一种新的多肽——新的细胞周期调节蛋白9.35和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－新的细胞周期调节蛋白９．３５，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的细胞周期调节蛋白９．３５的多核苷酸的用途。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——新的细胞周期调节蛋白9.35，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。前体mRNA的剪辑是由一个多分子复合物剪辑体催化完成的。富含丝氨酸及精氨酸的蛋白(简称SR蛋白)是其中的一个重要元件，它在剪辑体的形成及可变剪辑中起关键作用。SR蛋白由至少一个RNA识别motif和SR domain构成。它们聚集于核内一个称作speckle的结构中。(Speckle对激酶及磷酸化抑制剂十分敏感，其大小随转录活性而变化。(1)speckle元件即SR蛋白的可逆性磷酸化能控制其在局部的浓度，从而调节可变剪辑。现已发现多种SR蛋白激酶，最近发现CLK(CDC-like kinase)家族的所有成员都具有使SR蛋白磷酸化的功能。CLK家族是一种具有使丝/苏氨酸及酪氨酸磷酸化的双重功能的蛋白激酶(2)(3)该家族包括KNS1、AFC1、AFC2、AFC3、hCLK，mCLK等成员。它们除激酶区同源外，在激酶功能区内都有一个EHLAMMERILGPLP区。这个区域参与了底物的特异性。(4)在人类中目前发现3个成员clk1(5)clk2、clk3(6)hCLK家族的结构特点如下富含碱性氨基酸的N端，除一段同源性很高的核定位序列外，其它区域同源程度较低。C端同源性较高，是所有蛋白激酶共有的催化功能区。其中包含15个丝/苏氨酸蛋白激酶所特有的氨基酸残基。此外，一些可被PKA，PKC及酪氨酸激酶进一步修饰的磷酸化位点大部分处于催化功能区之前的N端区。目前发现鼠的CLK的发育变化是在RNA加工这个层次上进行的。它有长短不同的两个转录本，短的不具有激酶活性(7)人CLK也有类似情况。鼠的两种转录本在快速增生及未分化的干细胞种均可检测到(8)而在分化好的细胞仅有长转录本。(7)这说明CLK与细胞的发育、分化有关。CLK通过对SR蛋白的磷酸化，参与前体mRNA剪辑位点的选择，使蛋白在不同的发育阶段、不同的组织有其特异的表达形式。CLK可能在与细胞增生、分化的疾病如肿瘤等有重要作用。通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本专利技术的多肽的表达谱与新的细胞周期调节蛋白的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为新的细胞周期调节蛋白9.35。由于如上所述新的细胞周期调节蛋白9.35蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的新的细胞周期调节蛋白9.35蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新新的细胞周期调节蛋白9.35蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——新的细胞周期调节蛋白9.35以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码新的细胞周期调节蛋白9.35的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码新的细胞周期调节蛋白9.35的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产新的细胞周期调节蛋白9.35的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——新的细胞周期调节蛋白9.35的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——新的细胞周期调节蛋白9.35的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与新的细胞周期调节蛋白9.35异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中140-397位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1639位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制新的细胞周期调节蛋白9.35蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与新的细胞周期调节蛋白9.35蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于新的细胞周期调节蛋白9.35表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与新的细胞周期调节蛋白9.35结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合新的细胞周期调节蛋白9.35的分子。“拮抗剂”或“抑制物”是指本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－新的细胞周期调节蛋白９．３５，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]