一种新的多肽--转座元蛋白14.41和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－转座元蛋白１４．４１，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如染色体病、单基因遗传病、发育紊乱等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的转座元蛋白１４．４１的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——转座元蛋白14.41，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。转座是指基因在基因组内不同区域转移，这些可转移成分称为转座元，其作用过程主要包括转座元本身的复制和基因组靶点序列的断裂以及随后的倍生。转座元插入后，使靶点内的基因失活，但它可造成直接或间接的基因重排，真核生物中的转座成分称为返座元。许多RNA聚合酶III的转录产物都可以转座，这些返座元的拷贝数极高，长散布核因子Lls或LINEs是遍及哺乳动物基因组中的DNA高度重复序列，虽然人类基因组中有100,000个L1，但大部分由于被切断、重组或无义突变而失活。1997年，Donna M.Sassaman等人克隆出两个L1.2亚家族的新成员——L1.3和L1.4。L1家族成员之间的核酸差异仅为0.6％，氨基酸差异也不到1％，它们一般长6.0kb，含有具一个内部启动子的5′端非编码区，两个开放阅读框(ORF1和ORF2)，及以poly A结尾的3′末端，其中ORF1编码40KD的核苷酸结合蛋白，而ORF2的产物具核酸内切酶活性及反转录酶活性。L1家族成员散布于人类基因组，无特异的染色体定位，它们大部分含两个AccI位点，其两端各一个(D.M.S.)，大多数L1s都一个6kb的Acc I片段，平均每个基因组含有9个L1s的拷贝。L1s在DNA双链修补中可作为分子结合靶物。L1.3和L1.4分别定位在14号及9号染色体上，其基因频率分别为0.30和0.15，它们具完整的ORFs，并与L1.2具几乎一致的序列，它们产物的ORF2与L1.2分别相差仅4个和6个氨基酸，也具有反转录酶活性，而且其发生返座作用的频率远高于L1.2，至少是它的5倍。转座作用在原核、真核生物中均普遍存在，真核生物特别是哺乳动物中的返座现象，使真核生物具有很大的流动性，既可以使某些基因失活，又可以激活某些基因，甚至产生新的基因活性。这在真核生物基因组的进化过程中起了很大的作用。若表达异常，会导致各种疾病的发生。我们发现的新基因与上述L1返座元具有高的类似性，它们的相似性为86％，活性部位的同源性为92％。这两者具类似的核酸序列，其蛋白表达产物亦相似，因而认为该新基因是一L1返座元基因，命名为转座元蛋白14.41。由于如上所述转座元蛋白14.41蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的转座元蛋白14.41蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新转座元蛋白14.41蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——转座元蛋白14.41以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码转座元蛋白14.41的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码转座元蛋白14.41的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产转座元蛋白14.41的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——转座元蛋白14.41的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——转座元蛋白14.41的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与转座元蛋白14.41异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中2323-2718位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-3090位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制转座元蛋白14.41蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与转座元蛋白14.41蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于转座元蛋白14.41表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与转座元蛋白14.41结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合转座元蛋白14.41的分子。“拮抗剂”或“抑制物”是指当与转座元蛋白14.41结合时，一种可封闭或调节转座元蛋白14.41的生物学活性或免疫学活性的分子。拮抗剂和抑制物可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－转座元蛋白１４．４１，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]