一种新的多肽——人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人亨廷顿蛋白相互作用蛋白１５，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人亨廷顿蛋白相互作用蛋白１５的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。Huntingtin相互作用蛋白(Huntingtin interacting protein,HIP)是一类与Huntingtin蛋白相互作用的蛋白。Huntingtin蛋白的异常表达可引起亨廷顿氏病(Huntington’s disease,HD)。Huntingtin蛋白含有一多聚谷氨酰氨区域，一富集脯氨酸区域，3-4个HEAT重复(Cell,81,811-823,1995),Huntingtin只通过其N端富集脯氨酸片段与各类蛋白(HYPs,HIPs)结合，但其邻近的多聚谷氨酰氨片段越长其结合能力越强(Human MolecularGenetics,1998,Vol.7,No.9 1463-1474)。研究发现，HD的病理发生与发展是由于与HuntingtinN端富集脯氨酸区域相互作用的蛋白(HIP)所触发(HumanMolecular Genetics,1998,Vol.7,No.9 1463-1474)。HIP中有一类为Huntingtin酵母配偶体(HYPs),HYPs中代表性的结构为WW功能域。WW功能域约有35个氨基酸残基组成，由于含有两个非常保守的色氨酸残基和一个脯氨酸残基，故命名为WW功能域(WW domain/WWP domain)。(Biochem.biophys.res.commun.,205:1021-1205；Trends Biochem.Sci.19:531-533(1994))。WW功能域两侧大多富含组氨酸或半胱酸残基，如营养不良蛋白(Dystrophin)，这结构暗示其有结合金属离子的功能。(NatureGenetics 3,283-291)。而WW domain本身在四个保守的芳香族氨基酸残基的包围中具有beta折叠结构。疏水核心和大量带电荷残基都表明此功能域是蛋白和蛋白相互作用的功能域。虽然WW domain存在于功能不同的蛋白中，但都参与细胞的信号传递和调节作用。WW功能域蛋白家族大多与富含脯氨酸的结构域的因子如Huntingtin相互作用，传递信号。(Proc.Natl.Acad.Sci.USA92:7819-7823(1995)。如FBP-11,YAP65中的WW domain分别与各自配体的PPLP motif,PY motif结合。(J.Biol.Chem.,272,17070-17077(1997),(EMBO J.,16,2376-2383(1997))。少数WW domain依赖磷酸化途径，mitotic prolyl异构酶Pin1，泛素结合酶Nedd4中的WW domain与磷蛋白结合。已确证，与磷酸丝氨酸或磷酸苏氨酸结合是Pin1与其底物在体外发挥其生理效应所必须的。(Science,1999 Feb 26,283(5406)1325-1328)。Huntingtin蛋白是胚胎发育，神经形成所必须的蛋白。(Cell,81,811-823,1995),(Nature Genet.,17,404-410)。其突变体多聚谷氨酰胺的延长造成神经系统疾病Huntington’s disease(HD)。(Cell,72,971-983,1993)。目前已知HIPs有参与蛋白拼接功能的HYPA(鼠FBP11同源蛋白)(EMBO.J.,15,1045-1054,1996)，参与蛋白代谢的HYPG(HIP2)，参与特定膜的功能的HIP1(酵母细胞骨架蛋白Sla2p同源蛋白)，以及功能不特定的HYPB,HYPC,HYPD等，这些蛋白中，HYPA,HYPB,HYPC属于WW domain蛋白家族。HYPA存在细胞质和细胞核中。Northern blot探得三种蛋白mRNA在成人和胚胎脑中较为丰富，这暗示含WW domain的HIPs与Huntingtin作用后在体内发挥不同的生理功能，从而调节神经系统的生长，发育。(Human MolecularGenetics,1998,Vol.7,No.9 1463-1474)。通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株以及前列腺组织中，本专利技术的多肽的表达谱与人亨廷顿蛋白相互作用蛋白65的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15。由于如上所述人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中1250-1618位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2452位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人亨廷顿蛋白相互作用蛋白15蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人亨廷顿蛋白相互作用蛋白１５，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]