一种多肽分子，所述的多肽分子与ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１所示的多肽分子具有相同的免疫学功能。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及病毒蛋白质片段及其编码序列，更具体地说，本专利技术涉及SARS冠状病毒钉状蛋白的高免疫原性片段、编码序列，及其在制备疫苗、单克隆抗体、动物源治疗血清及临床诊断试剂中的应用。
技术介绍
严重急性呼吸系统综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome，以下简称为SARS)，又称传染性非典型肺炎，是由SARS冠状病毒(SARS-Associated Coronavirus)引起的人的急性、致死性传染病。该病的致病途径和机理尚不清楚，目前尚无特效治疗药物、疫苗和治疗血清，严重威胁着人类的身体健康和生命安全。(Preliminary clinical description of severeacute respiratory syndrome.MMWR Morb.Mortal.Wkly.Rep.52255-256；Kathryn V.Holmes.2003.SARS coronavirusa new challenge for preventionand therapy Invest.J.Clin.1111605-1609)2002年11月，SARS病人首次出现在中国的广东省，随后SARS病毒传染迅速在东南亚地区蔓延，波及至中国大陆、香港、台湾和越南、新加坡等地，加拿大、美国、欧洲等地也有病例出现。至2003年4月，各地发病达到高峰。SARS病毒的潜伏期一般为2-11天，具有很强的传染性。(Tsang，K.W.，et al.2003.A cluster of cases of severe acute respiratorysyndrome in Hong Kong.N.Engl.J.Med.In press)Poutanen，S.M.等人从病人痰中分离得到一株新病毒，该病毒适合猴肾细胞系培养，通过电镜方法鉴定该病毒为一种冠状病毒(Poutanen，S.M.，etal.2003.Identification of severe acute respiratory syndrome in Canada.N.Engl.J.Med.In press.)。用SARS相关的冠状病毒接种猴，可引起与SARS相似的间质性肺炎，并可从鼻和喉部分离到病毒。此外，SARS病毒感染人，使人发病不需要其它病毒或细菌协同诱导发病，符合Koch原则，因此SARS冠状病毒是SARS的唯一病因(Fouchier，R.A.M.，et al.2003.AetiologyKoch’s postulates fulfilled for SARS virus.Nature.423240)。首先是加拿大，随后中国香港、新加坡、中国内地、中国台湾、德国、意大利和美国也报导了各自国内分离的病毒株的核酸序列(Marra，M.A.，et al.2003.The genome sequence of the SARS-associated coronavirus.Science.doi10.1126/science.1085953；钟南山，SARS临床诊治现状，中国医学论坛报，2003年4月29日)，证明SARS病毒是一个新的人冠状病毒，不同于无致病性的人229E和OC43冠状病毒，而且由不同国家和不同地区分离的SARS病毒株之间差异微小(Tsui SK et al.2003.Coronavirusgenomic-sequence variations and the epidemiology of the severe acuterespiratory syndrome.N Engl J Med.349(2)187-8)，不象HIV-1病毒和流感病毒变异那样激烈，是很稳定的一种病毒，这表明开发研制预防SARS病毒感染的疫苗和治疗血清是可能的。SARS病毒具有冠状病毒科病毒共同的结构特性，单股正链病毒RNA基因组，全长为29.7kb，编码11个推导的有功能的蛋白质和12个未确定的蛋白质。SARS病毒蛋白质可分为组成病毒形态、构造的结构蛋白质和在感染宿主细胞内担负着病毒复制任务的功能蛋白质(或称非结构蛋白质)。SARS病毒的结构蛋白质包括钉状蛋白(spike protein)、M糖蛋白、小糖蛋白E、核蛋白(N蛋白)等，它们是抗病毒疫苗研制和特异诊断试剂开发的重要靶标。RNA聚合酶、蛋白裂解酶(3CL)以及其它调节蛋白质等属于SARS病毒的非结构蛋白质，它们在病毒复制方面具有重要意义，也是研究抗SARS病毒药物的重要目标蛋白质。由于冠状病毒是一种正链RNA病毒，其基因组具有mRNA的特性，使用灭活SARS病毒疫苗接种人类具有很大的危险性(因为基因组RNA可能被细胞吞饮，在细胞中合成病毒粒子)，因此，有必要开发一种无SARS病毒核酸的安全蛋白质疫苗或亚单位疫苗用于预防SARS病毒感染。钉状蛋白为SARS冠状病毒的主要结构蛋白质，由1255个氨基酸构成，分子量为139KD，其全长氨基酸序列如SEQ ID NO3所示。(Drosten，C.，et al.2003.Identification of a novel coronavirus in patients withsevere acute respiratory syndrome.N.Engl.J.Med.In press；Lewicki，D.N.，and Gallagher，T.M.2002.Quaternary structure of coronavirus spikes incomplex with carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule cellularreceptors.J.Biol.Chem.27719727-19734.)它是中和抗体的主要靶标，在研制SARS疫苗和诊断试剂中占有重要地位。但是，全长钉状蛋白的分子量比较大，难于在原核表达体系中大量表达，而且血清学反应特异性较差，在SARS康复患者和健康人的血清中都有较强反应，无法用于疫苗和诊断试剂的制备。因此，有必要找出钉状蛋白的免疫原性高、特异性好的最佳抗原片段，以便在疫苗、单克隆抗体、治疗血清、特异诊断试剂的研制等方面加以应用。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供SARS冠状病毒钉状蛋白的高免疫原性片段。本专利技术的另一个目的是提供编码SARS冠状病毒钉状蛋白高免疫原性片段的核酸序列。本专利技术的另一个目的是提供包含SARS冠状病毒钉状蛋白高免疫原性片段编码序列的表达载体。本专利技术的另一个目的是提供经包含SARS冠状病毒钉状蛋白高免疫原性片段编码序列的表达载体转化或转导而获得的细胞。本专利技术的另一个目的是提供一种细胞系，该细胞系是通过培养经包含SARS冠状病毒钉状蛋白高免疫原性片段编码序列的表达载体转化或转导而获得的细胞而得到的。本专利技术的另一个目的是提供SARS冠状病毒钉状蛋白高免疫原性片段的适于大规模工业化生产的纯化和变、复性方法。本专利技术的另一个目的是提供基于SARS冠状病毒钉状蛋白的高免疫原性片段或其编码序列而制得的疫苗。本专利技术的另一个目的是提供基于SARS冠状病毒钉状蛋白的高免疫原性片段而制得的单克隆抗体。本专利技术的另一个目的是提供基于本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：饶子和，庞海，李慎涛，李雪梅，韩雪清，金英花，徐彦辉，
申请(专利权)人：清华大学，中国科学院生物物理研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。