T细胞受体交互作用的调节制造技术

本发明专利技术公开包括Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）与主要组织相容性复合物（ＭＨＣ）抗原的免疫复合物的调节化合物的识别方法。本发明专利技术有多项有用用途，包括提供免疫反应调节组合物检测用的高产出量筛选检定分析。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及T细胞受体(TCR)与主要组织相容性复合物(MHC)抗原间的交互作用的调节化合物。一方面本专利技术的特点涉及识别试验化合物的方法。另一方面本专利技术提供通过该方法检测与识别的试验化合物、包括该化合物的医药制剂、以及该等化合物的治疗用法。本专利技术有多项重要应用包括用于高产出量筛选检定分析，以选择可减低或消除有害免疫反应的化合物、或可提升或引发有用的免疫反应的化合物。
技术介绍
抗原特异性T细胞识别且应答于结合至主要组织相容性复合物(MHC，包括人类MHC称作HLA)的结合沟或裂缝的特定肽。肽由MHC分子提呈且由抗原特异性T细胞识别表示识别且应答于外来抗原之一项重要免疫监视策略。抗原肽系非共价键结至包含MHC蛋白质结合沟的多形性残基的特定「结合口袋」。与MHC结合的抗原性肽与T细胞表面的T细胞受体(TCRs)特异性交互作用，且调节免疫反应。概略而言参考基础免疫学，第3版，W.Paul编辑芮森(Rsen)出版社，纽约(1993年)。也参考Rhode，P.等人的美国专利第5,869,270号(让与桑诺(Sunol)分子公司)。MHC分子为与膜结合的异二聚体糖蛋白，其包括α链及β链。用于第II类MHC分子，α1与β1领域结合形成一个肽结合沟。抗原肽系经过肽上的锚定氨基酸与由α1及β1领域形成的结合口袋间的交互作用而结合MHC分子。人类第II类MLA-DR1复合流行性感冒病毒肽的X光晶相学结构显示肽与MHC分子间的交互作用的原子细节。参考Brown，J.H.等人(1993)自然36433-39；Stern，L.J.等人(1994)自然368215-221；以及Garboczi，D.N.等人(1999)免疫101-7。MHC第I类分子具有与第II类MHC分子不同的领域组织结构。第I类MHC分子中，α1与β1领域结合而形成肽结合沟。但两类MHC分子具有整体类似结构，肽结合位置或结合沟位在膜领域远程。例如参考Rudensky，A.Y.等人(1991)自然353622-626。也参考美国专利第5,284,935；5,260,422；5,194,425；5,130,297号；以及WO92/18150、WO93/10220有关MHC分子的讨论。T细胞反应系经过抗原结合至T细胞受体(TCR)予以调节。一类型TCR为α链及β链组成的与膜结合的异二聚体。这种TCR被视为类似免疫球蛋白可变区(V)以及恒定区(C)。TCRα链包括共价键联的V-α及C-α链，而β链包括V-β链共价键联至C-β链。V-α及V-β链形成口袋或裂缝，该口袋或裂缝可结合至MHC分子的超抗原或肽抗原、或结合至异种反应性MHC分子。概略参考Paul，W.(参见上文)。已经报告若TCRα链及β链未组合成为一种复合物，该复合物包括特定分化群集(CD)蛋白质，换言之CD3复合物包含γ、δ、ε及ζ链，则该TCR可被分解。例如参考Shin等人(1993)科学2591901。已知MHC分子复合抗原肽，可经过若干不同机转诱生选择性免疫抑制。例如参考Guery，J.等人(1993)免疫学关键综论13(3/4)195-206。特别，曾经报告若抗原提呈细胞(APCs)也传输共同刺激信号，则抗原提呈分子表面上的肽-MHC复合物只诱发与MHC结合肽的特异性T细胞系的克隆扩大。曾经提出一种办法利用此项T细胞活化要求，以及经过于无共同刺激信号存在下，与结合至MHC分子的抗原性肽交互作用而抑制T细胞的发展。参考Nicolle，M.等人，临床研究期刊(J.Clin.Invest.)(1994)931361-1369；以及Sharma，S.等人，美国国家科学院议事录(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)(1991)8811465-11469。已经对TCR与其兼容性(同源)MHC间形成的免疫复合物作相当大量研究意图了解该种免疫复合物。其中一种办法系使用X光晶相学研究复合物的原子层面。参考Garboczi，D.N.等人(1996)自然384134-141，Garcia，K.C.等人(1998)科学2791166-1172，Ding，Y.H.等人(1998)免疫8403-411及Reinherz，E.L.等人(1999)科学2861913-1921。使用这种办法，报告不同的TCRMHC/肽免疫复合物具有类似的结合交互作用特色。这些报告系经过突变发生研究获得证实。参考RabinowitzJ.D.等人(1996)免疫5125-135，Lyons D.S.等人(1996)免疫553-61，BrawleyJ.V.& Concannon P.(1999)免疫学期刊(J.Immunity)1634946-4952，HornellT.M.C.等人(1999)免疫学期刊(J.Immunity)1633217-3225。这些研究努力进一步提示抗原肽或MHC分子的微小氨基酸变化，可制造MHC/肽复合物，其未能以最理想方式刺激T细胞反应。例如据报告这种复合物为T细胞拮抗剂以及微弱激动剂。某些情况下，抗原肽变化可能导致MHC/肽复合物其可作为T细胞超激动剂。曾经致力于研究了解T细胞及其同源性MHC/肽间的交互作用、以及可导致刺激T细胞反应的免疫复合物的形成。例如TCRMHC/肽免疫复合物的安定性对于获得最理想T细胞反应有其重要性。多个TCRMHC/肽免疫复合物进行寡聚合反应，对于获得最理想反应也相当重要。参考Lyons D.S.等人(1996)免疫553-61，Cochran，J.R.等人(2000)免疫12241-250。曾经致力于研究发展使用基于细胞以及基于蛋白质的方案来检测化合物的筛选方法。例如若干筛选方法识别据报告可抑制蛋白质蛋白质交互作用的化合物。参考Tian，S.S.等人(1998)科学281257-259，Kelly T.A.等人(1999)免疫学期刊(J.Immunity)1635173-5177，Jenh，C.H.等人(1998)分析生物化学25647-55。希望有一种化合物其可调节TCR与其同源MHC间的交互作用。进一步希望有有效方法可用以检测于多种高产出量筛选检定分析兼容的化合物。
技术实现思路
概略而言本专利技术涉及调节T细胞受体(TCR)与主要组织相容性复合物(MHC，包括人类HLA)抗原间的交互作用的化合物。一方面本专利技术涉及TCR与其同源性MHC抗原分子间的交互作用调节化合物的检测方法。特别专利技术人发展出特别经过增或减这些分子间形成的免疫复合物的存在而调节TCRMHC抗原交互作用的化合物的检测方法。「调节」一词用于本专利技术方法，意图表示检测得的化合物较佳用作为免疫复合物的激动剂或拮抗剂，更概括地，作为TCRMHC抗原复合物本身的调节剂。「MHC抗原」或「MHC抗原分子」用于特异性结合TCR的基于MHC的分子。MHC抗原的MHC组成分系由(但非限制性)典型或非典型MHC Ia类、Ib类或II类分子或MHC同系物组成(参考Maenaka，K & Jones，E.Y.1999，结构分子学流行观点9745-753)。MHC抗原可由(但非限制性)MHC/肽化合物、MHC/超抗原复合物、MHC/脂质(或糖脂质)复合物或同种异体反应性(异种反应性)MHC分子组成。本本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种识别调节一种免疫复合物的化合物的方法，该免疫复合物包含一种Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）以及一种主要组织相容复合物（ＭＨＣ）抗原，该方法包含：ａ）在有或无试验化合物存在下，第一ＴＣＲ分子接受ＭＨＣ抗原分子，接触是在足够让ＴＣＲ与ＭＨＣ抗原分子 特异性结合成为一种免疫复合物的条件下进行，ｂ）在有以及无试验化合物存在下，检测该免疫复合物的存在，ｃ）选出一种可变更ＴＣＲ与ＭＨＣ抗原分子间的特异性结合的试验化合物；以及ｄ）识别该被选定的化合物为可调节该免疫复合物。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：P罗德，V威特曼，JA韦达兹，M布克哈特，KF卡德，R托尔，J阿塞韦多，黄庆祥，
申请(专利权)人：苏诺尔分子公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]