色谱定量测定装置、色谱定量测定方法及其使用的色谱试验片制造方法及图纸

可以定量地准确测定液体试样中含有的分析对象物的浓度。包括色谱试验片（１０）和显色程度测定手段（１１），色谱试验片具有多个反应区域（６Ａ，６Ｂ），该反应区域上保持有能够与上述分析对象物发生特异性反应并显色的捕集试剂，显色程度测定手段能够对上述多个反应区域中至少２个以上反应区域的显色程度进行定量的数值化测定。上述显色程度测定手段具有对通过上述捕集试剂与上述分析对象物发生反应显色的上述显色程度进行光学测定和图象测定中至少一种测定的功能。用演算处理装置（１２）对该测定结果进行演算处理，可以计算出分析对象物的数值化浓度。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
技术区域本专利技术涉及利用抗原抗体反应定量测定被测物质的色谱定量测定装置、其测定方法及其使用的色谱试验片。该免疫色谱试验片称为反应层载体。液体试样添加到反应层载体上，放置一定时间。通过考察一定时间后出现的显色反应，判断有无被测物质。也就是说，将液体试样添加到试样添加层43中，液体试样浸透试样添加层43，到达标识试剂保持层44。标识试剂在标识试剂保持层44中被液体试样浸透溶解，同时向反应层42浸透。在这一过程中，液体试样中的分析对象物与标识试剂结合，生成结合体。该结合体在反应层42的条状反应区域46C与捕集试剂固定部位的捕集试剂发生特异性反应，引起显色反应。液体试样中含有的分析对象物少时，标识试剂结合体的量也少，结果反应层42中的显色部分仅限于多条反应区域46C中的上游部分，显色条数少。另一方面，分析对象物多时，标识试剂结合体的量也多，显色部分达到多条反应区域46C的下游部分。以前，利用这种原理，通过考察反应区域46C的显色条数，可以将液体试样中含有的分析对象物的浓度半定量地评价为“多”-“少”的3个等级、5个等级、10个等级等。例如，采用上述方法进行免疫色谱分析，对其结果进行定量的手段在特开平5-5743号公报中已经公开。在这一现有技术中，独立固定的捕集试剂分散在色谱试验片反应区域的多个部位，其浓度按照从色谱试验片上游到下游的顺序逐步增加。而且，通过目测这种分散的多个部位中显色的反应区域的数目，可以对分析对象物进行半定量化测定。另外，其他的现有技术在特开平-341989号公报中已经公开。在这一现有技术中，通过以一定量固定存在的分析对象物的抗体，捕集与固定的抗体量相应的试样中一定量的分析对象物，使分析物减少。采用这种方法可以简便地对分析对象物进行半定量。另外，其他的现有技术在特开平-240591号公报中也有公开。在这一现有技术中，试样添加到免疫色谱试验片上，进行反应。之后，测定规定检测区域中的显色程度。也就是说，使用检测仪器测定显色部位的吸收或反射等信号，使测定结果定量化。免疫色谱法的测定原理是利用抗原抗体反应的特异性，可以有效检测各种分析对象物。但是，上述现有的免疫色谱法测定，只能依赖于分析对象物的种类进行半定量地测定，而定量测定则是不可能的。这样，就会产生根据分析对象物的种类仅能得出半定量结果的限度。因此，期望出现一种使用免疫色谱试验片可以得到正确分析结果的定量测定装置。使用免疫色谱试验片进行定量测定的场合，可以认为是基于其显色程度的强弱或浓淡，测定分析对象物浓度的方法。使用现有的免疫色谱试验片时，色谱的展开是在没有机械控制的状态下进行的，不能人为地控制反应速度。因此，分析对象物的浸透速度依赖于试验片自身的浸透性。因此，依赖于测定时间、试验片的种类、同一试验片上的部位、试样量以及标识试剂的量等，试验片上的显色程度会有很大的不同。另外，反应区域限定于特定的场所，测量这种限定的特定反应区域的显色程度时，受标识试剂的浸透性的影响，测定误差较大。因此，难以对分析对象物的浓度进行数值化的定量测定。因此，采用免疫色谱法的定量测定的性能只是接近于半定量。本专利技术的目的在于提供一种可以提高免疫色谱法的定量测定性能的色谱定量测定装置、定量测定方法以及色谱试验片。特别优选色谱定量测定装置还具备对上述显色程度的测定结果进行演算处理，计算出分析对象物的浓度数值的演算处理装置。本专利技术的测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱定量测定方法包括下述步骤(a)提供具有多个反应区域的色谱试验片，该反应区域上固定有能够与含有上述分析对象物的物质结合的捕集试剂，(b)用含有上述分析对象物的上述液体试样润湿上述色谱试验片，使含有上述分析对象物的物质与上述捕集试剂接触，(c)通过光学测定和图象测定中至少一种，测定上述反应区域中至少2个区域的上述捕集试剂与上述分析对象物特异性结合产生的显色状况，然后对该测定结果进行演算处理，计算出数值化的浓度。本专利技术用于通过光学测定和图象测定中至少一种方法测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱试验片包括上述液体试样可以润湿的润湿部件、上述润湿部件中设置的捕集试剂，上述捕集试剂具有能够与含有上述分析对象物的物质反应并显色的性质，上述捕集试剂以均匀的状态含在上述润湿部件中。特别优选上述色谱试验片具有片状的支持体和设置在上述支持体上的润湿部件，上述润湿部件可以被上述液体试样润湿，上述润湿部件具有在与上述支持体面平行的方向上形成的试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层，上述反应层具有上述反应区域，上述液体试样依次从上述试样添加层、上述标识试剂保持层、上述反应层、上述吸收层中通过。采用这种结构，可以提高免疫色谱法中的定量测定性能。图2表示本专利技术实施方式中色谱定量测定方法的步骤。图3是表示本专利技术实施方式中色谱定量测定装置的色谱试验片结构的侧视图。图4是表示本专利技术的实施方式中反应层的反应区域模式的色谱试验片平面图。图5是表示本专利技术的实施方式中反应层的反应区域其他模式的色谱试验片平面图。图6是表示现有的色谱试验片结构的平面图。专利技术的最佳实施方式本专利技术的一个实施例的色谱定量测定装置是通过分析色谱试验片的显色反应结果，测定液体试样中分析对象物的浓度。该色谱试验片包括片状的支持体以及在上述支持体上层叠的可以润湿的多个润湿部件。上述多个润湿部件设置在与上述支持体面平行的方向上。上述多个润湿部件具有试样添加层、标识试剂保持层、反应层和吸收层。上述反应层具有反应区域，该反应区域上固定有能够与上述液体试样中的分析对象物特异性结合的捕集试剂。分析上述反应层中的显色反应结果。该色谱定量测定装置包括上述色谱试验片、通过光学测定或图象测定定量测定上述反应区域中显色反应程度的显色程度测定手段以及演算处理其测定结果计算出分析对象物的数值化浓度的演算处理装置。采用这种结构，通过测定色谱试验片的反应层上固定有能够与分析对象物特异性结合的捕集试剂的反应区域上的多个部位，不用控制液体试样的浸透状况，就可以正确地测定试验片上的显色反应。结果提高了定量测定性能。特别优选上述色谱定量测定装置中，上述反应区域是在上述反应层上形成的多个斑点形态的部位。上述固定有捕集试剂的反应区域的形状有点状或球状的斑点，多数个点或斑点在反应层上不规则地存在。通过在反应层上设置斑点形态的多个反应区域，根据反应区域与非反应区域的颜色对比可以测定全部反应层上的显色程度。而且，由于反应区域不规则、均匀地存在于反应层上，即使显色反应受液体试样的浸透状况影响时，也可以进行更准确地定量测定。而且，由于以斑点形态固定捕集试剂，可以减少必要的试剂量，降低成本。这样，就可以不受液体试样的浸透状况影响，进行显色反应。特别优选上述反应区域在上述反应层的整个区域内形成。上述固定有捕集试剂的反应区域的形状为面状，在反应层上广泛存在。采用这种结构，反应层的整个区域均为反应区域，可以测定整个反应层上的显色反应。而且，由于在整个反应层上均匀地存在反应区域，即使显色反应受液体试样的浸透状况影响时，也可以更准确地定量测定。可以不受液体试样的浸透状况的影响进行显色反应。特别优选上述反应层上固定的捕集试剂的浓度在所有反应区域是一定的。采用这种结构，显色反应可以达到均匀。由于反应层上固定的捕集试剂的浓度在所有区域均本文档来自技高网...

【技术保护点】
测定液体试样中所含分析对象物浓度的色谱定量测定装置，包括色谱试验片和显色程度测定手段，色谱试验片具有多个反应区域，该反应区域上保持有能够与上述分析对象物发生特异性反应并显色的捕集试剂，显色程度测定手段能够对上述多个反应区域中至少２个 以上反应区域的显色程度进行定量数值化测定，上述显色程度测定手段具有对通过上述捕集试剂与上述分析对象物发生特异性反应显色的上述显色程度进行光学测定和图象测定中至少一种测定的功能。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：高桥三枝，滩冈正刚，田中宏桥，
申请(专利权)人：松下电器产业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]