一种新的多肽——人核糖体蛋白S4-36和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人核糖体蛋白Ｓ４－３６，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人核糖体蛋白Ｓ４－３６的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--人核糖体蛋白S4-36，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。核糖体是细胞的主要成分之一，其在生物体内不断地沿着mRNA移动，以极快的速度合成肽链，是生物体将mRNA翻译成肽链的主要场所。核糖体蛋白按照一定的顺序与rRNA结合以及蛋白质之间的相互结合，组装成两个核糖体亚基---一个大亚基和一个小亚基，其中大亚基约是小亚基的两倍，而rRNA直接参与mRNA和tRNA的结合。核糖体和它的辅助因子结合在一起，拥有蛋白合成各阶段所需要的全部酶活性。这些酶活性只有在核糖体整体结构存在的情况下才具备，核糖体蛋白质和rRNA都不能单独参与蛋白合成反应。不论是真核生物还是原核生物，其核糖体都由大小两个亚基组成，各种核糖体蛋白质在大小亚基内都有特定的位置，rRNA是其中的骨架。有的核糖体蛋白直接与rRNA结合，这些蛋白与rRNA结合后改变了rRNA的构象，从而使另一些蛋白再与rRNA结合，是维持核糖体构象的重要组成成分；而有些核糖体蛋白不直接与rRNA结合，而是结合在其他蛋白质上，这些蛋白在生物体内与其他蛋白协同作用，使核糖体发挥正常的生理功能。所有的核糖体蛋白构成了一个独立的蛋白家族，即核糖体蛋白家族。许多真核生物及古细菌的核糖体蛋白按其不同的序列相似性可分为不同的类型。核糖体蛋白S4e就是其中的一类。哺乳动物的S4蛋白含有两个高度保守的蛋白异构体，一种由Y染色体上的一个基因编码，一个由X染色体上的一个基因编码。这两个不同染色体编码的S4蛋白，在序列上亦有很高的同源性，且均是核糖体亚单位组装的重要分子，其缺失将导致亚单位中其它一些蛋白的缺失，从而无法形成正常的、具有活性功能的核糖体，即影响蛋白的翻译。核糖体蛋白S4均由233-210个氨基酸残基组成，且这些蛋白的N末端均含有一由15个氨基酸组成的如下所示的一致性序列片段H-X-K-R---X-P-X(2)--X--X-；这一序列片段中由四个氨基酸残基是高度可变的残基。该序列片段是蛋白与核糖体rRNA及其它核糖体组成蛋白结合的中心区域，该区域特殊位点的突变将导致细胞无法形成正常的核糖体亚单位，即影响一些蛋白的正常表达。因而，该蛋白在生物体蛋白翻译的过程中起着极为重要的作用，其与其它各种蛋白协同作用以调控生物体内一些蛋白的表达。该蛋白的表达异常将引起一些与蛋白翻译水平调控异常相关的疾病。其通常与生物体内各种发育紊乱症、代谢紊乱症、一些肿瘤及癌症的发生等疾病的发生密切相关。另据研究发现，因在哺乳动物中S4e蛋白的表达分别由X和Y染色体上的不同基因表达，因而其还可能与一些先天性性器官发育不良症的发生相关，如卵巢发育不全等。通过基因芯片的分析发现，在胸腺、睾丸、肌肉、脾脏、肺、皮肤、甲状腺、肝、PMA+的Ecv304细胞株、PMA-的Ecv304细胞株、未饥饿的L02细胞株、砷刺激1小时的L02细胞株、砷刺激6小时的L02细胞株前列腺、心、肺癌、胎膀胱、胎小肠、胎大肠、胎胸腺、胎肌、胎肝、胎肾、胎脾、胎脑、胎肺以及胎心中，本专利技术的多肽的表达谱与人核糖体蛋白S4-8的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人核糖体蛋白S4-36。由于如上所述人核糖体蛋白S4-36蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人核糖体蛋白S4-36蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人核糖体蛋白S4-36蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--人核糖体蛋白S4-36以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人核糖体蛋白S4-36的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人核糖体蛋白S4-36的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人核糖体蛋白S4-36的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--人核糖体蛋白S4-36的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--人核糖体蛋白S4-36的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人核糖体蛋白S4-36异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO:1中382-1368位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-1438位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人核糖体蛋白S4-36蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人核糖体蛋白S4-36蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人核糖体蛋白S4-36表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人核糖体蛋白Ｓ４－３６，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]