用于合成环状缩肽的方法技术

本发明专利技术涉及一种用于从开放形式合成环状缩肽，具体是依吗德塞的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于合成环状缩肽的方法本专利技术涉及用于合成环状缩肽（具体是依吗德塞(emodepside)）的方法，涉及保护标记的特定的羧酸基团。依吗德塞（环[(R)-乳酰基-N-甲基-L-亮氨酰-(R)-3-(对吗啉代苯基)乳酰基-N-甲基-L-亮氨酰-(R)-乳酰基-N-甲基-L-亮氨酰-(R)-3-(对吗啉代苯基)乳酰基-N-甲基-L-亮氨酰）是有效针对大量胃肠道线虫的驱肠虫药。在下文描述的其分子结构可以描述为环状八缩肽，缩肽为其中其酰胺基团的一个或多个被对应的酯基团替换的肽。在技术规模上，依吗德塞可以通过衍生天然存在的物质PF1022A(其中两个氢原子被交换为吗啉环)来获得。WO93/19053A1(EP0634408A1)露了具有以下通式的化合物：（其中A是具有一个或多个合适的取代基的苄基基团或者可以具有一个或多个合适的取代基的苯基基团，Aa是可以具有一个或多个合适的取代基的苄基基团或者可以具有一个或多个合适的取代基的苯基基团，B和D各自是低级烷基，C是氢或低级烷基），以及其药学上可接受的盐。WO2005/055973A2披露了含有环状缩肽和/或吡喹酮的经皮应用的试剂、以及其制备及其用于对抗体内寄生虫的用途。作为杀体内寄生虫剂的依吗德塞和吡喹酮或依西太尔（epsiprantel）以及还有1,2-亚异丙基甘油的组合产品披露在WO2006/094664A1中。WO2006/053641A1涉及杀体内寄生虫剂缩肽在制备用于预防体内寄生虫垂直感染的药物中的用途。除其他外，PF1022A的全合成及其衍生在以下综述文章中讨论：来自SivatharushanSivanathan和JürgenScherkenbeck的“Cyclodepsipeptides：ARichSourceofBiologicallyActiveCompoundsforDrugResearch[环缩肽：用于药物研究的生物活性化合物的丰富来源]”，Molecules[分子]2014,19,12368-12420；doi:10.3390/molecules190812368。对于若干种环缩肽，已经在溶液相和固相上均建立了全合成，这允许产生组合文库。此外，已经阐述了特定的环缩肽的生物合成和用于非天然类似物的化学酶法制备。该综述文章还总结了最近关于环状四-至十缩肽的文献，这些环状四-至十缩肽仅由α-氨基酸和α-羟基酸组成。在多肽的合成中，固相策略具有易于分离反应产物的优点，而液相策略具有均相反应条件的优点。混合方法是标记辅助的策略，其中具有标记基团的化合物易于与未标记的分子分离。在这方面，JP2000/044493A1披露了用于合成化合物文库的保护基团，该化合物文库由能够与待保护的化合物以1：1比率结合的化合物组成，这些化合物具有单个分子结构并还具有>=500的分子量，以及由3,4,5-三-(正十八基氧基)苄醇、3,4,5-三-(正十八基氧基)苄基氯或3,4,5-三-(正十八基氧基)苯甲酸甲酯组成。EP2003104A2涉及用于有机合成的试剂，利用该试剂可以在液相中进行化学反应，并且可以在反应完成后以低成本容易地从液相中分离出一种或多种不需要的化合物。下面描述的用于有机合成的试剂据报道随着溶液组成和/或溶液温度的变化可逆地从液相状态变为固相状态，并且用于有机合成反应。R1至R5可以是相同的或不同的，并且代表氢、卤素、具有1至30个碳数量的烷基基团（其可以具有取代基团）、具有1至30个碳数量的烷氧基基团（其可以具有取代基团）、具有1至30个碳数量的芳基基团（其可以具有取代基团）、具有1至30个碳数量的酰基基团（其可以具有取代基团）、具有1至30个碳数量的硫代烷基基团（其可以具有取代基团）、具有1至30个碳数量的二烷基氨基基团（其可以具有取代基团）、硝基基团或氨基基团；且R1至R5的至少两个是具有18至30个碳数量的基团，并且X代表具有选自下组的一个或多个原子的试剂活性位点，该组由以下组成：碳原子、氧原子、硫原子和氮原子。来自YoheiOkada,HideakiSuzuki,TakashiNakae,ShujiFujita,HitoshiAbe,KazuoNagano,ToshihideYamada,NobuyoshiEbata,ShokakuKim和KazuhiroChiba的"Tag-AssistedLiquid-PhasePeptideSynthesisUsingHydrophobicBenzylAlcoholsasSupports[使用疏水性苄醇作为载体的标记辅助的液相肽合成]",TheJournalofOrganicChemistry[有机化学杂志]2013,78,320-327；doi：10.1021/jo302127d的出版物报道了基于简单的疏水性苄醇（其可以从天然丰富的材料容易地制备）成功建立了可溶性标记辅助的液相肽合成。据报道，在每个步骤中获得了优异的沉淀收率，这结合了固相和液相技术的最佳性能。据报道，此方法能够有效地应用于片段偶联，这允许化学合成若干种生物活性肽。来自HitoshiTamiaki,TomoyukiObata,YasuoAzefu和KazunoriToma的“ANovelProtectingGroupforConstructingCombinatorialPeptideLibraries[构建组合肽文库的新颖的保护基团]”，BulletinoftheChemicalSocietyofJapan[日本化学会通报]2001,74,733-738；doihttp://dx.doi.org/10.1246/bcsj.74.733的出版物披露了3,4,5-三(十八基氧基)苄醇（HO-Bzl(OC18)3），其由没食子酸和硬脂酰溴制备。使用常规的逐步延伸，合成了N,C-保护的肽（Fmoc-AAn-...-AA1-OBzl(OC18)3）。将经取代的苄酯通过用乙酸乙酯中的4M氯化氢进行处理而选择性地切割以给出Fmoc-AAn-...-AA1-OH和HO-Bzl(OC18)3。因此，据报道经取代的苄基在液相肽合成中对保护C-末端羧基有效。由于经取代的苄基基团具有适度高的分子量，因此据报道Fmoc-AAn-...-AA1-OBzl(OC18)3易于通过尺寸排阻色谱法进行纯化；据报道，所有保护的肽在SephadexLH-20凝胶过滤柱的空隙部分中被洗脱。用通过凝胶过滤简单纯化的羧基-保护基团Bzl(OC18)3的组合据报道给出在溶液相中用于构建组合肽文库的新颖的路线。WO2017/116702A1涉及具有以下式的环状缩肽化合物或者药学上或兽医学上可接受的盐：举例来说，具有名称7-34A的化合物（如以下描绘）显示了在体外试验中针对犬恶丝虫（Dirofilariaimmitis）的微丝蚴的在0.1μM与1.0μM之间的EC50值：。本专利技术的目的是提供对于依吗德塞和相关的环状缩肽的改进的合成途径。本专利技术的另一个目的是提供可以使用此途径合成的新型的缩肽。该目的通本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于从根据通式(II)的缩肽合成根据通式(1)的环状缩肽的方法：/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20171107 EP 17200415.2;20181025 CN 20181125453601.一种用于从根据通式(II)的缩肽合成根据通式(1)的环状缩肽的方法：



其中B是胺保护基团，并且A是羧酸保护基团，
该方法包括以下步骤：
-脱保护由B基团保护的胺基团，从而获得脱保护的胺基团；
-脱保护由A基团保护的羧酸，从而获得脱保护的羧酸基团；
-使脱保护的胺和羧酸基团缩合，从而获得环状缩肽(I)
其中x和y彼此独立地是0、1或2，其条件是x+y≥1(优选地，x和y是1)且R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自彼此独立地代表氢、直链或支链的C1-C8-烷基，具体是甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、己基、异己基、仲己基、庚基、异庚基、仲庚基、叔庚基、辛基、异辛基、仲辛基；直链或支链的卤代的C1-C8烷基，具体是氟化的仲丁基；羟基-C1-C6-烷基，具体是羟基甲基、1-羟基乙基；C1-C4-烷酰基氧基-C1-C6-烷基，具体是乙酰氧基甲基、1-乙酰氧基乙基；C1-C4-烷氧基-C1-C6-烷基，具体是甲氧基甲基、1-甲氧基乙基；芳基-C1-C4-烷基氧基-C1-C6-烷基，具体是苄基氧基甲基、1-苄基氧基乙基；巯基-C1-C6-烷基，具体是巯基甲基；C1-C4-烷基硫基-C1-C6-烷基，具体是甲基硫基乙基；C1-C4-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基，具体是甲基亚磺酰基乙基；C1-C4-烷基磺酰基-C1-C6-烷基，具体是甲基磺酰基乙基；羧基-C1-C6-烷基，具体是羧基甲基、羧基乙基；C1-C4-烷氧基羰基-C1-C6-烷基，具体是甲氧基羰基甲基、乙氧基羰基乙基；C1-C4-芳基烷氧基羰基-C1-C6-烷基，具体是苄基氧基羰基甲基；氨基甲酰基-C1-C6-烷基，具体是氨基甲酰基甲基、氨基甲酰基乙基；氨基-C1-C6-烷基，具体是氨基丙基、氨基丁基；C1-C4-烷基氨基-C1-C6-烷基，具体是甲基氨基丙基、甲基氨基丁基；C1-C4-二烷基氨基-C1-C6-烷基，具体是二甲基氨基丙基、二甲基氨基丁基；胍基-C1-C6-烷基，具体是胍基丙基；C1-C4-烷氧基羰基氨基-C1-C6-烷基，具体是叔-丁氧基羰基氨基丙基、叔-丁氧基羰基氨基丁基；9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)氨基-C1-C6-烷基，具体是9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)氨基丙基、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)氨基丁基；C2-C8-烯基，具体是乙烯基、烯丙基、丁烯基；C3-C7-环烷基，具体是环戊基、环己基、环庚基；C3-C7-环烷基-C1-C4-烷基，具体是环戊基甲基、环己基甲基、环庚基甲基；苄基；经取代的苄基；苯基；苯基-C1-C4-烷基，具体是可以任选地被来自下组的基团取代的苯基甲基，该组由以下组成：卤素，具体是氟、氯、溴或碘。


2.根据权利要求1所述的方法，其中x是1，y是1，R1、R4、R7和R10是甲基，R6和R12是甲基，R5和R11彼此独立地是直链或支链的C1-C4-烷基或者直链或支链的卤代的C1-C4-烷基，并且R3和R9彼此独立地是苄基或经取代的苄基。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中R3和/或R9是对吗啉代取代的苄基。


4.根据权利要求1至3中的一项所述的方法，其中所述根据通式(1)的环状缩肽是根据通式(2)从根据通式(IIa)的缩肽合成的：



其中Y是胺保护基团，并且X是羧酸保护基团，
该方法包括以下步骤：
-在酸的存在下脱保护由Y基团保护的胺基团，从而获得脱保护的胺基团；
-经由氢解脱保护由X基团保护的羧酸，从而获得脱保护的羧酸基团；
-使脱保护的胺和羧酸基团缩合，从而获得环状缩肽(I)。


5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中X是经取代的或未经取代的-CH2-芳基基团。


6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中X选自下组：苯甲酰基(Bn)、4-甲氧基-苯甲酰基(PMB)、3,4-二甲氧基苯甲酰基(DPMB)、4-苯基-苯甲酰基(PPB)、2-萘基甲基(Nap)、苄氧基甲基乙缩醛(BOM)。


7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中Y是叔丁基氧基羰基(BOC)。


8.根据权利要求1至7中的一项所述的方法，其中所述根据通式(IIa)的缩肽是如下从根据通式(IV)和(III)的前体获得的：



-在前体(IV)中，在碱的存在下脱保护由PG2基团保护的胺基团，从而获得脱保护的胺基团；
-在前体(III)中，在酸的存在下脱保护由PG3基团保护的羧酸，从而获得脱保护的羧酸基团；
-使脱保护的胺和羧酸基团缩合，从而获得缩肽(II)；
其中R1至R12、X、Y、x和y具有如权利要求1至4中的一项所定义的意义，PG2是胺保护基团，并且PG3是羧酸保护基团。


9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述根据通式(IV)的前体是如下从根据通式(VI)和(V)的前体获得的：



-在前体(VI)中，在碱的存在下脱保护由PG4基团保护的胺基团，从而获得脱保护的胺基团；
-使前体(VI)的脱保护的胺基团以及前体(V)的羧酸基团缩合，从而获得前体(IV)；
其中R7至R12、X和x具有如上文所定义的意义(具体地，x可以是1)，PG2具有如上文所定义的意义，并且PG4是胺保护基团，这些脱保护和缩合方法可以与上文对化合物(II)至(I)的反应概述的相同。


10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述根据通式(III)的前体是如下从根据通式(VIII)和(VII)的前体获得的：



-在前体(VII)中，在碱的存在下脱保护由PG5基团保护的胺基团，从而获得脱保护的胺基团；
-使前体(VII)的脱保护的胺基团以及前体(VIII)的羧酸基团缩合，从而获得前体(III)；
其中R1至R6、PG1和y具有如权利要求1至4中的一项所定义的意义，PG3具有如权利要求4中所定义的意义，并且PG5是胺保护基团。


11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述根据通式(VI)的前体是从根据通式(IX)的前体与X-LG的酯化作用获得的：



其中R10至R12和X具有如上文所定义的意义，并且PG4也具有如上文所定义的意义，并且LG是离去基团。


12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述根据通式(VII)的前体是从根据通式(X)的前体与PG3-OH的酯化作用获得的：



其中R4至R6和y具有如上文所定义的意义，PG3也具有如上文所定义的意义，并且PG5也具有如上文所定义的意义。


13.根据权利要求1至12中的一项所述的方法，其中PG3是X。


14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中前体(III)和(IV)是相同的。


15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中R3和R9是相同的，R1和R7是相同的，R2和R8是相同的，R4和R10是相同的，R5和R11是相同的，并且R6和R12是相同的。


16.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，包括从根据通式(IIb)的缩肽合成根据通式(1)的环状缩肽的步骤：



其中PG1是胺保护基团，并且TAG是羧酸保护基团，
该方法包括以下步骤：
-在碱的存在下脱保护由PG1基团保护的胺基团，从而获得脱保护的胺基团；
-在酸的存在下脱保护由TAG基团保护的羧酸，从而获得脱保护的羧酸基团；
-使脱保护的胺和羧酸基团缩合，从而获得环状缩肽(I)；
其特征在于所述TAG基团包含基团芳基−O−(CH2)n−，其中芳基代表芳族基团，并且n为≥13，
其中x和y彼此独立地为0、1或2，条件是x+y≥1
且其中R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11和R12各自彼此独立地代表氢、直链或支链的C1-C8-烷基、直链或支链的卤代的C1-C8-烷基、羟基-C1-C6-烷基、C1-C4-烷酰基氧基-C1-C6-烷基、C1-C4-烷氧基-C1-C6-烷基、芳基-C1-C4-烷基氧基-C1-C6-烷基、巯基-C1-C6-烷基、C1-C4-烷基硫基-C1-C6-烷基、C1-C4-烷基亚磺酰基-C1-C6-烷基、C1-C4-烷基磺酰基-C1-C6-烷基、羧基-C1-C6-烷基、C1-C4-烷氧基羰基-C1-C6-烷基、C1-C4-芳基烷氧基羰基-C1-C6-烷基、氨基甲酰基-C1-C6-烷基、氨基-C1-C6-烷基、C1-C4-烷基氨基-C1-C6-烷基、C1-C4-二烷基氨基-C1-C6-烷基、胍基-C1-C6-烷基、C1-C4-烷氧基羰基氨基-C1-C6-烷基、叔-丁氧基羰基氨基丁基、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)氨基-C1-C6-烷基、C2-C8-烯基、C3-C7-环烷基、C3-C7-环烷基-C1-C4-烷基、苄基、经取代的苄基、苯基、苯基-C1-C4-烷基、羟基、C1-C4-烷氧基或C1-C4-烷基。


17.根据权利要求16的方法，其中PG1是9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、氨基甲酸叔丁酯(Boc)、氨基甲酸苄酯(Z)、乙酰胺...

【专利技术属性】
技术研发人员：D海姆巴赫，大村智，砂冢敏明，广瀬友靖，野口吉彦，J克伯林，吴志杰，傅水标，吴伟，邱锦峰，何流，魏旭东，
申请(专利权)人：拜耳动物保健有限责任公司，学校法人北里研究所，
类型：发明
国别省市：德国;DE