用于测定样品中一种或多种分析物的浓度的定量化学分析方法。该方法包括ａ）将样品与一种含有信号提供物的试剂混合于容器中；ｂ）将上述容器与一种流体输送器连接；ｃ）使流体输送器与流体接收器接触。流体接收物含有对分析物具有特异性结合能力的固定化试剂。将流体接收物的图案或面积用作为测量样品中分析物浓度的量度。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于测定样品中一种或多种分析物浓度的方法、一种用于实施该方法的装置、运用该方法实施特定的分析，以及一种用于实施该方法的试剂盒。在分析生物化学领域中，迫切需要一些用于对生物流体中的分析物进行快速定性和定量测定的方法，这些方法只需要尽可能少的分析步骤，并且实施该分析的技术人员不需要具备特殊的技能。Johnson & Johnson Corporation中的Mochnal & al.of OrthoDiagnostic Systems于1986年提交了一份专利申请，并在后来被授予欧洲专利0250137B1。该专利技术提供一种用于对诸如尿液或血液等复杂试样中的分析物(即待测物)进行定量的方法，其特点在于，一种含有固定化结合分子的多孔薄膜片，以及使用了包被于胶体金颗粒上的其它分子，这些胶体金颗粒可与沿多孔薄膜片流动的等分试样接触。薄膜片上滞留有上述胶体金颗粒的部分的长度与试样中分析物分子的浓度成比例。关于定量分析尿液中黄体化激素的方法描述、关于定量分析尿液中人促性腺激素和血液中药用物质茶碱的方法描述都可作为说明这种方法的例子，在这些方法中，由可提供信号的胶体金颗粒在指定的测试薄膜片上产生的条带长度与试样中分析物分子的浓度正好成比例。这些试剂简单、灵敏，并且生产成本低，不需要信号显色剂，不需要特殊的设备，也不需要控制温度。尽管如此，Johnson & Johnson公司和Ortho Diagnostic Systems至今都没有开发基于该技术的商品。EP 0250137B1中没有提供关于如何实现权利要求1的成分C的详细描述，也就是说，没有关于如何将流体转移至薄膜片上的详细描述。在该专利技术第3页末尾处指出，上述试剂装在一种容器中，并且使这些试剂与所述的含有固定化结合分子的薄膜片接触。仅在第5页第一行中找到关于如何实现权利要求1的成分C的实例，其中描述到，将上述薄膜片的一端浸入试样与试剂的混合物中。同样地，在实施例7的第10页第一行中也有将薄膜片浸入10mm深的描述。在实施例3中，关于膜的描述除了薄膜片的详尽描述外没有给出更多的细节。因此，仅有的合理解释是不需要任何特殊的转移装置来将该薄膜片浸入试剂/试样混合物中。当试图将这种浸渍技术用于定量时，该技术存在很多缺陷。一个缺陷是精确制备试剂/试样混合物可能需要训练和/或精确制备混合物的能力。由于要使上述薄膜片悬垂在试剂/试样混合物中，则需要制造一种用于支持薄膜片的装置，或者必须使用试管来支持薄膜片，该试管还能作为装试剂/试样混合物的容器。在这种试管中，液体往往沿薄膜片边缘与沿薄膜片中部的迁移率不同，从而容易形成不整齐的流动前沿。但是，EP 0250137B1中描述的薄膜片非常适合用于定量分析生物变异相对较小的分析物，或者定量分析具有诸如所谓狭窄治疗宽度的药用物质(在血液中其治疗价值和毒性值差异很小)。为本专利技术所知，使用与EP 0250137B1的原理相似的任何原理的仅有的商品是Syva公司(Later Dade Behring，世界上最大的诊断试剂公司之一)的基于免疫色谱酶的产品，有关描述见美国专利443504，其中使用了管形容器和狭窄的薄膜片。关于该产品的描述见论文《酶免疫色谱-一种不需要仪器的定量免疫测定法》，发表于1985年的Clinical Chemistry vol.31，1144-1150。但是，Syva的产品使用了包括酶底物容器在内的若干试剂容器，并且该方法在操作中非常复杂。根据Syva在挪威的销售代表，尽管需求巨大，但由于工业生产的复杂和昂贵，该产品被停止使用。EP 0250137B1中描述的薄膜片可用于测量较大范围的浓度(也被称为较大动态测量范围)，在该薄膜片的不同部分的每单位面积中含有不同数量的特异性结合分子。但是，该专利持有者从未经销这种薄膜片，并且在技术上和工业上很难实现这种具有高精度的产品。一种较为简单的方法是，在琼脂糖凝胶中利用Mancini et al.在径向免疫沉淀技术中提出的径向分析技术，Immunochemistry，2235-254(1965)。利用径向迁移可获得非常大的动态测量范围，因为在这种形式中，迁移长度与面积的平方根成正比。因此将半径从1cm增加至3cm可以使面积增加9倍，从而可将其应用于较大的浓度测量范围。就在Ortho和Sylva对免疫色谱中面积测量原理的商业开发不太成功时，另一项对薄层免疫色谱主要原理的商业开发却进行地非常成功，大多数人都可以从妊娠诊断试验中加以了解，有关文献可参阅，例如，Rosenstein & Bloomster的美国专利4,855,240和May & al.的EP 291 194，1988。该技术的特点在于，将含有或不含有添加试剂的试样滴加到小孔中或滴加到贴在湿润的吸收膜片上的滤纸上，由此可使试样渗入多孔膜并沿多孔膜迁移。移动的液体使预先与信号提供物化学结合的干燥的特异性结合分子溶解，这些结合分子(通常为抗体)继而与来自上述试样的分析物分子结合。沿着迁移带还固定有一些其它的特异性结合分子，固定方式通常是垂直于迁移方向的条带，或诸如十字形等图案。当带有特异性结合分子的分析物分子经过含有固定化结合分子的所述条带或图案，而特异性结合分子连接有信号提供物时，这些信号提供物将在这些条带或图案部位富集。阳性测试结果显示为在特定条带或图案部位产生颜色或荧光。有许多公司生产和销售这种产品。首先，从世界三家最大的诊断试剂公司中的两家及其产品清单中我们可以看出，这种形式的定性薄层免疫色谱的应用很广泛。美国Bayer公司销售的产品有Clinitek hCG验尿试纸和ClinitekMicroalbunin验尿试纸。美国Abbott实验室销售的产品有Fact PlusPregnancy Test、TestPack hCG Combo、TestPack Chlamydia、TestPackStrep A、TestPack Rotavirus和TestPack RSV。至于规模较小但更专业的公司，我们会提到美国的Nubenco Medical International，该公司销售用于测试人绒毛膜促性腺激素、促黄体生成激素、Chagas、衣原体、霍乱、CK MB、登革热、肌红蛋白、Strep A、乙型肝炎抗原、Tropnin I、血红蛋白便的各种试纸，以及用于测试Deng抗体、幽门缠绕杆菌抗体、乙型肝炎抗体、单核细胞增多症抗体、梅毒螺旋体抗体和结核分枝杆菌抗体的试纸，此外，还销售用于检测α-胎儿蛋白、癌胚抗原和前列腺特异抗原等肿瘤标志的试验试纸。作为过滤材料的专业生产商的美国Millipore公司销售用于来自其OEM部门的这些测试类型的全套元件(组合试剂盒)，即通常所说的HiFlow组合试剂盒。英国股票上市公司Pall Gelman还发行了用于制造这种产品的指南，即名为《免疫色谱，侧向流动或试验片开发建议》的小册子，该指南还可以从其互联网站点处下载。美国Acon Laboratories公司具有巨大的固有产量并销售这些测试类型，特别是针对中国市场，但是该公司也将生产的测试试纸提供给其它公司以其用户商标转售，即通常本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于测定样品中一种或多种分析物浓度的定量化学分析方法，其特征在于，将含有一种或多种分析物的样品与一种装在容器中的试剂混合，其中的试剂含有信号提供物，由此提供一种混合物，在将上述容器与流体输送器连接后，该混合物被一种装在流体输送器中的流体输送物所吸收，并同时或随后地使流体输送器与包含流体接收物的流体接收器接触，该流体接收物包含具有针对一种或多种分析物的特异性结合能力的固定化试剂，或固定化分析物分子或其类似物或衍生物或片段，其中的混合物被输出到上述另一流体接收器中多孔的流体接收物中，并产生一种图案，其中的图案或图案面积或图案组成部分的面积将用作为测量样品中一种或多种分析物浓度的量度。
【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：厄灵森德雷哈根，
申请(专利权)人：厄灵森德雷哈根，
类型：发明
国别省市：NO[挪威]
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