一种新的多肽——人细胞程序性死亡调控蛋白11和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人细胞程序性死亡调控蛋白１１，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如各种肿瘤、胚胎发育紊乱症、免疫性疾病、神经系统疾病、生长发育障碍性疾病、炎症，血液病，ＨＩＶ感染等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人细胞程序性死亡调控蛋白１１的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--人细胞程序性死亡调控蛋白11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。细胞程序性死亡是一种普遍存在的现象，发生在淋巴细胞、胸腺细胞、肝细胞、皮肤和胚胎发生细胞等多种依赖于激素的组织中。其是由蛋白酶和一些其它特殊蛋白的主动合成所造成的细胞自杀性死亡，与细胞分化增殖一样，是多细胞生物正常发育及自身平衡过程中的一个重要调控步骤。动物的大多数细胞在发育的一定阶段均会出现正常的自然死亡，其不同于一般的细胞坏死，是相关组织的生长、发育的重要自身调控机制，如在手足发育过程中，程序化细胞死亡导致指(趾)间组织的消失而使指(趾)相互分离；淋巴细胞的程序化死亡是确保免疫系统识别自己和异己成分的一个重要部分；脊髓动物中，70％以上的潜在成神经细胞在神经系统发育的特定阶段死亡等。近年的研究还表明，生物体内一些细胞无法进入程序性死亡，将导致相关组织肿瘤及癌症等恶性疾病的发生。因而，细胞的程序性死亡在各种组织及器官的生长发育过程中军起着重要的调节作用，是生物体内自身代谢调节的一种重要方式。生物体生理上的细胞程序性死亡通常由各种细胞外因子，如各种生长因子及肿瘤抑制因子等来调控完成。除此之外，许多环境因素也在细胞的程序性死亡过程中起重要的调节作用，如紫外线、放射线及蛋白抑制子等物质，它们通常通过激活体内相关的蛋白激酶的活性，来调控整个细胞程序性死亡过程的进行。c-JunN末端激酶(JNK1)即是其中的一种，又称之为环境激活蛋白激酶，其在体内参与各种信号传导过程，受周围环境变化、促有丝分裂因子等多种因素的影响，以调控一些细胞的分化及程序性死亡过程的进行。该蛋白在体内的作用活性往往还需相应的调控蛋白的共同作用来完成，这些蛋白在体内通过激活JNK1蛋白激酶的作用活性，来调控相应的细胞程序性死亡过程的进行。人们已克隆得到多种不同来源的细胞程序死亡调控蛋白，1998年，Sun等人又从鸡中克隆得到了P52蛋白，该蛋白亦是一种细胞程序死亡调控因子，在体内作为JNK1激酶的上游调控因子调控激酶的作用活性，以最终控制整个细胞死亡过程的进行。该蛋白在胚胎的心脏、肝脏等组织的表达量远高于脑、肌肉等组织；而在成体的肝组织中表达量最低，睾丸组织中表达量最高。由此可知，该蛋白在胚胎发育早期的心脏、肝脏等组织的发育过程及成体的生殖系统的发育过程中起着重要的调控作用，该蛋白的突变或表达异常通常与一些胚胎发育紊乱性疾病、恶性胚胎瘤、生殖系统发育不良、不孕症及相关组织肿瘤及癌症等疾病的发生密切相关。本专利技术的人的基因与已知的鸡细胞程序性死亡调控蛋白P52在蛋白水平上有78％的同一性和89％的相似性，且与P52具有相似的结构特征。基于以上各点，故认为本专利技术的新基因为人的细胞程序性死亡调控蛋白，命名为人细胞程序性死亡调控蛋白11。并以此推断其与P52具有相似的生物学功能。该蛋白参与生物体内多种重要的信号传导过程，调控着相关细胞在体内的分化与程序性死亡过程。其在生物体早期胚胎的心脏、肝脏及成体生殖细胞等组织中均有表达，该蛋白的突变或表达异常通常与生物体内一些生殖系统及早期胚胎发育紊乱性疾病、恶性胚胎瘤及相关组织的肿瘤、癌症等疾病的发生密切相关。其还可用于诊断及治疗上述各种疾病。由于如上所述人细胞程序性死亡调控蛋白11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人细胞程序性死亡调控蛋白11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人细胞程序性死亡调控蛋白11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--人细胞程序性死亡调控蛋白11以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人细胞程序性死亡调控蛋白11的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人细胞程序性死亡调控蛋白11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人细胞程序性死亡调控蛋白11的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--人细胞程序性死亡调控蛋白11的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--人细胞程序性死亡调控蛋白11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人细胞程序性死亡调控蛋白11异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少79％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中506-805位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-911位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人细胞程序性死亡调控蛋白11蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人细胞程序性死亡调控蛋白11蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人细胞程序性死亡调控蛋白11表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人细胞程序性死亡调控蛋白１１，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]