一种新的多肽——人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人层粘连蛋白γ３链（ＬＡＭＣ３）６９．８５，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如神经性疾病、肿瘤生长、发育紊乱症、炎症及修复异常、免疫性疾病等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人层粘连蛋白γ３链（ＬＡＭＣ３）６９．８５的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。膜中的大型糖蛋白，它是异源三聚体分子(Ekblom，P.，and R，Timpl.1996.The Laminins.In Cell Adhesion and Communication.Vol.2.C.Goridis.editor.Harwood Academic Publishers，The Netherlands.321 pp.)。层粘连蛋白是十字交叉型的，有一个单一的长臂，自三条遗传上不同的多肽链的卷曲螺旋作用中伸出，还有三个N-端短臂。三个亚基链被称为alpha，beta，以及gamma。这三条链都具有被N-端短臂中的多重类表皮生长因子域隔开的球型域。它们的长臂部分由七个alpha-螺旋卷曲螺旋蛋白中典型的重复构成。层粘连蛋白广泛的功能衍生自它们的结构以及信号作用，它们与形成以及稳固基底膜，稳定细胞与基底膜的连接以及通过占据细胞表面受体来介导细胞骨架重排有关(Ryan，M.C.，R.Tizard，D.R.VanDevanter，J.Biol.Chem.26922779-22787，(1994))。近来发现一种新的gamma链，gamma3链是分布在传统的基底膜以外的新的层粘连蛋白类型，该链中含有gamma链中所有的区域，包括两个共有的糖基化位点以及一个巢蛋白结合位点，这些都表明含有gamma3蛋白的层粘联蛋白存在于稳固的基质中。Gamma3链广泛表达于皮肤，心脏，肺，以及生殖道中。在皮肤，gamma3蛋白存在于神经穿刺位点的皮层接点的基底膜中。Gamma3链还是肺，输卵管，附睾，输精管以及生精小管纤毛上皮细胞的顶端表面的主要成分。含有gamma3的层粘连蛋白在各种上皮组织顶端表面的分布说明它们不存在于超微结构定义的基底膜中。这些顶端层粘连蛋白在这些细胞中的纤毛进程的形态发生以及结构稳定性中十分重要。Gamma3基因被定位于染色体的9q31-q34位上，这一区域与四种不同程度的神经功能异常相关福山性先天性肌营养不良(综合征)(唯一中常染色体隐性遗传性肌萎缩，婴儿尤为明显，肌异常类似杜兴肌营养不良，患者智力迟钝，伴多小脑回及其他大脑异常)；肌肉-眼睛-脑综合征；沃-瓦综合征(一种先天性综合征，通常在一岁前即死亡，包括脑积水，无脑回，各种眼异常，诸如视网膜发育不全，角膜混浊或小眼，有时为脑突出)；以及眼点-21视网膜炎伴随耳聋(RP-21)。而gamma3基因尤其与RP-21相关，该基因突变或缺失会引发RP-21(Manuel Koch，Pamela F.Olson，Journal of Cell Biology，Vol.145，No.3，(1999)605-617)。通过基因芯片的分析发现，在膀胱粘膜、PMA+的Ecv304细胞株、LPS+的Ecv304细胞株胸腺、正常成纤维细胞1024NC、Fibroblast，生长因子刺激，1024NT、疤痕成fc生长因子刺激，1013HT、疤痕成fc未用生长因子刺激，1013HC、膀胱癌建株细胞EJ、膀胱癌旁、膀胱癌、肝癌、肝癌细胞株、胎皮、脾脏、前列腺癌、空肠腺癌、贲门癌中，本专利技术的多肽的表达谱与人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85。由于如上所述人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中98-2005位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-2347位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人层粘连蛋白γ3链(LAMC3)69.85表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人层粘连蛋白γ３链（ＬＡＭＣ３）６９．８５，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]