肌酸酐测定用试片制造技术

含有下述式（１）表示的化合物的肌酸酐测定用试片，　　　　＊＊＊　　…（１）　　　　上述式（１）中，Ｒ↑［１］为Ｈ、ＳＯ↓［３］Ｘ、ＣＯＯＸ；Ｒ↑［４］和Ｒ↑［６］可以相同也可以不同，各自为ＯＨ、ＳＯ↓［３］Ｘ、ＣＯＯＸ；Ｒ↑［２］、Ｒ↑［３］、Ｒ↑［５］和Ｒ↑［７］可以相同也可以不同，各自为Ｈ、ＯＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ↓［２］、ＮＯ、ＣＨ↓［３］；上述Ｒ↑［１］、Ｒ↑［４］和Ｒ↑［６］中的Ｘ可以相同也可以不同，各自为Ｈ、Ｎａ、Ｋ、ＮＨ↓［４］。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及在肌酸酐的测定中使用的试片。
技术介绍
在临床医疗领域中，由于肌酸酐作为肾功能的指标非常有用，所以对肌酸酐进行测定。作为上述肌酸酐的测定方法，例如一般有化学法和酶法。作为上述化学法，例如采用利用在碱性条件下肌酸酐与苦味酸反应显橙红色的性质的Jaffe法(例如参照Bonsnes和Taussky，Journal of BiologicalChemistry(J.Biol.Chem)，1945年，158，p.581)，以及使用3，5-二硝基苯甲酸代替苦味酸的Benedict·Behre法(例如参照Benedict和Behre，Journal of Biological Chemistry(J.Biol.Chem)，1936年，113，p.515)等。另一方面，作为上述酶法，采用使酶作用于肌酸酐生成氨，用比色法测定其的肌酸酐脱氨酶法，以及通过肌酸酐酶将肌酸酐转变成肌酸，将此肌酸用肌氨酸氧化酶和过氧化物酶处理，用比色法测定的肌酸酐氨基水解酶法(肌酸酐酶法)(例如参照Tanganelli等人，Clinical Chemistry(Clin.Chem)，1982年，28，p.1461)等。
技术实现思路
上述Jaffe法和Benedict法由于利用化学缩合反应，所以使用的试剂成本非常低廉。但是，如果反应温度例如达不到35℃以上，该反应就难以发生，因此需在高温下进行长时间(例如10分钟以上)的反应。而且，由于在强碱条件(pH11以上)下反应，使用强碱试剂，因此测定需要特殊的装置和器具等，测定后的废液处理也是个大问题。另一方面，上述酶法与上述化学法相比，例如在中性附近的温和条件下进行反应，对肌酸酐的特异性也高，解决了化学法的大部分缺点。但是，例如，使用的酶的价格非常高，还有，由于使用的酶的种类也多，因此试剂成本高，存在的状况是除能够微量测定的特殊设备以外难以进行测定。特别是近年来，作为生活习惯病的糖尿病在世界范围内增长着，由此引起的糖尿病的并发症之一糖尿病性肾病，甚至严重的肾功能不全在增加。而且，问题是对于这种疾病，例如需要进行肾透析和肾移植。因此，为了早期防止这种肾病，特别是糖尿病性肾病，期待着安全且快速简便地测定作为肾功能指标的肌酸酐的新型测定方法。因此，本专利技术的目的是提供在肌酸酐测定中使用的试片。为了达成上述目的，本专利技术的肌酸酐测定用试片是含有下述式(1)表示的化合物的肌酸酐测定用试片， 上述式(1)中，R1为H、SO3X、COOX；R4和R6可以相同也可以不同，各自为OH、SO3X、COOX；R2、R3、R5和R7可以相同也可以不同，各自为H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；上述R1、R4和R6中的X可以相同也可以不同，各自为H、Na、K、NH4。本专利技术人为了开发肌酸酐的新型测定方法，尝试在络合物生成剂与金属的显色络合物生成反应中，通过肌酸酐的共存，使发生竞争性络合物生成反应，利用上述显色络合物的退色测定肌酸酐的量。结果，本专利技术人首次发现，上述式表示的化合物，在不存在肌酸酐的情况下与过渡金属形成显色络合物，而当存在肌酸酐时，肌酸酐阻碍上述显色络合物的形成，肌酸酐与上述过渡金属形成非显色络合物。因此，使用含有这种化合物的本专利技术的肌酸酐测定用试片，例如，通过测定上述显色络合物有无形成及形成的程度，便可知道肌酸酐阻碍上述显色络合物形成的程度，由此可以求出试样中的肌酸酐的量。另外，使用本专利技术的测定用试片进行的测定，例如，由于可以在室温下进行反应，所以也不需要象以往的酶法那样将反应温度调节至酶的最佳温度，而且可以在短时间内进行反应。因此，可以快速且容易地进行测定。所以，本专利技术的测定用试片，作为肾功能指标的肌酸酐的测定方法，在临床医疗领域等特别有用。附图说明图1是显示本专利技术的实施例中肌酸酐浓度与反射率的关系的图。图2是显示本专利技术的实施例中肌酸酐浓度与反射率的关系的图。具体实施例方式本专利技术的肌酸酐测定用试片，如上所述，是含有上述式(1)表示的化合物的试片。作为上述化合物，例如，优选下述式(2)表示的化合物，更加优选下述式(3)表示的化合物，特别优选下述式(4)表示的化合物。由于这些化合物为水溶性的，例如，在测定液体试样等的肌酸酐时，易于反应，可以以更加优异的灵敏度进行测定。 上述式(2)中，R1为H、SO3X、COOX；R4和R6可以相同也可以不同，各自为OH、SO3RX、COOX；R2、R3、R5和R7可以相同也可以不同，各自为H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；上述R1、R4和R6中的X可以相同也可以不同，各自为H、Na、K、NH4。 上述式(3)中，R1为H、SO3X、COOX；R2和R3可以相同也可以不同，各自为H、OH、Cl、Br、I、NO2、NO、CH3；X可以相同也可以不同，各自为H、Na、K、NH4。这些化合物中，优选下述式(4)～(7)表示的化合物。 再者，上述式(4)的化合物名为2，6-二氯-4′-羟基-3′，3″-二甲基-3-磺基品红酮-5′，5″-二羧酸三钠盐；上述式(5)的化合物名为2，6-二氯-4′-羟基-3′，3″-二甲基品红酮-5′，5″-二羧酸二钠盐；上述式(6)的化合物名为Chromoxane cyanine R；上述式(7)的化合物名为邻苯二酚磺酞。上述各化合物的制备方法没有特别限制，可以根据以往公知的合成方法制备。另外，作为上述化合物，可以使用市售品。上述铬天青S，例如有商品名为Chrome Azurol S(Nacalai公司生产)；上述铬天青B，例如有商品名为Chromazurol B(同仁化学公司生产)；上述铬花青R，例如有商品名为Eriochrome Cyanine R(Nacalai公司生产)；上述邻苯二酚紫，例如有商品名为Pyrocatechol violet(同仁化学公司生产)。本专利技术的肌酸酐测定用试片，优选多孔材料含有上述化合物。上述多孔材料的种类没有特别限制，例如可以使用滤纸、玻璃滤器、树脂制多孔膜等多孔材料。其中，从成本和操作性等理由看，优选滤纸。另外，作为上述树脂制多孔膜的材料，例如有聚砜、聚酯、尼龙、硝化纤维素、聚碳酸酯等。并且，此多孔材料的平均孔径，例如，只要能够浸透、保持液体试样即可，例如为3～10μm的范围。本专利技术的肌酸酐测定用试片优选还含有与上述化合物形成显色络合物的金属或其盐(以下均称为“金属”)。作为上述金属，例如优选过渡金属或它们的盐。作为上述过渡金属，例如有Cu(II)、Pd(II)、U(VI)、Zr(IV)、Ti(IV)、Mn(II)、Fe(III)、Co(II)、Ni(II)、Mo(VI)、Sn(IV)等或它们的盐。其中优选Cu(II)、Pd(II)，更加优选Pd(II)。另外，作为它们的盐，优选卤化物、硫酸盐这些水溶性高的物质。作为上述化合物与金属的组合，例如有铬天青S与Pd(II)的组合、铬天青B与Pd(II)的组合、铬花青R与Cu(II)的组合、邻苯二酚紫与Cu(II)的组合等。其中优选铬天青S与Pd(II)的组合。本专利技术的肌酸酐测定用试片优选还含有缓冲剂。作为上述缓冲剂，例如可以使用磷酸盐、硼酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、三羟甲基氨基甲烷等，优选磷酸盐、硼酸盐、乙酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：小坂秀子，
申请(专利权)人：爱科来株式会社，
类型：发明
国别省市：