一种新的多肽——人环管蛋白63和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人环管蛋白６３，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，发育紊乱症，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人环管蛋白６３的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人环管蛋白63，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。细胞之间的相互通讯联系在多细胞的有机体中起着及其重要的作用。由于细胞间存在着精细的分工，一些细胞群体有赖于其他细胞群体，并要求其他细胞群体对其产生应答反应。这种精巧的细胞间通讯网络可以控制细胞的生长、分裂、死亡、分化形成组织以及各种其他的生命过程。在许多种系生物的精子和卵子发育过程中，发育中的精子或卵子通过环管从其周围的细胞里得到营养物质。环管的形成与肌动蛋白纤维有关。现在已经知道有一些基因参与环管的组装和功能，其中一类是含有Kelch结构域的基因家族。Kelch蛋白家族都含有两个共同的结构，在N末段有BTB/POZ区域，在C末段有kelch重复序列。现在已经发现的kelch蛋白家族是肌动蛋白结合蛋白，或与肌动蛋白有关。Kelch蛋白家族在环管形成、神经纤维定位、细胞融合、细胞形态形成等在发育过程中与细胞骨架有关的生理过程中起重要作用。例如，在果蝇中，kelch蛋白被定位在环管的内侧面，它使环管侧面保持紧束的状态。Kelch蛋白突变会造成卵子周围的护卫滋养细胞通过环管向卵子输送胞质这一过程受到阻碍。Kel-1蛋白的缺失会导致幼虫早期的生长停滞。由于在包括人在内的许多生物的精子、卵子形成过程中都发现了环管结构和具有kelch结构的蛋白，因此可以认为kelch蛋白对精卵形成的作用具有普遍意义。又如在脑内发现的kelch蛋白Mayven可能在脑细胞肌动蛋白细胞骨架的动态组织中起作用。本专利技术的人的基因与果蝇kelch蛋白在蛋白水平上有75％的同源性，87％的同一性。其与kelch蛋白家族的特征性结构域---kelch结构域非常相似，且含有kelch结构域中的几个高度保守的氨基酸残基。基于以上各点，故认为本专利技术的新基因为一编码人与kelch蛋白家族kelch结构域相似的基因，命名为人环管蛋白63。并以此推断其与kelch结构域相似，具有相似的生物学功能。由于如上所述人环管蛋白63蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人环管蛋白63蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人环管蛋白63蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人环管蛋白63以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人环管蛋白63的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人环管蛋白63的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人环管蛋白63的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人环管蛋白63的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人环管蛋白63的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人环管蛋白63异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少76％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中45-1772位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2873位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人环管蛋白63蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人环管蛋白63蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人环管蛋白63表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与人环管蛋白63结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合人环管蛋白63的分子。“拮抗剂”或“抑制物”是指当与人环管蛋白63结合时，一种可封闭或调节人环管蛋白63的生物学活性或免疫学活性的分子。拮抗剂和抑制物可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合人环管蛋白63的分子。“调节”是指人环管蛋白63的功能发生改变，包括蛋白质活性的升高或降低、结合特性的改变及人环管蛋白63的任何其它生物学性质、功能或免疫性质的改变。"基本上纯"是指基本上不合天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化人环管蛋白63。基本上纯的人环管蛋白63在非还原性本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人环管蛋白６３，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]