修饰的脂化松弛素B链肽及其治疗用途制造技术

本发明专利技术涉及具有下式(I)的生物活性单链松弛素肽：N

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】修饰的脂化松弛素B链肽及其治疗用途
本专利技术涉及能够激活RXFP1受体的松弛素-2的B链的肽类似物。具体地，本专利技术涉及能够激活RXFP1受体的松弛素-2的B链的脂化肽类似物。此外，本专利技术提供了至少包含所述肽的药物组合物，以及根据本专利技术的肽或其药物组合物，用于其作为药物的用途，并且特别是用于其在治疗和/或预防涉及RXFP1受体的各种疾病或病症，更具体地选自以下的疾病或病症方面的用途：-由以下组成的组：纤维化；纤维化疾病，特别是全身性硬化症、硬皮病和纤维肌痛；特发性肺纤维化；涉及纤维化的肾脏疾病；肺动脉高压和先兆子痫；-由心脏和血管疾病组成的组，特别是由急性或慢性心力衰竭、收缩或舒张性心力衰竭、冠状动脉疾病、动脉粥样硬化、微血管性心绞痛和糖尿病的心血管并发症组成的组；和/或-由以下组成的组：肾功能衰竭，特别是肝硬化中的肾功能不全；慢性肾脏疾病和急性肾脏损伤。
技术介绍
人松弛素-2(H2松弛素)是具有53个氨基酸的6-kDa肽激素。其结构由两条独立的多肽链组成，即通过两个二硫(S-S)键交联的H2松弛素链A(SEQIDNO:100)和H2松弛素链B(SEQIDNO:101)，其中第三链内S-S键位于A链中，如下所示：H2松弛素A链：H-Gln-Leu-Tyr-Ser-Ala-Leu-Ala-Asn-Lys-Cys*-Cys**-His-Val-Gly-Cys*-Thr-Lys-Arg-Ser-Leu-Ala-Arg-Phe-Cys***-OH(SEQIDNO:100)H2松弛素B链：H-Asp-Ser-Trp-Met-Glu-Glu-Val-Ile-Lys-Leu-Cys**-Gly-Arg-Glu-Leu-Val-Arg-Ala-Gln-Ile-Ala-Ile-Cys***-Gly-Met-Ser-Thr-Trp-Ser-OH(SEQIDNO:101)其中Cys*、Cys**和Cys***表示具有相同标记的半胱氨酸之间的二硫键。松弛素-2是由黄体(corpusluteum)产生的天然存在的肽激素，其在女性怀孕的前三个月期间在循环中达到峰值。松弛素-2属于胰岛素样肽家族，其成员在与被分类为松弛素家族肽(RXFP)受体(RXFP1、RXFP2、RXFP3和RXFP4)的不同种类的受体结合后发挥多种作用。RXFP1是松弛素的主要受体。RXFP1含有在氨基末端处具有单一低密度脂蛋白A类(LDLa)模块的大型胞外结构域，和10个胞外富含亮氨酸的重复结构域(LRR)，随后是7个跨膜(7TM)螺旋结构域。RXFP1的LDLa模块通过32个残基的接头连接到LRR结构域。RXFP1的激活是复杂的多步骤过程。先前的研究已表明，H2松弛素B链的精氨酸盒(RxxxRxxI/V，其中x是任何残基)的Arg13、Arg17和Ile20与位于RXFP1的LRR结构域的LRR4-8上的Asp231、Asp279、Glu233和Glu277结合。单独的配体结合不足以激活所述受体。尽管与胞外结构域结合，但LDLa模块的截短或取代导致无活性的受体。一项交换RXFP1和RXFP2的LDLa模块的研究(Bruell,S.等人,Front.Endocrinol.(Lausanne)4,171(2013))强调了接头在受体激活方面的作用。跨膜结构域的LRR(高亲和力位点)和第一外环(低亲和力位点)参与松弛素结合，而涉及外环2的受体激活需要LDLa模块(SethiA.等人NatureCommunications(2016))。在一些物种中，松弛素还可以激活RXFP2，所述RXFP2是针对胰岛素样肽3(INSL3)的含有天然富亮氨酸重复序列的GPCR。这表明潜在的交叉反应性可能与松弛素的各种生物活性相关，尽管目前尚无证据表明松弛素仅通过RXFP2发挥生理作用。最近公布的数据显示，在激动剂激活在人与啮齿动物之间在ECL3结构域中具有特定差异的RXFP1的能力方面存在种间差异(Huang等人FrontiersinEndocrinology2015年8月17日；6:128)。同时，描述针对一些松弛素衍生的单链模拟物的有偏向的激动剂活性(Hossain等人Chem.Sci.,2016,7,3805)。然而，基于IUPHAR命名法，RXFP1是Gs偶联受体，并且RXFP1的主要信号传导途径导致cAMP(环状单磷酸腺苷)积累。松弛素最初被鉴定为一种妊娠激素，不仅参与子宫重塑和胚胎植入，而且参与孕妇的血流动力学适应。这包括降低血管阻力，增加心输出量和增加GFR，这是一种旨在改善心脏后负荷的效应组合。这些特性导致在急性心力衰竭的情况下，在几个临床试验中使用重组人松弛素2。松弛素的归因于肾脏和全身脉管系统的改变的有益心血管作用已经在临床前研究和II期临床试验中在充血性和急性心力衰竭患者中得到证实。在有意识的血压正常和高血压的雄性和雌性大鼠中，松弛素的急性静脉内和慢性皮下给予增加心输出量和总体动脉顺应性，并降低全身血管阻力，而不影响平均动脉压。也已显示松弛素在高血压大鼠模型中降低平均动脉压。松弛素的血管作用扩展到被动壁顺应性的改变。在大鼠和小鼠中的慢性皮下松弛素输注增加小型肾脏、肠系膜、子宫和颈动脉的动脉顺应性。此外，松弛素在心脏和肾脏纤维化的动物模型中具有抗纤维化特性。因此，松弛素可以通过降低后负荷和减轻心脏活动而有益于患有慢性心力衰竭的患者，以及有益于患有肺动脉高压、患有射血分数降低或保持的心力衰竭的患者，并且有益于患有纤维化疾病(包括系统性硬化症、特发性肺纤维化和涉及纤维化的任何肾脏疾病)的患者。因此，松弛素-2显然具有很高的治疗意义。然而，H2-松弛素复合物的异二聚体结构使其化学合成和纯化困难，这导致最终产物产量低(Curr.Opin.Chem.Biol.2014,22,47-55)。因此，人们有兴趣获得具有松弛素激活RXFP1受体的能力的稳定松弛素肽，并且更具体地是保留了松弛素的生物活性，同时在结构上比天然松弛素更简单的肽。与H2-松弛素相比，结构更简单的肽可能需要更简单且更有效的合成。从而降低与H2-松弛素合成相关的治疗成本。此外，由于其较简单和较小的结构，与天然松弛素相比，此类肽可以展现出改善的摄取，从而导致改善的体内治疗活性。文献中已描述了几种简化的H2-松弛素类似物。M.A.Hossain等人(J.Biol.Chem.(2011),43,3755)鉴定了H2-松弛素的最小结构，表明其B链可以在N末端处被截短多达6或7个氨基酸，而效力损失极小。此出版物中描述的结构是双链松弛素类似物，与天然H2-松弛素相比，其仍难以合成并且没有优势。进行了进一步尝试以简化松弛素家族肽。最近，M.A.Hossain等人在Chem.Sci.(2016),7,3805-3819和WO2015/157829中提出了仅包含H2-松弛素B链的RXFP1激动剂肽。然而，如本文本中所示，WO2015/157829的肽表现出不足以激活RXFP1受体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种具有下式(I)的肽：/nN

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180131 EP 18305094.71.一种具有下式(I)的肽：
Nter-Ac-X10-E-G-R-E-X15-V-R-X18-X19-I-X21-X22-E-G-X25-S-X27-X28-X29-X30-X31-X32-X33-NH2-Cter
其中：
Nter表示所述肽的N末端；
Cter表示所述肽的C末端；
Ac表示乙酰基；
X10表示选自亮氨酸、2-氨基-异丁酸、Nε-乙酰基-赖氨酸和α-甲基-亮氨酸的氨基酸；
E表示谷氨酸；
G表示甘氨酸；
R表示精氨酸；
X15表示选自赖氨酸、精氨酸、高赖氨酸，高精氨酸、鸟氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸和亮氨酸的氨基酸；
V表示缬氨酸；
X18表示选自丙氨酸、2-氨基-异丁酸、亮氨酸、Nε-乙酰基-赖氨酸和谷氨酰胺的氨基酸；
X19表示选自赖氨酸、Nε-乙酰基-赖氨酸、瓜氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸和2-氨基-异丁酸的氨基酸；
I表示异亮氨酸；
X21表示选自2-氨基-异丁酸和丙氨酸的氨基酸；
X22表示选自2-氨基-异丁酸和异亮氨酸的氨基酸；
X25表示以下结构：



其中：
-*表示与式(I)中X25之前的甘氨酸的共价键；
-◆表示与式(I)中X25之后的丝氨酸的共价键；并且
Z表示式(II)的基团：
–[(PEGxx)b(gE)cCd]，
b和c独立地表示1、2、3、4或5；
PEGxx独立地表示选自PEG2、PEG2DGA和TTDS的聚乙二醇衍生物；
gE表示γ-谷氨酸；并且
Cd表示线性饱和的C12-C22酰基；
S表示丝氨酸；
X27表示选自苏氨酸、赖氨酸、精氨酸和谷氨酰胺的氨基酸；
X28表示选自色氨酸、苯丙氨酸、5-氟-色氨酸、5-氯-色氨酸、5-甲氧基-色氨酸、酪氨酸、4-氟-苯丙氨酸、1-萘基丙氨酸、2-萘基丙氨酸、α-甲基-色氨酸、α-甲基-苯丙氨酸和5-羟基-色氨酸的氨基酸；
X29表示选自丝氨酸、D-丝氨酸、2-氨基-异丁酸、苏氨酸、α-甲基-丝氨酸、Nε-乙酰基-赖氨酸和缬氨酸的氨基酸；
X30表示选自2-氨基-异丁酸、α-甲基-赖氨酸、D-赖氨酸、赖氨酸、高赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸和α-甲基-精氨酸的氨基酸；
X31表示选自精氨酸、Nω-甲基-精氨酸、丙氨酸、Nω,Nω'-二甲基-精氨酸和瓜氨酸的氨基酸；
X32表示选自赖氨酸、丙氨酸、精氨酸、Nε-乙酰基-赖氨酸和Nε,Nε,Nε-三甲基-赖氨酸的氨基酸；并且
X33表示选自赖氨酸、Nε-乙酰基-赖氨酸、亮氨酸、精氨酸和丙氨酸的氨基酸；
或其盐或溶剂化物。


2.根据权利要求1所述的肽，其中b表示2、3、4或5并且c表示2、3或4。


3.根据权利要求1或2所述的肽，其中Cd表示选自C12(Lau)、C14(Myr)、C15(Penta)、C16(Palm)、C17(Hepta)、C18(Stea)、C20(Eico)和C22(Doco)酰基的线性饱和的酰基，特别是选自C12(Lau)、C14(Myr)、C15(Penta)、C16(Palm)、C17(Hepta)或C18(Stea)酰基的线性饱和的酰基，并且特别是线性C16或C18酰基。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的肽，其具有下式(Ib)：
Nter-Ac-X10-E-G-R-E-X15-V-R-X18-X19-I-X21-X22-E-G-X25-S-X27-X28-X29-X30-R-X32-X33-NH2-Cter
其中：
Nter表示所述肽的N末端；
Cter表示所述肽的C末端；
Ac表示乙酰基；
X10表示选自亮氨酸、Nε-乙酰基-赖氨酸和2-氨基-异丁酸的氨基酸；
E表示谷氨酸；
G表示甘氨酸；
R表示精氨酸；
X15表示选自赖氨酸、精氨酸、高赖氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸和亮氨酸的氨基酸；
V表示缬氨酸；
X18表示选自丙氨酸、2-氨基-异丁酸和Nε-乙酰基-赖氨酸的氨基酸；
X19表示选自赖氨酸、Nε-乙酰基-赖氨酸、谷氨酰胺和瓜氨酸的氨基酸；I表示异亮氨酸；
X21表示选自2-氨基-异丁酸和丙氨酸的氨基酸；
X22表示选自2-氨基-异丁酸和异亮氨酸的氨基酸；
X25表示以下结构：



其中：
-*表示与式(Ia)中X25之前的甘氨酸的共价键；
-◆表示与式(Ia)中X25之后的丝氨酸的共价键；并且Z选自-(TTDS)2-(gE)3-Palm、-(TTDS)3-(gE)3-Palm、-(PEG2DGA)3-(gE)3-Palm、-(PEG2)4-(gE)3-Palm、-(TTDS)2-(gE)2-Palm、-(TTDS)2-(gE)3-Stea、-(TTDS)3-...

【专利技术属性】
技术研发人员：O·杜克洛斯，S·伊利亚诺，S·马尔特，C·米诺莱蒂霍奇皮德，E·比安奇，R·英格尼托，P·马格蒂，A·桑托普雷特，
申请(专利权)人：赛诺菲，
类型：发明
国别省市：法国;FR