一种新的多肽——人的线粒体翻译起始因子IF-2mt35.97和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－人的线粒体翻译起始因子ＩＦ－２ｍｔ３５．９７，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如心肌梗塞、代谢性白内障、各种感染、糖尿病、肿瘤等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人的线粒体翻译起始因子ＩＦ－２ｍｔ３５．９７的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。在原核生物和真核生物的细胞中，蛋白质的生物合成的起始已经被广泛的研究过。在起始过程中，在依赖GTP的行为中，起始因子2(IF-2)促进起始因子tRNA同小的核糖体亚基的结合。原核生物的IF-2是一个分子量为78000-97000的单多肽链。在依赖mRNA的行为中，它促进FMet-tRNA结合30S的核糖体亚基。真核生物的IF-2是一个分子量为145000的三聚体蛋白(Pain，V.M，1986，Biochem.J.235，625-637)。它负责Met-tRNA结合40S亚基。最近我们发现了一个新的人的线粒体翻译起始因子2(IF-2mt)。它的mRNA含有一个270个碱基对的5′未翻译前导序列。它含有三个ATG三联体，都是位于框外，它同IF-2mt起始密码子相关。每一个ATG标记短的上游开放阅读框架(uORF)的开始。实验表明，uORF强烈的抑制蛋白质编码序列的上游的翻译(Hinnebusch，a.g.，1990，Trends Biochem.Sci.15，148-152)，IF-2mt开放阅读框架的翻译被这些uORF的存在而下调。它有一个2181个碱基对的开放阅读框架，编码727个氨基酸蛋白。IF-2mt的翻译起始密码子是AUG。它还含有一个超过60个残基的聚酰胺信号。大多数的线粒体蛋白质在细胞质中是以前体的形式被合成的。大多数的前体携带氨基末端的前序列，它含有定位于线粒体中的信息。线粒体蛋白的前序列富含带正电的残基，缺乏酸性残基，大多数含有羟基化残基。从氨基末端开始的人的肝的IF-2mt 30个氨基酸含有基础性的残基，包括两个亮氨酸，四个精氨酸，两个羟基氨酸。实验表明，人的IF-2mt的成熟形式的多肽序列同2/3的原核生物的IF-2s的羧基末端有广泛的同源性。存在IF-2的G区域中的选择性的β平板/α螺旋二级结构保留在IF-2的中心区域。在进化过程中，IF-2的G区域是高度保守的。在心脏，肝脏，骨骼肌肉和肾脏中都有丰富的IF-2mt的转录水平，同时在脑，前列腺，脾脏，肺有低水平的IF-2mtmRNA。人的IF-2mt同蛋白质的翻译的起始有关，如果表达异常或突变，将影响蛋白的翻译，最终影响蛋白质的合成，从而导致相关性疾病的发生。通过基因芯片的分析发现，在胎脑、原液培养的L02细胞株、0.5％ FBS培养液37.C饥饿的L02细胞株、胎肾、直肠癌，胎肝、成人肝、肝癌、胎肺、胎脾、胎心、成人心、成人睾丸、胎胃、成人胃中，本专利技术的多肽的表达谱与人的线粒体翻译起始因子IF-2mt的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97。由于如上所述人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中23-1006位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1546位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人的线粒体翻译起始因子IF-2mt 35.97表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人的线粒体翻译起始因子ＩＦ－２ｍｔ３５．９７，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]