一种新的多肽——人神经多肽Y蛋白7和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人神经多肽Ｙ蛋白７，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人神经多肽Ｙ蛋白７的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人神经多肽Y蛋白7，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。神经多肽Y是哺乳动物神经系统含量非常丰富、分布极为广泛的一种蛋白多肽。该蛋白多肽最早从猪脑中被分离得到，猪神经多肽Y与存在于内皮细胞中的胰腺多肽及多肽YY两种调控多肽具有较高的同源性。该蛋白多肽在脑神经组织中分布广泛，其可能在神经信号传递及调控过程中发挥重要的作用。在周遍神经系统中，该蛋白多肽在一些与心脏相关的结节组织、冠状血管及心肌纤维等组织中还具有免疫活性。另外，该蛋白多肽还在与上述组织相关的肿瘤，如成嗜硌细胞瘤等细胞中具有免疫活性，其可能在生物体相关疾病的自身免疫过程中亦起着极为重要的调控作用。由此可知，神经多肽Y在哺乳动物神经系统的信息传递及相关的组织代谢过程中起着重要的调控作用，该蛋白的突变或表达异常将导致神经系统的功能异常及相关组织恶性疾病的发生。1982年，Tatemoto等人即从猪脑中克隆得到神经多肽Y的序列片段，并发现其与内皮细胞中的另两种调控多肽具有较高的同源性，该蛋白在猪神经系统的信息传递及调控过程中起着重要的调节作用。1984年，Carolyn等人又从人脑中克隆得到了人神经多肽Y的序列片段，并发现其与猪神经多肽Y具有较高的相似性，两者的蛋白序列中均含有保守的序列片段His-Tyr-Ile-Asn-Leu；且两者的核酸序列中均含有86至174个碱基的5’与3’非编码区。其蛋白由28个氨基酸残基的信号片段、36个氨基酸组成的中心区域及约30个氨基酸残基组成的C末端组成。其亦在脑神经系统中高表达，其可能在神经系统信号的传递与调控过程中起重要作用。由上可知，神经多肽Y是哺乳动物神经系统中普遍存在的一种重要的蛋白，不同生物来源的神经多肽Y，其蛋白序列均具有较高的相似性，由蛋白信号片段与中心序列片段共同组成具有生物活性的完整的蛋白。该蛋白在各种生物体内均参与调控多种神经信号的传递过程，其还在一些心脏组织相关的结节组织、冠状血管及心肌纤维等组织中发挥免疫活性作用，可能在这些组织相关疾病的自身免疫过程中起重要调控作用。该蛋白的突变或表达异常通常将导致相关神经系统疾病的发生相关。其通常与生物体内相关的神经系统紊乱性疾病、相关组织的肿瘤及癌症如成嗜硌细胞瘤等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种相关的疾病。通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本专利技术的多肽的表达谱与人神经多肽Y蛋白11的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人神经多肽Y蛋白7。由于如上所述人神经多肽Y蛋白7蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人神经多肽Y蛋白7蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人神经多肽Y蛋白7蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人神经多肽Y蛋白7以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人神经多肽Y蛋白7的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人神经多肽Y蛋白7的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人神经多肽Y蛋白7的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人神经多肽Y蛋白7的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人神经多肽Y蛋白7的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人神经多肽Y蛋白7异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中466-630位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-870位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人神经多肽Y蛋白7蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人神经多肽Y蛋白7蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人神经多肽Y蛋白7表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人神经多肽Ｙ蛋白７，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]