一种新的多肽--人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人高尔基体－溶酶体膜泡运输蛋白６７．８７，码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人高尔基体－溶酶体膜泡运输蛋白６７．８７的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。在细胞内，分泌型蛋白、多数细胞质膜的膜蛋白都是在粗面内质网上合成，经高尔基体的加工和分装通过膜泡运输的方式输送到细胞表面或者溶酶体等细胞器。高尔基体在细胞内的主要功能是将内质网合成的多种蛋白质进行加工、分类与包装，然后分门别类地运送到细胞特定的部位或分泌到细胞外，因此，它是细胞内大分子运输的主要交通枢纽，运送过程主要通过膜泡的运动来实现。从高尔基体到溶酶体膜泡运输过程是一个十分复杂的过程，在酵母中就至少发现25种以上与膜泡运输有关的基因，包括Sec1p、Vps33p、Vps45p等。目前已经找到的Vps33p的哺乳动物同族体包括鼠的vps33a(r-vps33a)和鼠的vps33b(r-Vps33b)以及人的Vps45p(h-Vps45p)，类似于酵母细胞中的Vps45p。这三种哺乳动物蛋白参与高尔基体和溶酶体之间的膜泡蛋白运输，和酵母中类似蛋白的功能相同。在酵母膜泡运输有关蛋白中，Sec1p、Vps33p、Vps45p和Slylp等组成了一个蛋白家族，与酵母分泌的特定阶段上膜泡的运输机制有关。Sec1p的哺乳动物同族体也已经发现，包括n-Sec1，它能够调节接合膜泡与神经末端的连接(Hataetal.，1993；Garcia et al.，1994；Pevsner et al.，1994a，b)，另外还有鼠的r-vps33a和r-vps33b。这些人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白的发现为高尔基体和溶酶体之间的膜泡运输的研究提供了工具，蛋白向溶酶体的运输会由于神经变性失常而被打断，导致的疾病比如阿尔茨海默氏病(Alzheimer’sdisease，进行性老年痴呆症)，以及由朊病毒引起的脑疾。膜泡对独特的细胞内代谢区域的专门化运输导致了该家族的蛋白在进化过程中产生一定的差异。采用Northern分析，发现这些基因在所有的机体组织中都有表达(脑、肺、肝、骨骼肌、肾、睾丸等)，r-vps33b的转录产物长度在各种组织中都为2.8Kb，而另外有一些vps基因在各种组织中会产生不同长度的转录产物。本专利技术的多肽与上述的膜泡运输蛋白Vps33b有96％的相同性，98％的相似性，并且包含膜泡运输蛋白家族特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的膜泡运输蛋白，具有与膜泡运输蛋白Vps33b相似的生物学功能，并命名为人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87。由于如上所述人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少97％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中340-2193位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-2530位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人高尔基体-溶酶体膜泡运输蛋白67.87表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人高尔基体－溶酶体膜泡运输蛋白６７．８７，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]