一种新的多肽——人大麻醇受体11和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人大麻醇受体１１，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如神经精神紊乱性疾病，免疫性疾病，发育紊乱症，炎症，各种肿瘤，ＨＩＶ感染等，尤其是用于治疗精神活性药物所致的精神障碍性疾病等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人大麻醇受体１１的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--人大麻醇受体11，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。大麻醇受体蛋白是生物体内广泛存在的一种蛋白受体，其在生物的脑、心脏、肺、前列腺、卵巢等组织中均有表达。在人体内存在着两种不同的大麻醇受体蛋白，中枢大麻醇受体及周遍大麻醇受体。其中中枢大麻醇受体蛋白在人的中枢神经系统、脑、心脏、前列腺、睾丸等组织中均有表达；而周遍大麻醇受体蛋白在中枢神经系统无表达，其在免疫系统中则有较高的表达量。两者分别在上述各种组织的发育与作用过程中发挥重要的中间调控作用。中枢大麻醇受体蛋白主要介导大麻在体内的药理活性，其表达异常将直接影响大麻在体内的功能，从而引发各种相关的神经系统紊乱性疾病，如图雷特氏综合症、强迫行为紊乱症、帕金森综合症、早老性痴呆等；周遍大麻醇受体蛋白则在生物体的免疫系统中高表达，该蛋白通过与百日咳毒素敏感的GTP结合蛋白协同作用，以调控体内腺苷酸环化酶的作用活性，进而调控各种相关的免疫系统反应。该蛋白的突变或表达异常将直接导致体内一些免疫系统反应的正常进行，进而引发各种相关的免疫系统紊乱型疾病及各组织、细胞的炎症反应。1995年，Galiegue等人从人体内分别克隆得到了一中枢大麻醇受体及一周遍大麻醇受体，并对两者的表达与功能进行了分析。同年，Bouaboula等人又从人体内分别克隆得到了一中枢大麻醇受体及周遍大麻醇受体，并发现，两者与已知的大麻醇受体蛋白具有相似的结构与功能特征。研究发现，所有的大麻醇受体蛋白其蛋白序列中均含有七个跨膜结构域，这些结构域是受体与相关蛋白结合发挥体内作用活性的中心区域。这些结构域中特殊氨基酸位点的突变或表达异常将导致受体蛋白的作用异常，这通常与生物体内一些神经系统紊乱性疾病及免疫系统疾病的发生密切相关。由上可知，大麻醇受体蛋白在生物体内参与调控多种重要的神经系统及免疫系统发育及作用过程，其中中枢大麻醇受体主要在神经系统的发育过程起重要的调节作用，而周遍大麻醇受体则在免疫系统中发挥重要作用。中枢大麻醇受体的突变或表达异常通常将导致体内神经系统发育及功能的异常，其通常与各种相关的神经系统紊乱型疾病的发生密切相关。该蛋白还可用于诊断及治疗各种相关的疾病。通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本专利技术的多肽的表达谱与人大麻醇受体的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人大麻醇受体11。由于如上所述人大麻醇受体11蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人大麻醇受体11蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人大麻醇受体11蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--人大麻醇受体11以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人大麻醇受体11的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人大麻醇受体11的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人大麻醇受体11的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--人大麻醇受体11的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--人大麻醇受体11的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人大麻醇受体11异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中740-1045位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1800位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人大麻醇受体11蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人大麻醇受体11蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗神经精神紊乱性疾病，免疫性疾病，发育紊乱症，炎症，各种肿瘤，HIV感染等，尤其是用于治疗精神活性药物所致的精神障碍性疾病或其它由于人大麻醇受体11表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人大麻醇受体１１，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]