸盐（供选），组成的抗凝剂的血液、血浆或滑液制品。这些经过抗凝处理的制品被用于运输及贮存，以及／或者被用于这些制品止血或凝固特性的分析。另外，本发明专利技术还公开了一种含有等渗或轻微高渗的异柠檬酸盐溶液的血样采样容器、一种含有十分之一容器体积的０．１－０．５Ｍ异柠檬酸盐溶液，以及供选的足以使钙离子最终活性达到大约１ｍＭ的有效剂量的氯化钙的血液采样容器。本发明专利技术最后还披露了用于对含有异柠檬酸盐的血液、血浆或滑液制品进行分析的试样。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用可以适度地与钙结合的抗凝剂对血液、血浆或滑液制品进行抗凝处理，以及任意地用一种可溶性钙盐把钙离子活性调节到生理水平的方法。背景生物液体，具体说，血液、淋巴、滑液及脑液以及上述液体的无细胞制剂，如血浆，可以在流变学，即粘性-弹性，性质上发生激烈的变化。这些液体可以从一种流变学性质与水相似的液体转变为一种流变学性质与松软干酪更相似的凝胶状物质。上述流变学转变，通常被称为凝固或凝块，可以在生物液体被从其天然环境中取出并收集于某种人造容器中时发生。为了防止在收集生物液体时发生凝固，应该添加一些具有抗凝特性的物质。被用于抑制凝固的物质，也称抗凝剂，包括草酸盐、EDTA、柠檬酸盐、肝素及水蛭素。这些抗凝剂或是能对参与凝固作用的酯产生特异性抑制作用，或是可以改变生物液体中的条件，从而使凝固过程无法进行。这些条件包括自由钙离子浓度，也称Ca2+活性，以及pH。根据已有的理论，一些抗凝剂的作用机制是抗凝剂与Ca2+离子形成复合物从而使生物溶液中自由Ca2+的水平，也即Ca2+活性降低到一个无效的水平。因此可以理解，凝固过程需要有一定水平的Ca2+活性才能进行。本专利技术具体涉及的是后面一种抗凝作用，即当钙活性低于0.8mM或pH值低于7时，凝固作用受到阻碍。如果是通过降低Ca2+活性来对生物液体进行抗凝处理，那么通过添加Ca2+，如CaCl2溶液，来使钙活性恢复到允许凝固的水平即可使生物溶液恢复到可凝固状态。以可逆的方式，即以允许液体恢复到可凝固状态的形式，来对生物液体进行抗凝处理的过程是液体凝固活动分析所常用、也是所必需的。草酸盐、EDTA、柠檬酸盐是一些根据已有工艺通过降低生物液体中的Ca2+活性来行使功能的抗凝剂的例子。另外，根据已有工艺，任何能够充分地降低生物液体中的Ca2+活性的物质都可以充当抗凝剂。根据已有工艺，所有通过降低Ca2+活性而充当抗凝剂的物质形成相对稳定的Ca2+复合物，这些复合物的特征在于其表观解离常数等于或小于0.5mM。例如，柠檬酸盐与EDTA是这类抗凝剂中最常用的，其中的柠檬酸盐所形成的Ca2+复合物在生理状态下的表观解离常数是大约为4mM。Ca2+EDTA复合物及Ca2+草酸盐复合物被认为结合得较紧密。如上所讨论的，生物液体中凝固分析物的分析通常采用的是经过柠檬酸盐抗凝处理的样品。由于柠檬酸盐对Ca2+的亲和力相对较低，所以使用最少量的柠檬酸盐进行抗凝，从导致生物溶液中蛋白及磷脂-蛋白结构的变性和脱稳定来考虑，用柠檬酸盐进行抗凝是温和的。然而，用柠檬酸盐进行抗凝被认为有一些不利影响。例如，在经过柠檬酸盐处理的血液或血浆中的凝血因子VIII，比起血液循环中的，稳定性就比较差。另外，对经过柠檬酸盐处理的血液或血浆进行激活凝血酶原时间(activated prothrombin time，APTT)分析，结果表明稳定性有限。因此，根据已有工艺，一些凝固分析物显示了一定程度的不稳定性，这需要在临床实验的常规操作给予特别的考虑。这些更加严格的常规操作给医疗实验步骤增加了费用和不便。当用一种经过抗凝处理的生物液体样品进行各种不同的凝固活性分析时，将样品与包括Ca2+的试剂混合。所添加的Ca2+的数量应该足以使反应混合物中Ca2+的浓度处于0.8至8mM的范围，在上述条件下凝固活性得以表现。虽然通常都是首先通过降低Ca2+活性来对一生物液体进行抗凝处理，但这一过程在某些方面并不合用。例如，如上所讨论的，一些我们所关心的结构变性了或变得不稳定了。另外，在一个给定的过程中，不可能用添加Ca2+来完全平衡添加抗凝剂的影响。重新被钙化的样品中的Ca2+与天然液体中的很可能会有所不同，而且，在一系列此种液体的样品中，Ca2+活性的变化比起其在原来的天然液体中的变化还要大。被重新钙化的生物液体中的钙活性偏离天然水平，也即生理水平的偏差最可能对凝固化验系统及其结果产生不合需要的影响。一个与通过Ca2+的减少而造成的抗凝作用产生实际问题相关的医疗领域是血液库存行业。待被用于输血的血液或血浆通常都是经过抗凝处理的。这是因为，凭借目前的技术，天然的血液或血浆在有机体外只能被处理很短的一段时间内而不致凝固。由于柠檬酸盐毒性低、新陈代谢快而且具有良好的抗凝特性，所以它是血液库存行业通常使用的抗凝剂。在许多情形中，在输血用血液或血浆中柠檬酸的含量并不致给受血的患者造成不利影响。但在一些情形中，特别是当患者肝功能失调时，用柠檬酸盐抗凝的血液及血浆就不能很好地被耐受。由于柠檬酸盐在这些患者中代谢缓慢，所以它会使Ca2+活性显著降低从而导致痉挛和肠胃不适。需要有一种对血液、血浆及滑液制品进行抗凝处理的改善的方法，用以改善这些制品被用于运输和贮存、输血、止血及凝血特性分析时的特性。本专利技术的描述本专利技术提供了一种对血液、血浆及滑液制品进行抗凝处理的方法。该方法包括异柠檬酸盐，以及供选的可溶性钙盐的添加。本专利技术的方法对于完成，例如，如下过程是有用的1)增加经过抗凝处理的制品中的凝固分析物的稳定性并减少其变性，2)使凝固分析物的化验系统中的Ca2+活性更接近生理水平并减小Ca2+活性的偏差，3)当经过柠檬酸盐抗凝处理的血液或血浆被输注给患者时，减少Ca2+的降低效果。因此，本专利技术的一个方面涉及的是一种对血液、血浆或滑液制品进行抗凝处理的方法。它包括把有效剂量的异柠檬酸盐加入到制品中的步骤。在本专利技术这一方面的一个实施例中，这一方法另外还包括用一可溶性钙盐把经过抗凝处理的制品中钙离子的活性调节到生理水平的步骤。在本上下文中所提及的是，可以通过添加柠檬酸盐或其它与钙结合的物质来降低本专利技术的经过抗凝处理的制品中钙离子的活性，而且也可根据特定的目的对pH进行调整。在本专利技术这一方面的一个优选实施例中，异柠檬酸盐的有效用量是每升血液制品含5-50mmol或者每升血浆或滑液制品含7-70mmol，而在一个最优选的实施例中，异柠檬酸盐的用量是每升血液制品含15-25mmol，或者每升血浆或滑液制品含25-35mmol。本专利技术的另一方面涉及的是一种含有抗凝剂量的由异柠檬酸盐组成的抗凝剂的血液、血浆或胃液制品。在本专利技术这一方面的一个实施例中，抗凝剂除了包含异柠檬酸盐以外，还包含有柠檬酸盐。在本专利技术这一方面的一个优选实施例中，异柠檬酸盐的抗凝剂量是每升血液样品含5-50mmol或者每升血浆或滑液制品含7-70mmol，而在一个最优选的实施例中，异柠檬酸盐的抗凝数量是每升血液制品含15-25mmol或者每升血浆或滑液制品含25-35mmol。本专利技术的另一方面涉及的是把根据本专利技术的血液、血浆或滑液制品用于运输及贮存。被运输及贮存的血液、血浆或滑液制品随后可以被直接用于输注给患者。本专利技术的另外一个方面涉及的是把根据本专利技术的血液、血浆或滑液制品用于这些制品的止血或凝固特性的分析，即用于诊断目的。本专利技术的另一方面涉及的是一个含有一等渗或轻微高渗的异柠檬酸盐溶液的血样采样容器。本专利技术的血液采样容器的另外一个实施例包含有一个十分之一容器体积的0.1-0.5M的异柠檬酸盐溶液。根据本专利技术的血液采样容器除了含有异柠檬酸盐之外，另外还可以包含使钙离子的最终活性达到大约1mM的有效剂量的氯化钙。本专利技术的血液采样容器优选地是常规的，任意地是抽真空的，用于处本文档来自技高网...

【技术保护点】
对血液、血浆或滑液制品进行抗凝处理的方法，包括把有效剂量的异柠檬酸盐加入到制品中的步骤。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：M龙比，
申请(专利权)人：全球止血协会有限公司，
类型：发明
国别省市：SE[瑞典]