一种新的多肽--人锌指蛋白73和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人锌指蛋白７３，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人锌指蛋白７３的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人锌指蛋白73，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。锌指蛋白是真核生物体内分布最广的蛋白之一，在人的基因组中就约含有500-800个不同的锌指蛋白，这些蛋白构成了一很大的蛋白家族，即锌指蛋白基因家族。该家族的成员遍及生物体的各个组织及细胞，作为一种转录调控因子在生物体内调控着各种基因的正常转录与表达，参与决定基因在何种组织及何种发育阶段开始转录。编码这类蛋白的基因如发生突变，不但该基因自身不能正常表达，而且受其调节的许多基因也不能正常的进行转录与表达。该蛋白家族的成员通常与生物体一些免疫系统疾病、相关组织的肿瘤及癌症、神经系统疾病等的发生相关。锌指蛋白的蛋白序列中均含有多个由30个氨基酸残基组成的指结构基序，这些指结构在蛋白作用过程中负责与锌离子结合，以形成具有活性的蛋白构型。按其与锌离子结合的结构的不同，可分为以下几类C2H2型、C3HC4型、CCCH型及CCHC型等。其中以C2H2型锌指蛋白的分布最为广泛，该类锌指蛋白在生物体内调控着各种基因的转录与表达，尤其在生物发育过程中，起着极为重要的调控作用。近年，人们已将多种不同的锌指蛋白定位于染色体的特定位点，并以此证实了蛋白在生物体内的功能。在人的第十位染色体上存在着两个相关的锌指基因簇，这两个基因簇是由祖先基因簇复制而来，为KOX系列锌指蛋白，分别命名为锌指基因簇A和锌指基因簇B。这两个锌指基因簇中由多个锌指蛋白结合在一起而组成，这些锌指蛋白在生物体内主要参与三个遗传过程局部基因的复制、基因簇的复制和染色体的重排。其表达异常通常将导致各种相关基因的转录与表达异常及生物体的发育异常。研究发现，KOX系列锌指基因所编码的蛋白均为C2H2型Kruppel相关的锌指蛋白。这些锌指蛋白均在哺乳动物的发育过程中起重要作用，其主要通过与锌离子结合以形成具有活性的蛋白构型，并作为一种转录调节因子调节着生物体内各种细胞的分化与生长。这些蛋白通常与一些发育紊乱性疾病、免疫系统疾病、遗传性疾病，如多发性内分泌瘤、Denys-Drash综合症等的发生密切相关。本专利技术的新的人锌指蛋白与人锌指蛋白HPF2在蛋白水平上有52％的同一性和61％的相似性，两者同为人KOX系列锌指蛋白中的成员，且具有相似的结构与生理学功能。该新的人锌指蛋白在生物体内参与调控各种基因的转录与表达，进而调节各种相关组织及细胞的发育与生长。该蛋白的表达异常通常与生物体内各种相关的发育紊乱性疾病、免疫系统疾病、相关组织的肿瘤及癌症、一些遗传性疾病的发生密切相关。该蛋白还可用于诊断与治疗上述各种相关的疾病。由于如上所述人锌指蛋白73蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人锌指蛋白73蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人锌指蛋白73蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人锌指蛋白73以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人锌指蛋白73的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人锌指蛋白73的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人锌指蛋白73的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人锌指蛋白73的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人锌指蛋白73的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人锌指蛋白73异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中557-2557位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2936位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人锌指蛋白73蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人锌指蛋白73蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人锌指蛋白73表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与人锌指蛋白73结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合人锌指蛋白73本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人锌指蛋白７３，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博道基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]