一种新的多肽——视紫红质抑制蛋白家族11和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－视紫红质抑制蛋白家族１１，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的视紫红质抑制蛋白家族１１的多核苷酸的用途。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽－视紫红质抑制蛋白家族11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。视紫红质抑制蛋白是一种在生物体内与光激活磷酸化视紫红质蛋白相互作用，以抑制视紫红质与转导素相互作用的蛋白。所有的视紫红质抑制蛋白构成了一个很大的蛋白超家族，即视紫红质抑制蛋白超家族。该蛋白超家族中的成员在生物体内作为重要的调节蛋白，下游调控磷酸化G蛋白膜受体在体内的表达与作用。视紫红质抑制蛋白在生物体内的分布非常广泛，在各种高等生物体内均发现含有大量该蛋白家族的成员。对脊髓动物与非脊髓动物中的视紫红质抑制蛋白进行研究，按它们的序列相似性，可将该蛋白超家族的成员分为五个小家族。并在所有家族成员中发现了7个可变的结构基序和4个保守的结构基序，这些结构基序均为蛋白发挥正常生物学重要功能域。所有不同来源的视紫红质抑制蛋白家族间亦有较高的同源性，因而，该蛋白家族的成员为进化上保守的。对视紫红质抑制蛋白的家族的成员进行序列比较分析，发现该家族成员蛋白序列的N末端均含有一如下所示的高度保守的序列片段-R-Y-G-X-(2)-X--(2)-G--X-F-X---；这一序列片段中含有大量高度可变的、疏水性的氨基酸残基，其可能是蛋白与视紫红质蛋白结合并发挥正常生理学功能的中心区域。该区域的一些氨基酸位点的突变将导致蛋白的表达与功能异常，从而引起各种相关的生物体内调控过程的异常，如不能正常地调控G蛋白的表达而导致相关组织及细胞的异常增殖或细胞信号的转导过程受阻。视紫红质抑制蛋白在生物体内主要通过抑制视紫红质与转导素间的相互作用来下游调控一些G蛋白膜受体的表达与作用。众所周知，转导素是生物体内的一种重要的G蛋白，其在生物体内涉及细胞的增殖、信号转导、蛋白合成及蛋白定位等多种重要的生物学功能，而所有这些功能的实现又需要各种G蛋白膜受体的介导。因而，视紫红质抑制蛋白作为G蛋白膜受体的下游调节物在生物体内亦有着十分重要的生理学功能。其在生物体内调控着各种相关组织的蛋白的表达及其功能，如调控肾上腺能受体的功能等。该蛋白家族的成员的表达异常将导致组织细胞的异常增殖及蛋白的异常表达，从而一些相关代谢步骤的紊乱。其通常与生物体内各种恶性肿瘤及癌症、各种发育紊乱症及各种免疫系统疾病的发生相关。特别的，基于视紫红质蛋白的表达与光的关系及其在生物视觉系统的作用，认为该蛋白在哺乳动物体内与一些自体免疫性眼色素层炎及葡萄膜炎等眼科疾病的发生亦密切相关。由于如上所述视紫红质抑制蛋白家族11蛋白在机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的视紫红质抑制蛋白家族11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新视紫红质抑制蛋白家族11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽－视紫红质抑制蛋白家族11以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码视紫红质抑制蛋白家族11的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码视紫红质抑制蛋白家族11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产视紫红质抑制蛋白家族11的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽－视紫红质抑制蛋白家族11的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽－视紫红质抑制蛋白家族11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与视紫红质抑制蛋白家族11异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中988-1281位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2025位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制视紫红质抑制蛋白家族11蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与视紫红质抑制蛋白家族11蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于视紫红质抑制蛋白家族11表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与视紫红质抑制蛋白家族11结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合视紫红质抑制蛋白家族11的分子。“拮抗剂”本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－视紫红质抑制蛋白家族１１，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]