人CDR-移植抗体及其抗体片段制造技术

一种与人ＣＣ趋化因子受体４（ＣＣＲ４）的细胞外区特异反应，但不与人血小板反应的人ＣＤＲ移植抗体或其抗体片段；一种与ＣＣＲ４的细胞外区特异反应，并对ＣＣＲ４表达细胞有细胞毒活性的人ＣＤＲ移植抗体或其抗体片段；和一种含有这些抗体或其抗体片段中的至少一种作为活性成分的药物，治疗剂或诊断试剂。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种人CDR-移植抗体及其抗体片段，这种抗体与人CC趋化因子受体4(以下称为“CCR4”)的胞外区特异反应，但不与血小板反应。而且，本专利技术涉及一种人CDR-移植抗体及其抗体片段，这种抗体与人CCR4的细胞外区特异反应，但不具有CCR4配体，如与CCR4结合的TARC或MDC的抑制活性。此外，本专利技术涉及一种人CDR-移植抗体及其抗体片段，这种抗体与CCR4的胞外区特异反应，具有细胞毒活性和抑制Th2细胞产生细胞因子的活性，并含有特异的互补决定簇(以下称为“CDR”)。本专利技术也涉及编码抗体或其抗体片段的DNA。而且，本专利技术涉及含有此DNA的载体，和用该载体转化的转化体。此外，本专利技术涉及了采用转化体产生抗体或其抗体片段的方法，和一种药物，例如治疗制剂、诊断制剂及其类似物，其中包括使用此抗体或其抗体片段，用于Th2介导的免疫疾病如异位性疾病和类似疾病。另外，本专利技术涉及一种药物如治疗制剂，诊断试剂及其类似物，其中包括使用此抗体或其抗体片段，用于癌症如血癌，如白血病，和淋巴瘤形成。
技术介绍
多种因素如嗜酸性粒细胞，肥大细胞，IgE在异位性疾病如支气管哮喘中起作用。嗜酸性粒细胞浸润至炎症部位，通过脱粒释放细胞毒碱性蛋白质如MBP(主要碱性蛋白质)或其类似物，周围组织被这些细胞毒碱性蛋白质损害。肥大细胞与B细胞产生的IgE结合成抗原免疫复合体，并释放组织胺，因此诱导速发性变态反应。变态反应由生物功能分子如细胞因子，趋化因子及其类似物控制，它们参与细胞间的信号转导。IL-5诱导嗜酸性粒细胞的分化，存活和脱粒。IL-4诱导B细胞的活化和IgE的产生。产生的IgE与抗原形成免疫复合体，导致肥大细胞的脱粒。已经发现IL-4，IL-13及其类似物也可由肥大细胞产生，并促进B细胞产生IgE(Am.J.Respir.Crit.Care Med.，152.2059(1995)，Immunol.Toddy，15，19(1994))。因此，在炎症细胞中存在一种错综复杂的细胞因子-趋化因子网络，并保持很复杂的平衡关系。细胞因子和趋化因子是由在细胞表面上表达CD4的辅助性T细胞(以下称为“CD4+Th细胞”)产生的。实际上，已经发现辅助性T细胞的浸润可见于支气管哮喘病人的呼吸道炎症部位，在外周血中活化的T细胞也是增加的，呼吸道炎症部位中相当大量的T细胞是活化的，哮喘病人的严重性和呼吸道高敏感性与活化的T细胞数目是相关的(Am.Rev.Respir.Dis.，145.S22(1992))。因此根据产生的细胞因子的类型，辅助性T细胞被分为Th1细胞和Th2细胞(Annu.Rev.Immunol.，7，145(1989))。Th2细胞产生IL-4，IL-5，IL-13等。Th2细胞产生的细胞因子是Th2细胞因子。已经发现从异位性疾病病人中分离的抗原特异性T细胞克隆在体外被刺激时，可释放Th2细胞因子(Proc.Natl.Acad.Sci.，U.S.A.，88，4538(1991))，Th2细胞存在于哮喘病人的支气管肺泡灌洗液(以下称为“BAL”)和呼吸道粘膜中(N.Engl.J.Med.，326.298(1992)，Eur.J.Immunol.，23，1445(1993))。当采用异位性炎症动物模型检测到在BAL中的细胞有多种细胞因子的mRNA表达时，Th2的细胞因子IL-4和IL-5的mRNA的表达水平增加(Clin.Immunol.Immunopathol.，75，75(1995))。当Th2细胞经静脉或鼻内给予小鼠时，也可以抗原特异的方式在肺中诱导哮喘性炎症(J.Exp.Med.，186.1737(1997)，J.Immunol.，160，1378(1998))并观察到嗜酸性粒细胞增多(J.Immunol.，161，3128(1998))。在哮喘病人的呼吸道粘膜和异位性皮炎病人的皮肤病变中观察到IL-5的表达(J.Clin.Invest.，87，1541(1991)，J.Exp.Med.，173.775(1991))，在慢性过敏性鼻炎的粘膜中IL-5的表达水平与IL-13的表达水平，血清总IgE的量和抗原特异性IgE的量相关(Therapeutics，32，19(1998))。趋化因子是碱性肝素结合蛋白的总称，它可诱导白细胞的化学趋化性和活化，根据在一级结构中半胱氨酸残基的位置可分为CXC，CC，C和CX3C亚类。至今已经确定了趋化因子受体中的16个(Curr.Opl.Immunol.，11，626(1999))，已经显示在白细胞如Th1细胞，Th2细胞及类似细胞中每种趋化因子受体的表达都是不同的(Cell Engineering，17，1022(1998))。人CCR4是7次跨膜的G蛋白偶联受体，从人未成熟嗜碱性细胞系KU-812中克隆命名为K5-5。CCR4的跨膜区在氨基酸序列中的是40至67位，78至97位，113至133位，151至175位，207至226位，243至270位和285至308位，细胞外区认为在氨基酸序列中的是1至39位，98至112位，176至206位，和271至284位，细胞内区在氨基酸序列中的是68至77位，134至150位，227至242位和309至360位(J.Biol.Chem.，270.19495(1995))。最初，报道CCR4的配体是MIP-1α(巨噬细胞炎性蛋白-1α)，RANTES(激活时可调节的正常T细胞表达和分泌因子)或MCP-1(单核细胞趋化蛋白)(Biochem.Biophys.Res.Commun.，218.337(1996)，WO96/23068)。但已经发现从被刺激的人外周血单核细胞(以下称为“PBMC”)和胸腺细胞(J.Biol.Chem.，271.21514(1996))中产生的TARC(胸腺和活化-调节的趋化因子)与CCR4特异性结合(J.Biol.Chem.，272.15036(1997))。也有报道，从巨噬细胞中分离的MDC(巨噬细胞衍生的趋化因子)(J.Exp.Med.，185.1595(1997))，也称为STCP-1(被刺激的T细胞趋化蛋白-1)(J.Biol.Chem.，272.25229(1997))，与CCR4的结合比TARC更强(J.Biol.Chem.，273.1764(1998))。已经显示CCR4在产生细胞因子和/或趋化因子的CD4+Th细胞中表达(J.Biol.Chem.，272.15036(1997))，有报道CCR4可在CD4+Th细胞中的Th2细胞中选择性地表达(J.Exp.Med.，187.129(1998)，J.Immunol.，161，5111(1998))。另外，CCR4+细胞已经在效应器/记忆T细胞(CD4+/CD45RO+)中被发现，当CCR4+细胞被刺激时，可产生IL-4和IL-5，但不产生IFN-γ(Int.Immunol.，11，81(1999))。也有报道，CCR4+细胞属于记忆T细胞中的CLA(皮肤淋巴细胞抗原)阳性和α4β8整合素阴性群，CCR4在记忆T细胞上表达，不仅涉及肠道免疫，还涉及皮肤及类似部位的系统免疫(Nature，400.776(1999))。这些结果强烈的表明当炎症被诱导时本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人ＣＤＲ移植抗体或其抗体片段，其与人ＣＣ趋化因子受体４（ＣＣＲ４）的细胞外区特异反应，但不与人血小板反应。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：设乐研也，中村和靖，保坂绘美，田中晶子，小池正道，
申请(专利权)人：协和发酵工业株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]