一种氧化苏木色精液及其制备方法和用途技术

一种氧化苏木色精液及其制备方法和用途，所述氧化苏木色精液为深棕红色的透明液体，制备氧化苏木色精液的方法包括：向原料苏木色精乙醇液中加入碘酸盐，经加温沸腾回流反应，过滤，滤液中加入丙三醇而得。本发明专利技术加工方法简便，它与媒染液配制得到的含媒染液的苏木色精液具有较强的细胞核亲和特异性，可使细胞核呈现细腻而清晰层次分明的蓝黑颜色，组织间质胶原纤维无色。并且，苏木色精液稳定性好，易保存。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种化学试剂，特别是一种氧化苏木色精液及其制备方法和用途。苏木色精液是一种组织细胞学用染色试剂，广泛应用于生物医学临床病理诊断、生物形态学教学与研究领域，以往配制苏木色精液所需的氧化苏木色精为固体产品，其加工工艺复杂，需要时临时配制，使用不便，试剂染色选择性较差，核与间质成份分化不清，而且其稳定性不理想，保存期较短，因此有必要提供一种稳定性好的氧化苏木色精液。本专利技术的目的是提供一种氧化苏木色精液及其制备方法和用途，氧化苏木色精液与媒染液混合得到苏木色精液是组织细胞学用染色试剂，本专利技术制备氧化苏木色精液的方法简便，可实现工业化生产，产品稳定性好，制得苏木色精试剂具有较强的细胞核亲和特异性。为实现上述目的，本专利技术采取以下设计方案这种氧化苏木色精液为深棕红色的透明液体，以常规薄层层析法检查时呈单一的深棕红色斑点，层析液配方为95％乙醇82毫升，冰醋酸18毫升，层析硅胶为薄层层析硅胶G(60型)。氧化苏木色精液的工艺包括苏木色精的乙醇溶液中加入碘酸盐，加温沸腾回流反应，所述的苏木色精乙醇溶液的浓度为10—25％重量百分，配制上述溶液的乙醇浓度在80—97％之间，碘酸盐的用量与原料苏木色精重量之比为1—4∶10，所述加温回流反应至反应液呈深棕红色透明液体，可用常规薄层层析法检查反应程度，至呈单一的深棕红色斑点时，终止反应，过滤后在滤液中加入丙三醇，丙三醇∶乙醇=1∶1—2(体积比)。以氧化苏木色精液配制苏木色精液，所述苏木色精液中有媒染液，媒染液为无机盐溶液或有机盐溶液或磷钼酸或磷钨酸。一种氧化苏木色精液配制的苏木色精液，该苏木色精液中含1—5份氧化苏木色精液，6—10份媒染液(体积比)，所述媒染液的组成为蒸馏水 2000—4000毫升丙三醇 100—500毫升95％乙醇1000—3000毫升E冰醋酸 200—500毫升12水硫酸铝钾或12水硫酸铝铵的用量控制在占上述几种液体混合液浓度的0.01-0.21M之间。本专利技术提供的苏术色精液(含媒染液)中的氧化苏木色精的分子式 本专利技术优点本专利技术制备氧化苏木色精液的方法简便，可实现工业化生产，产品稳定性好，制得苏木色精试剂具有较强的细胞核亲和特异性。下面结合实施例对本专利技术作进一步说明。实施例1一、称取苏木色精固体粉末20克，溶解于80％乙醇100毫升中，充分搅拌完全溶解，加入碘酸钠粉末4克，室温下充分搅拌，将反应混悬液倒入回流反应器中，加热沸腾，回流时间2小时，这时反应液呈深棕红色的透明液，以玻璃吸管吸取反应液在白色定量滤纸上涂布，呈现深咖啡色，也可用常规薄层层析法检查反应程度，至呈单一的深棕红色斑点(层析液配方为95％乙醇82ml、冰醋酸18ml，层析硅胶为薄层层析硅胶G(60型)，即可终止反应。自然冷却至室温，过滤，取得滤液，取丙三醇80毫升加入滤液中，充分搅拌混合得含丙三醇滤液，即氧化苏木色精液。本工艺中采用加热沸腾回流目的是为了加速氧化反应速率，并且去除过量的碘酸盐。二、媒染液制备取蒸馏水4000毫升，加入12水硫酸铝钾或12水硫酸铝铵500克，充分溶解，依次加入95％乙醇3000毫升，丙三醇500毫升，冰醋酸500毫升，混匀而得。三、苏木色精液配制取氧化苏木色精液4份加入媒染液7份，充分搅拌混匀而得。它为较深的橙红色透明液体，均匀、挂壁性强，PH值2—4。本专利技术提供的氧化苏木色精液还可以与其他公知的无机盐或有机盐溶液(媒染液)配合使用，例如将实施例1中硫酸铝钾换成硫酸铁铵或硫酸铝或氯化铝。还有其他媒染剂，例如三氯化铁或醋酸铁溶液等。还有与磷钨酸或磷钼酸配合使用，用于神经细胞染色等。实施例2一、称取苏木色精固体粉末10克，溶解于95％乙醇100毫升中，充分搅拌完全溶解，加入碘酸钾粉末2克，室温下充分搅拌，将上述混悬液倒入回流反应器中，加热至沸腾，回流3小时，其他工序同实施例1。二、媒染液制备取蒸馏水2000/毫升，加入12水硫酸铝钾250克，充分溶解，依次加入丙三醇100毫升，95％乙醇1000毫升，冰醋酸200/毫升，混匀。三、苏木色精液配制取氧化苏木色精液3份加入媒染液7份，充分搅拌混匀而得。本专利技术提供的苏木色精液(内含媒染液)用于细胞涂片染色、组织切片染色、组织化学细胞核复染。上述试验的相关试剂有0.5％伊红染液，0.01M氯化铵返蓝液，0.01M柠檬酸分化液。按常规苏木精伊红染色(HE)方法对细胞涂片染色，结果是细胞核呈现清晰层次分明的蓝黑色，细胞质呈靓丽的伊红色、粘液呈层次分明的粉红色；按常规方法对切片染色，结果是细胞核呈现清晰层次分明的蓝黑色，细胞质呈靓丽的红色，间质纤维呈层次丰富的淡红色(见附图说明图1)。按常规方法对组织化学细胞核复染，结果是依染色时间不同细胞核呈现深、浅不一的蓝黑色，细胞核轮廓清晰、明确。本专利技术苏木色精液(含媒染液)的染色性能试验方法1、石腊切片入二甲苯脱腊二次，每次10分钟。2、切片入无水乙醇脱苯二次，每次5分钟。3、切片入95％乙醇脱苯二次，5分钟。4、略控干乙醇，入苏木色精液(含媒染液)20分钟。5、水涮洗2秒。6、入0.01M柠檬酸水溶液分化2秒。7、水涮洗。8、入0.01M氯化铵快速返蓝液10—30秒9、水涮洗。10、95％乙醇脱水一次2分钟11、无水乙醇脱水二次，每次2分钟12、二甲苯脱乙醇透明二次。每次2分钟，中性光学树脂胶封固，加盖玻璃盖物片。13、结果在40—100倍光学显微镜下观察细胞核被特异性染色，呈现细腻而清晰层次分明的蓝黑色，组织间质胶原纤维无色。权利要求1.一种氧化苏木色精液，其特征在于它为深棕红色的透明液体，以常规薄层层析法检查时呈单一的深棕红色斑点，层析液配方为95％乙醇82毫升，冰醋酸18毫升，层析硅胶为薄层层析硅胶G(60型)。2.一种制备权利要求1所述的氧化苏木色精液的工艺，其特征在于它包括苏木色精的乙醇溶液中加入碘酸盐，加温沸腾回流反应，所述的苏木色精乙醇溶液的浓度为10—25％重量百分，配制上述溶液的乙醇浓度在80—97％之间，碘酸盐的用量与原料苏木色精重量之比为1—4∶10，所述加温回流反应至反应液呈深棕红色透明液体，而且以常规薄层层析法检查时呈单一的深棕红色斑点时，终止反应，过滤后在滤液中加入丙三醇，丙三醇乙醇=1∶1—2(体积比)。3.根据权利要求2所述的制备权利要求1所述的氧化苏木色精液的工艺，其特征在于所述的碘酸盐为碘酸钠或碘酸钾。4.一种用权利要求1所述的氧化苏木色精液配制的苏木色精液，其特征在于所述苏木色精液中有媒染液，媒染液为无机盐溶液或有机盐溶液或磷钼酸或磷钨酸。5.根据用权利要求4所述的氧化苏木色精液配制的苏木色精液，其特征在于该苏木色精液中含1—5份氧化苏木色精液，6—10份媒染液(体积比)，所述媒染液的组成为蒸馏水 2000—4000毫升丙三醇 100—500毫升95％乙醇1000—3000毫升E冰醋酸 200—500毫升12水硫酸铝钾或12水硫酸铝铵的用量控制在占上述几种液体混合液浓度的0.01-0.21M之间。全文摘要一种氧化苏木色精液及其制备方法和用途,所述氧化苏木色精液为深棕红色的透明液体,制备氧化苏木色精液的方法包括:向原料苏木色精乙醇液中加入碘酸盐,经加温沸腾回流反应,过滤,滤液中加入丙三醇而得。本专利技术加工方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种氧化苏木色精液，其特征在于：它为深棕红色的透明液体，以常规薄层层析法检查时呈单一的深棕红色斑点，层析液配方为９５％乙醇８２毫升，冰醋酸１８毫升，层析硅胶为薄层层析硅胶Ｇ（６０型）。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：韩亚京，
申请(专利权)人：韩亚京，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]