生长激素1基因与原发性高血压的相关性制造技术

本发明专利技术公开了一种检测原发性高血压易感性的方法，它包括检测个体的生长激素１基因ＧＨ１、转录本和／或蛋白与正常相比是否存在变异，存在变异就表明该个体患原发性高血压的可能性大于正常人群。本发明专利技术还公开了相应的检测试剂盒。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学和医学领域。更具体地涉及生长激素1基因(growthhormone 1，GH1)的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)及其与原发性高血压的相关性。本专利技术还涉及检测这些SNP的方法和试剂盒。
技术介绍
高血压是指收缩压或舒张压升高的一组临床症侯群。血压的升高与冠心病、肾功能障碍、高血压心脏病及高血压并发脑卒中的发生存在明显的因果关系。高血压最新的诊断标准是收缩压≥19kpa(140mmHg)或舒张压≥12kpa(90mmHg)，符合其中一项者可确诊为高血压。大多数的高血压患者在血压升高早期仅有轻微的自觉症状，如头痛、头晕、失眠、耳鸣、烦燥、工作和学习精力不易集中并容易出现疲劳等。随着病情的发展，特别是出现并发症时，症状逐渐增多并明显，如手指麻木和僵硬、多走路时出现下肢疼痛，或出现颈背部肌肉酸痛紧张感。当出现心慌、气促、胸闷、心前区疼痛时表明心脏已受累，出现夜间尿频、多尿、尿液清淡时表明肾脏受累、肾小动脉发生硬化。如果高血压患者突然出现神志不清、呼吸深沉不规则、大小便失禁等提示可能发生脑出血，如果是逐渐出现一侧肢体活动不便、麻木甚至麻痹，应当怀疑是否有脑血栓的形成。高血压早期无明显异常体征出现。当脑、心、肾等重要器官出现轻度损害时可有异常的体征出现。常见的心脏异常表现有心尖搏动左移、心前区有抬举样搏动感，听诊心尖区第一心音增强、主动脉瓣区第二心音增强且有收缩期杂音和舒张期杂音，表明已发生动脉硬化和左心室肥厚，如果在心尖区听及奔马样心律可能表明有心力衰竭的出现。另外还常见耳垂出现折痕、毛细血管搏动、桡动脉出现硬脉或无脉及下肢间歇性跛行等。此外，由于某些诱发因素或高血压本身的发展，可导致一些高血压患者血压显著或急骤升高，同时伴有脑、心、肾、视网膜等重要器官功能损害，严重危及生命，出现一系列临床特殊征象，称为高血压急症。高血压急症的发病率占高血压人群的5％，常见有高血压脑病、脑出血、急性左心衰竭、可乐宁急性停药综合征、急性心肌梗塞、急进型恶性高血压等。高血压患者中约5％左右无自觉症状，也不知道血压何时升高，更不知道什么时候已产生了血管和器官损害的并发症，有些患者甚至在发生了心血管意外之后才知道自己患有高血压。所以，找出高血压发病的遗传原因，及早的进行预防以及检测，可以有效控制高血压的发病，将疾病对人体的伤害减到最小。原发性高血压(essential hypertension，EH)也叫高血压病，是一种独立的疾病，有着自己的病因、发生发展转归的规律和临床表现。临床上主要表现为动脉血压的升高。占人群高血压患者的90％以上，目前发病机理尚未完全明了，主要依据排除了其他疾病导致的高血压后才能诊断为原发性高血压(高血压病)。动脉血压的升高主要是因外周小动脉阻力增高所致，同时有不同程度的血容量和心输出量的增加。晚期常导致心、脑、肾等脏器受累发生高血压心脏病、心力衰竭、肾功能障碍、脑出血等严重并发症。原发性高血压的治疗主要是降低血压同时防止并发症的发生。原发性高血压患者致死原因为脑血管意外、心血管意外和肾功能不全，我国以脑血管意外为多见，心力衰竭和尿毒症次之，而欧美国家以心力衰竭多见，脑血管意外和尿毒症次之。原发性高血压作为最常见的心血管疾病，其发病率逐年上升，并可引起严重的心、脑、肾并发症，是脑卒中和冠心病的主要危险因素。EH是一种由遗传因素和环境因素相互作用而发病的多基因病，寻找EH相关基因进而阐明高血压发病的遗传机制已经成为目前研究的热点。虽然已有许多关于各种基因多态性与原发性高血压的研究，但没有证实GH1基因与原发性高血压相关性的报道，更没有证实GH1基因的SNP与原发性高血压相关性的报道。综上所述，为了最终实现治疗高血压，本领域迫切需要寻找原发性高血压易感基因，并开发检测原发性高血压的方法、试剂盒，以及相关的治疗药物。
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供一种诊断(尤其是早期诊断)高血压的方法及检测试剂盒。本专利技术的另一目的是提供一种新的治疗高血压的方法。本专利技术的再一目的是提供一种治疗高血压的药物组合物。在本专利技术的第一方面，提供了一种对个体的高血压易感性进行诊断的方法，它包括步骤检测该个体的GH1基因、转录本和/或蛋白，并与正常的GH1基因、转录本和/或蛋白相比较，存在差异就表明该个体患高血压的可能性高于正常人群。在另一优选例中，所述的方法中检测的是GH1的基因或转录本，并与正常GH1核苷酸序列比较差异。在另一优选例中，所述的差异是以下的单核苷酸多态性4886位T→G；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。在本专利技术的第二方面，提供了一种检测样品是否存在生长激素1基因GH1的单核苷酸多态性的方法，包括步骤(a)用GH1基因特异性引物扩增样品的GH1基因，得到扩增产物；和(b)检测扩增产物中是否存在以下单核苷酸多态性4886位T→G；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。在另一优选例中，所述的基因特异性引物具有SEQ ID NO2和3的序列。在另一优选例中，所述的扩增产物的长度为100-3000bp，且含有SEQ IDNO1中第4886位。在本专利技术的第三方面，提供了一种检测高血压的试剂盒，它包括特异性扩增GH1基因或转录本的引物，更佳地，所述的引物扩增出长度为100-3000bp，且含有SEQ ID NO1中第4886位的扩增产物。在另一优选例中，所述试剂盒还含有选自下组的试剂(a)与SEQ ID NO1中第4886位的突变结合的探针；(b)识别SEQ ID NO1中第4886位的突变限制性内切酶。在另一优选例中，所述的突变选自以下单核苷酸多态性4886位T→G；其中，核苷酸位置编号基于SEQ ID NO1。在本专利技术的第四方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的GH1蛋白以及药学上可接受的载体。具体实施例方式本专利技术人经过深入而广泛的研究，对大量候选基因的SNP进行了测定和分析。首次发现和证明了GH1基因的部分SNP与高血压密切相关，而且发现了它的新功能GH1的改变将导致高血压，其中关联研究结果显示，在GH1第4886位的SNP(4886位T→G)在病例和对照组中的分布存在显著性差异(P＜0.05)，因此可作为检测高血压的特异性SNP。在此基础上完成了本专利技术。GH1基因生长激素1基因(growth hormone 1，GH1)的详细序列可参见登录号为J03071的核苷酸序列(可参见网址http//www.ncbi.nlm.nih.gov/)，如SEQ ID NO1所示。GH1基因编码产生生长激素蛋白，是垂体前叶分泌的一种含有191个氨基酸的多肽。种群不同，其结构及组成也不尽相同。人生长激素的分子量是21 500D(≈2.15×104u)，含有两个二硫键(Niall HD et al.Proc Natl Acad Sci USA.1971 Apr；68(4)866-70.)。其大部分作用是通过IGF-1(一种含有70个氨基酸的碱性多肽)介导的。它调节胰岛素样生长因子(IGF1)的表达。胰岛素样生长因子能够促进血管平滑肌细胞的增殖。有报道在高血压病人中，IGF1的血浆水平与血压高低相关。(Andromico G et al.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种体外检测样品是否存在生长激素１基因ＧＨ１的单核苷酸多态性的方法，其特征在于，包括步骤：（ａ）用ＧＨ１基因特异性引物扩增样品的ＧＨ１基因，得到扩增产物；和（ｂ）检测扩增产物中是否存在以下单核苷酸多态性：４８８６位Ｔ →Ｇ；其中，核苷酸位置编号基于ＳＥＱＩＤＮＯ：１。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：金力，黄薇，姜正文，王颖，张晨辉，李艳平，王志敏，肖君华，卢大儒，
申请(专利权)人：复旦大学，上海人类基因组研究中心，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]