SARS流行性肺组织酵母菌疫苗和菌素及其制造方法技术

本发明专利技术提供一种采用ＳＡＲＳ流行性肺组织酵母菌为原料通过菌种扩增、灭活、脱毒等程序，制成ＳＡＲＳ流行性肺组织酵母菌气雾剂、片剂、注射用针剂预防疫苗。用于ＳＡＲＳ流行性肺组织酵母菌感染特异性预防。采用上述同源的ＳＡＲＳ流行性肺组织酵母菌原液、经洗涤、超声粉碎和反复冻溶以制成１∶１００～１００００组织酵母菌素，供ＳＡＲＳ流性肺组织酵母菌病或疑似患者特异性诊断之用。本菌或作科学研究、“非典”基因序列测试等用途。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

SARS流行性肺组织酵母菌疫苗和菌素及其制造方法属生物

技术介绍
SARS流行性肺组织酵母菌疫苗和菌素及其制造方法本专利技术至2003年4月18日在中国广州历时一个多月，由余国华成功鉴定并确认“非典”、SARS病原体是“流行性肺组织酵母菌”，本病是流行性肺组织酵母菌病，并拟定开发本病原体有关科学研究和生产系列制品(附图说明图1～5)图1是动物模型肺组织切片所见的病原体。图2是肺血管平滑肌的病原体，图3是肺组织肺泡中的病原体，图4是肺组织柱状上皮中大量病原体，图5是脑组织中病原体颗粒和球状孢子体，图6是病原体纯培养，也是制造SARS疫苗和菌素的原料。本专利技术提供一种由SARS流行性肺组织酵母菌(以下简称组织酵母菌)“SARS”流行性肺组织酵母菌疫苗”，(以下简称组织胞酵母疫苗)用上述同一组织酵母菌，制造“SARS流行性肺组织酵母菌素”(以下简称组织酵母菌素)对所检索的全部资料，均未发现与本专利技术同类或相关
技术实现思路
的产品及其生产方法。
技术实现思路
SARS流行性肺组织酵母菌和菌素及其制造方法制造的组织酵母菌疫苗，用于预防组织酵母菌病感染，制造组织胞浆菌素，用于特异性诊断组织酵母菌病。本专利技术流行性肺组织酵母菌可用作科学研究，“非典”、SARS测试、和商业用途。除上述制造疫苗和皮试诊断试剂，亦可用其他方法处理后，制造特异性诊断试剂，以及应用本病原体组织酵母菌测试基因排列绘制基因图谱或其他科学研究、药物实验。1、技术关键组织酵母菌疫苗，主要通过菌株扩增、灭活、脱毒组织酵母菌(死菌)制造而成，其灭活方法是使组织酵母菌在水浴中或相当的加温环境中用100℃5-50分钟，或60-95℃，1-10小时灭活，采用1％-3％甲醛灭活和同时脱毒，达到灭活目的，并保持组织酵母菌疫苗抗原性良好。2、技术方案组织酵母菌疫苗是用灭活和甲醛脱毒的方法制造组织酵母菌疫苗。同时还可将组织酵母菌营养控制，反复不断传代(在动物或培养基)或用其他人工的方法使组织酵母菌毒力下降，制造组织酵母菌减毒的活疫苗，用于上述组织酵母菌病感染的预防。组织酵母菌疫苗的临床用量单位按含菌数计算，供皮下或肌肉注射的疫苗每次(瓶)为10×108/ml/支，用于滴鼻和喷喉气雾剂，其剂量为5×109/5ml。并制造组织酵母菌疫苗的系列剂型，气雾剂、滴鼻滴剂(液体)和用于舌下含的片剂、供皮下或肌肉注射针剂，以及冻干粉针剂等。采用组织酵母菌减毒活疫苗的剂量是灭活疫苗减量的2～20倍。3、技术效果SARS流行性肺组织酵母菌病，当今被认为是一种烈性传染病，本专利技术研制组织酵母菌疫苗，彻底解决本病的传播漫延和易感者预防的最佳途径。世界公认，疫苗是最有效、最方便、最完全和最经济的预防传染病方法，组织酵母菌疫苗的研制成功，将对于全社会及至全人类的健康作出贡献。组织酵母菌素其制造方法，是采用上述灭活的组织酵母菌，经反复多次离心洗涤，加入适量无菌溶剂，用超声波粉碎和反复冻溶后，用适当溶剂以1∶100-10000稀释，供特异性诊断组织酵母菌病皮试应用。对于急性流行病病原学的证确诊断，是消除流行病的传染源和对患者的及时治疗以及预防的关键，组织酵母菌素研制成功，提供一种特异性诊断用品，对组织酵母菌病或疑似本病，快速确诊能使这些患者对症治疗，得到及时救治，早日康服。为实现上述目标本专利技术采用技术方案如下组织酵母菌疫苗和组织酵母菌素的制造程序制造组织酵母菌疫苗种子系统生产用菌种采用种子批系统。从原始种子批借代，扩增后冻干保存为主种子批。从主种子批制备工作种子批。主种子批和工作种子批的各种特性与原始种子一致。工作种子批用于生产。种子批菌种检定形态及培养特性将待检菌种接种于脂、改良沙保罗培养基或其他适宜培养基，均为组织胞浆菌，在血琼脂培养基上，菌落初呈球状，脑形、粉红色至棕色。菌种传代及保存菌种冻干保存于2-8℃，主种子批自启开后传代不得超过5代。原液制备生产用种子将工作种子批菌种启开后，接种于改良沙保罗或其他适宜培养基，置37℃培养传代，一般不超过24小时，由此制备适宜数量的生产用工作种子。生产用培养基用pH7.0-7.4的营养琼脂和营养肉汤或国家药品管理当局批准的基他培养基。培养基中含对人体有害或其他过敏原物质。菌种接种和培养采用大号玻璃瓶密闭式培养种法，接种后置37℃培养22-24小时，在培养物灭菌取样，涂片染色镜检、如发现杂菌，应废弃。收集和杀菌培养结束后，收取菌液，直接加热杀菌或加入终浓度为1.0-％-1.2％的甲醛溶液，置37℃，7天，取样种于改良沙保罗培养基和虎红琼脂做无菌试验，4℃离心洗涤去甲醛后，加无菌PBS到原量，置2-8℃保存。半成品配制单批或多批检定合格的原液合并，用PBS稀释(磷酸缓冲液)，与原液混合，使每1ml含1-5×109。组成及用途本品系用组织胞浆菌培养后，经加热灭活、脱毒处理，制成每瓶含菌1-5×108ml，不含防腐剂，用于预防组织酵母菌感染的生物制剂。取未分装的组织酵母菌原液，用超声滤粉碎和反复冻溶后，以1∶100-10000的稀释，制造成为“组织酵母菌素”供组织酵母菌感染患者作皮试之用。“组织酵母菌疫苗”和“组织酵母菌素”的具体制造方法如下；组织酵母菌疫苗和组织酵母菌素制造方法1.定义、组成及用途本品系用组织酵母菌培养后，经甲醛溶液灭活、脱毒处理、制成每瓶含菌1-5×109/ml，不含防腐剂制成。用于SARS流行性肺组织酵母菌病的预防。2.制造2.1基本要求2.1.1设施与生产质量管理按中国《药品生产质量管理规范》要求实施。中国化学制药工业协会，化学工业出版新，2001年P14-3796-105。2.1.2原料及辅料符合现行《中国生物制品主要原辅材料质控标准》的要求。未纳入上述标准的化学试剂，不低于化学纯。中国生物制品标准化委员会，化学工业出版新2000年版P49-62。2.1.3生产用水生产用水符合国家饮用水标准，纯化水及注射用水符合现行《中国药典》2000年版标准。《中国生物制品主要原辅材料质控标准》2000年版，中国生物制品标准化委员会编，P1-2。2.1.4生产用器具直接用于生产的金属或玻璃等器具，严格清洗及去热源处理或灭菌处理。2.15生产及检定用动物家兔、小鼠、豚鼠符合清洁级。2.2菌种2.2.1菌种名称及来源制造用菌种由当地直接检样分离获得并冻干保存或国家指定的单位保管和分发。2.2.2种子批的建立生产用菌种采用种子批系统。从原始种子批传代，扩增后冻干保存为主种子批。从主种子批制备工作种子批。主种子批和工作种子批的各种特性与原始种子批一致。工作种子批用于生产。2.2.3种子批菌种检定2.2.3.1形态及培养特性将待检菌种接种于改良沙保罗琼脂或其他适宜培养基，为组织酵母菌，在血琼脂培养基上菌落初呈球状、脑形、粉红色至棕色。2.2.3.2生化反应所用菌种均用细菌生化鉴定系统，鉴定为组织酵母菌。2.2.3.3血清凝集试验用37℃培养20-24小时的培养物，以1％甲醛灭活，用无菌生理氯化钠溶液稀释，使其含菌10×108ml，与组织酵母菌免疫诊断血清，充分混合后，置37℃过夜，以肉眼见到凝集之血清最高稀释度为凝集反应效价。凝集效价应不低于原血清效价之半。2.2.3.4毒力试验采取组织酵母菌分别用37℃培养20-24小时的改良沙保罗液体培养物，以无菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
本专利技术涉及一种ＳＡＲＳ流行性肺组织酵母菌疫苗、菌素及其制造方法其特征是：采用ＳＡＲＳ流行性肺组织酵母菌经过菌种扩增、灭活、脱毒制成特异性预防疫苗，或经过人工方法进行减毒制成减毒预防活疫苗，供预防组织酵母菌传染之用。用上述同源菌种经离心洗涤、超声粉碎、反复冻溶制造组织酵母菌素，或用其他方法处理后生产特异性诊断试剂，或作科学研究、基因序列测试和商业用途用、药物筛选实验。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：余国华，
申请(专利权)人：余国华，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]